| 论文创新点 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 综述 | 第13-27页 |
| ·NLK的发现 | 第13-15页 |
| ·NLK是细胞信号转导调节子 | 第15-21页 |
| ·NLK在Wnt/β-catenin信号通路中的作用 | 第15-17页 |
| ·NLK调节多个转录因子 | 第17-19页 |
| ·NLK定位于膜组份 | 第19-21页 |
| ·NLK的调节 | 第21-24页 |
| ·NLK激酶活性调节的分子机制 | 第21-22页 |
| ·NLK对氯化锂敏感 | 第22-23页 |
| ·NLK被microRNA调节 | 第23页 |
| ·NLK选择性控制信号转导 | 第23-24页 |
| ·NLK在发育中的作用 | 第24-26页 |
| ·NLK在神经系统发育中的作用 | 第24页 |
| ·NLK在非神经系统发育中的作用 | 第24-26页 |
| ·NLK在癌症中的作用 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-37页 |
| ·材料 | 第27-30页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·质粒构建,荧光索酶报告基因 | 第27页 |
| ·菌株,病毒及细胞 | 第27页 |
| ·主要抗体 | 第27-28页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第28-29页 |
| ·主要仪器和设备 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-37页 |
| ·基因克隆 | 第30-31页 |
| ·目的片段的扩增 | 第30页 |
| ·PCR产物回收 | 第30页 |
| ·载体和PCR产物的酶切 | 第30页 |
| ·连接转化 | 第30-31页 |
| ·慢病毒包装及感染 | 第31页 |
| ·RNA提取、反转录和qPCR | 第31-33页 |
| ·RNA提取 | 第31-32页 |
| ·反转录 | 第32页 |
| ·荧光定量PCR | 第32-33页 |
| ·细胞培养和基因转染 | 第33页 |
| ·细胞培养 | 第33页 |
| ·细胞转染 | 第33页 |
| ·免疫共沉淀和免疫印迹 | 第33-34页 |
| ·同源重组介导的基因敲除 | 第34页 |
| ·荧光素酶报告基因实验 | 第34页 |
| ·集落形成和软琼脂实验 | 第34-35页 |
| ·集落形成实验 | 第34页 |
| ·软琼脂实验 | 第34-35页 |
| ·细胞增殖实验 | 第35页 |
| ·裸鼠异种移植模型 | 第35页 |
| ·免疫荧光实验 | 第35页 |
| ·空斑实验 | 第35-36页 |
| ·体外激酶实验 | 第36-37页 |
| 3 研究结果与讨论 | 第37-102页 |
| ·NLK在NF-κB信号通路中的作用机制和功能研究 | 第37-61页 |
| ·研究背景 | 第37-43页 |
| ·NF-κB信号通路 | 第37-39页 |
| ·IKK复合物 | 第39-43页 |
| ·实验结果 | 第43-59页 |
| ·NLK基因敲除细胞系获得 | 第43-44页 |
| ·NLK缺失增强了NF-κB的激活及其下游基因表达 | 第44-47页 |
| ·过表达NLK抑制TNFα诱导的NF-κB激活 | 第47-50页 |
| ·NLK影响IκBα的降解并调节p65/RelA的核定位 | 第50-52页 |
| ·NLK在IKK复合物水平抑制TNFα诱导的NF-κB激活 | 第52-55页 |
| ·NLK影响TAK1和IKKβ的相互作用并抑制IKKα和IKKβ的磷酸化 | 第55-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·NLK在细胞抗病毒应答中的作用机制和功能研究 | 第61-89页 |
| ·研究背景 | 第61-70页 |
| ·天然免疫概述 | 第61页 |
| ·模式识别受体介导的天然免疫信号转导 | 第61-67页 |
| ·RLR通路的泛素化在天然免疫中的作用 | 第67-70页 |
| ·实验结果 | 第70-86页 |
| ·NLK负调节病毒诱导的IFN-β激活 | 第70-72页 |
| ·NLK缺失增强了SeV诱导的IFN-β激活和细胞抗病毒应答 | 第72-74页 |
| ·NLK回复了该基因缺失引起的表型 | 第74-77页 |
| ·NLK和TRAF3相互作用并磷酸化TRAF3 | 第77-79页 |
| ·NLK磷酸化TRAF3第9位丝氨酸并抑制TRAF3 K63连接的泛素化 | 第79-82页 |
| ·模拟磷酸化突变的TRAF3抑制了TRAF3 K63连接的泛素化和激活 | 第82-86页 |
| ·讨论 | 第86-89页 |
| ·NLK在肿瘤发生中的作用机制研究 | 第89-102页 |
| ·研究背景 | 第89-92页 |
| ·癌症和细胞周期 | 第89-90页 |
| ·G_1期和G_1/S期检验点应答 | 第90-92页 |
| ·实验结果 | 第92-100页 |
| ·NLK缺失影响结肠癌细胞系HCT116的癌细胞特性 | 第92-93页 |
| ·NLK缺失影响HCT116细胞的成瘤能力 | 第93-95页 |
| ·NLK通过调控细胞周期影响结肠癌细胞系HCT116的生长和成瘤能力 | 第95-100页 |
| ·讨论 | 第100-102页 |
| 研究总结 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-115页 |
| 攻博期间发表的相关论文 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
