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大肠杆菌利用木聚糖合成木糖醇的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
缩略词表第10-11页
前言第11-12页
第一章 文献综述第12-20页
   ·木聚糖与木糖醇第12-13页
     ·木聚糖第12页
     ·木糖醇第12-13页
   ·木糖醇的生产方法第13-15页
     ·化学法第13-14页
     ·半生物法第14-15页
     ·全生物转化法第15页
   ·木糖醇合成途径中的功能酶第15-17页
     ·木聚糖酶第15-16页
     ·木糖还原酶第16-17页
   ·大肠杆菌合成途径的调控第17-19页
     ·启动子的特性第17-18页
     ·终止子的特性第18页
     ·载体蛋白的调控作用第18-19页
   ·论文研究意义第19页
   ·技术框架第19-20页
第二章 材料和方法第20-42页
   ·材料第20-23页
     ·菌株和质粒第20页
     ·培养基第20页
     ·药品和试剂第20-23页
     ·仪器第23页
   ·方法第23-42页
     ·菌体培养第23-24页
     ·基因组 DNA 的提取第24页
     ·质粒提取第24-25页
     ·PCR 和 OE-PCR 的设计第25-27页
     ·启动子表征强度质粒的构建第27-30页
     ·木聚糖酶和木糖苷酶表达质粒的构建第30-36页
     ·木糖还原酶表达质粒的构建第36-37页
     ·酿酒酵母感受态细胞的制备与电击转化第37-38页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备与热激转化第38页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳第38-39页
     ·大肠杆菌基因组上木糖异构酶基因的敲除第39-40页
     ·木糖醇的检测第40页
     ·启动子强度的检测第40-42页
第三章 大肠杆菌组成型启动子的克隆与表征第42-49页
 引言第42页
   ·启动子克隆与其质粒构建第42-45页
     ·大肠杆菌 C600 基因组的提取第42页
     ·DNA 片段的克隆第42-44页
     ·启动子表征强度的质粒构建第44-45页
   ·启动子强度的表征第45-47页
     ·荧光强度的观察第45-47页
     ·荧光强度的测量第47页
   ·小结第47-49页
第四章 大肠杆菌转化木聚糖合成木糖醇途径的构建第49-74页
 引言第49页
   ·途径分析与设计第49-50页
   ·分步途径的构建第50-68页
     ·木聚糖水解为木糖的途径构建第50-59页
     ·木糖转化木糖醇途径的构建第59-63页
     ·重组蛋白的表达第63-65页
     ·木糖异构酶基因 xylA 的敲除第65-68页
   ·重组菌株的发酵实验第68-72页
     ·菌株 BL21-xyn-xyl 的发酵实验第68页
     ·组成型启动子 PgapA与诱导型启动子 PT7对木糖醇生产的影响第68-72页
   ·大肠杆菌利用木聚糖生产木糖醇途径的集成第72页
   ·小结第72-74页
第五章 结论与展望第74-76页
   ·结论第74页
   ·展望第74-76页
参考文献第76-79页
致谢第79-80页
作者简介第80-81页
导师评阅表第81页

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