杨树phi GST基因家族的功能分化研究
摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-23页 |
·GSTs家族的分类与命名 | 第11-12页 |
·GSTs家族的功能 | 第12-18页 |
·Phi和tau类GSTs | 第13-15页 |
·Zeta和theta类GSTs | 第15-16页 |
·DHAR和lambda类GSTs | 第16-17页 |
·TCHQD类GSTs | 第17页 |
·微粒体类GSTs | 第17-18页 |
·GSTs的系统进化关系 | 第18-19页 |
·GSTs的定位和调节 | 第19-21页 |
·GSTs的蛋白结构和催化机制 | 第21-22页 |
·研究意义与展望 | 第22-23页 |
2 毛白杨phi类GSTs分子克隆与结构分析 | 第23-38页 |
·材料与方法 | 第23-28页 |
·实验材料 | 第23页 |
·毛白杨cDNA的合成 | 第23-24页 |
·设计克隆引物 | 第24-25页 |
·目的基因PCR扩增 | 第25页 |
·割胶回收PCR产物 | 第25-26页 |
·构建克隆载体及测序 | 第26-27页 |
·序列相似性分析 | 第27页 |
·系统发生关系及蛋白质结构域分析 | 第27-28页 |
·蛋白质三维结构模拟 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-36页 |
·毛白杨总RNA的提取 | 第28页 |
·目的基因的扩增 | 第28-29页 |
·克隆载体的构建与鉴定 | 第29页 |
·目的基因的测序结果及序列分析 | 第29-31页 |
·蛋白质保守结构域分析 | 第31-32页 |
·多序列比对分析 | 第32-34页 |
·系统发生关系分析 | 第34-35页 |
·蛋白质三维结构模拟 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
3 毛白杨phi类GSTs基因表达模式分析 | 第38-42页 |
·材料与方法 | 第38-39页 |
·实验材料 | 第38页 |
·RT-PCR引物的设计 | 第38页 |
·各组织总RNA的提取 | 第38页 |
·cDNA的合成 | 第38-39页 |
·RT-PCR反应 | 第39页 |
·结果与分析 | 第39-41页 |
·毛白杨总RNA的提取 | 第39-40页 |
·毛白杨cDNA的检测 | 第40页 |
·RT-PCR结果检测 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
4 毛白杨phi类GSTs蛋白质的功能研究 | 第42-54页 |
·实验方法 | 第42-47页 |
·表达引物的设计 | 第42页 |
·PCR扩增目的基因 | 第42页 |
·PCR产物割胶回收 | 第42页 |
·克隆载体的构建和测序 | 第42-43页 |
·表达载体的构建 | 第43-45页 |
·重组蛋白的原核表达 | 第45-46页 |
·蛋白质的纯化 | 第46页 |
·蛋白质酶学活性测定 | 第46-47页 |
·结果与分析 | 第47-52页 |
·克隆载体构建 | 第47页 |
·表达载体的构建 | 第47-49页 |
·重组蛋白的体外诱导表达和纯化 | 第49-50页 |
·蛋白活性的测定 | 第50-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
5 总结 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
个人简介 | 第63-64页 |
导师简介 | 第64-66页 |
获得成果目录 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |