中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 细胞凋亡检测的研究进展 | 第9-23页 |
1 前言 | 第9-10页 |
2 体外细胞凋亡的检测 | 第10-14页 |
·形态学观察 | 第11页 |
·DNA凝胶电泳 | 第11-12页 |
·TUNEL检测法 | 第12页 |
·EHSA法 | 第12页 |
·流式细胞术 | 第12-13页 |
·细胞色素C | 第13页 |
·Caspase-3和PARP | 第13-14页 |
·阳离子脂质体 | 第14页 |
3 体内细胞凋亡的检测 | 第14-22页 |
·Annexin Ⅴ | 第15-16页 |
·Synaptotagmiin Ⅰ-C2A | 第16-18页 |
·ApoSense家族分子 | 第18-21页 |
·PS结合多肽 | 第21-22页 |
4 结论 | 第22-23页 |
第二章 AnnexinV变体的构建与体外活性研究 | 第23-45页 |
1 前言 | 第23-24页 |
2 实验材料 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·仪器耗材 | 第24页 |
·细菌细胞 | 第24页 |
3 实验方法 | 第24-30页 |
·EGFP-AnnexinV变体表达质粒的构建 | 第25-28页 |
·TagRFP-AnnexinV表达质粒的构建 | 第28页 |
·AnnexinV变体的表达与纯化 | 第28-29页 |
·细胞凋亡的诱导 | 第29-30页 |
·流式细胞术检测AnnexinV变体的活性 | 第30页 |
·不同荧光标记的AnnexinV变体与凋亡细胞结合的研究 | 第30页 |
4 结果 | 第30-43页 |
·AnnexinV与家族成员的序列比对结果 | 第30-33页 |
·AnnexinV的四个repeat之间序列比对结果 | 第33-34页 |
·不同荧光标记表达质粒的构建 | 第34-35页 |
·融合蛋白的表达与纯化 | 第35-37页 |
·流式细胞术检测AnnexinV变体的活性 | 第37-40页 |
·AnnexinV变体与PI联用检测细胞凋亡 | 第37-39页 |
·AnnexinV变体单标记检测细胞凋亡 | 第39-40页 |
·不同荧光标记的AnnexinV变体与凋亡细胞结合的研究 | 第40-43页 |
5 讨论 | 第43-45页 |
第三章 AnnexinV变体与PS的分子对接模拟 | 第45-50页 |
1 实验方法 | 第45页 |
·AnnexinV变体三级结构的模拟 | 第45页 |
·AnnexinV变体与磷脂酰丝氨酸的分子对接模拟 | 第45页 |
2 实验结果 | 第45-49页 |
·AnnexinV变体三级结构的模拟 | 第45-46页 |
·AnnexinV变体与磷脂酰丝氨酸的分子对接模拟 | 第46-49页 |
3 讨论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
发表文章 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |