摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
·木聚糖与木糖醇 | 第12-13页 |
·木聚糖 | 第12页 |
·木糖醇 | 第12-13页 |
·木糖醇的生产方法 | 第13-15页 |
·化学法 | 第13-14页 |
·半生物法 | 第14-15页 |
·全生物转化法 | 第15页 |
·木糖醇合成途径中的功能酶 | 第15-17页 |
·木聚糖酶 | 第15-16页 |
·木糖还原酶 | 第16-17页 |
·大肠杆菌合成途径的调控 | 第17-19页 |
·启动子的特性 | 第17-18页 |
·终止子的特性 | 第18页 |
·载体蛋白的调控作用 | 第18-19页 |
·论文研究意义 | 第19页 |
·技术框架 | 第19-20页 |
第二章 材料和方法 | 第20-42页 |
·材料 | 第20-23页 |
·菌株和质粒 | 第20页 |
·培养基 | 第20页 |
·药品和试剂 | 第20-23页 |
·仪器 | 第23页 |
·方法 | 第23-42页 |
·菌体培养 | 第23-24页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第24页 |
·质粒提取 | 第24-25页 |
·PCR 和 OE-PCR 的设计 | 第25-27页 |
·启动子表征强度质粒的构建 | 第27-30页 |
·木聚糖酶和木糖苷酶表达质粒的构建 | 第30-36页 |
·木糖还原酶表达质粒的构建 | 第36-37页 |
·酿酒酵母感受态细胞的制备与电击转化 | 第37-38页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备与热激转化 | 第38页 |
·SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第38-39页 |
·大肠杆菌基因组上木糖异构酶基因的敲除 | 第39-40页 |
·木糖醇的检测 | 第40页 |
·启动子强度的检测 | 第40-42页 |
第三章 大肠杆菌组成型启动子的克隆与表征 | 第42-49页 |
引言 | 第42页 |
·启动子克隆与其质粒构建 | 第42-45页 |
·大肠杆菌 C600 基因组的提取 | 第42页 |
·DNA 片段的克隆 | 第42-44页 |
·启动子表征强度的质粒构建 | 第44-45页 |
·启动子强度的表征 | 第45-47页 |
·荧光强度的观察 | 第45-47页 |
·荧光强度的测量 | 第47页 |
·小结 | 第47-49页 |
第四章 大肠杆菌转化木聚糖合成木糖醇途径的构建 | 第49-74页 |
引言 | 第49页 |
·途径分析与设计 | 第49-50页 |
·分步途径的构建 | 第50-68页 |
·木聚糖水解为木糖的途径构建 | 第50-59页 |
·木糖转化木糖醇途径的构建 | 第59-63页 |
·重组蛋白的表达 | 第63-65页 |
·木糖异构酶基因 xylA 的敲除 | 第65-68页 |
·重组菌株的发酵实验 | 第68-72页 |
·菌株 BL21-xyn-xyl 的发酵实验 | 第68页 |
·组成型启动子 PgapA与诱导型启动子 PT7对木糖醇生产的影响 | 第68-72页 |
·大肠杆菌利用木聚糖生产木糖醇途径的集成 | 第72页 |
·小结 | 第72-74页 |
第五章 结论与展望 | 第74-76页 |
·结论 | 第74页 |
·展望 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
作者简介 | 第80-81页 |
导师评阅表 | 第81页 |