| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 引言 | 第8-14页 |
| ·GnRH 神经细胞的作用及迁移路径 | 第8页 |
| ·影响 GnRH 神经细胞迁移的因素 | 第8-10页 |
| ·钙粘素(Cadherin)家族 | 第10-11页 |
| ·Cadherin 分子参与细胞粘附 | 第10页 |
| ·N-Cadherin 可能与细胞极性有关 | 第10-11页 |
| ·N-Cadherin 参与细胞的迁移 | 第11页 |
| ·Cadherin 分子参与 Wnt 信号传导通路 | 第11页 |
| ·肌球蛋白家族 | 第11-13页 |
| ·Myo X 的结构 | 第12页 |
| ·Myo X 对于丝足的形成和延伸以及丝足内的物质运输起到关键作用 | 第12页 |
| ·Myo X 参与信号传导过程 | 第12-13页 |
| ·Myo X 对于细胞间粘附的形成及细胞迁移起着重要的作用 | 第13页 |
| ·立题依据 | 第13-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-22页 |
| ·动物材料和细胞株 | 第14页 |
| ·质粒和引物 | 第14页 |
| ·化学试剂 | 第14-15页 |
| ·抗体 | 第15页 |
| ·仪器 | 第15页 |
| ·Myo X -SiRNA 与Scramble miRNA 质粒大提 | 第15-16页 |
| ·Myo X -SiRNA 与Scramble miRNA 质粒电转NLT 细胞 | 第16页 |
| ·细胞蛋白提取液RIPA 缓冲液的配制 | 第16-17页 |
| ·质粒转化及细胞蛋白抽提 | 第17页 |
| ·Western blot 分析 | 第17-18页 |
| ·免疫共沉淀 | 第18页 |
| ·免疫荧光检测Myo X -SiRNA 过表达对粘着斑和细胞骨架的影响 | 第18页 |
| ·细胞与基质间粘附的测定 | 第18-19页 |
| ·细胞总RNA 的提取和实时荧光定量PCR | 第19-20页 |
| ·细胞总RNA 的提取 | 第19页 |
| ·去除DNA 污染 | 第19页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第19-20页 |
| ·real-time PCR 以检测Myo X -SiRNA 过表达对NCAM 和N-Cadherin 表达的影响 | 第20页 |
| ·real-time PCR 数据处理及统计学分析 | 第20页 |
| ·鼠尾胶原的制备 | 第20-21页 |
| ·细胞团的制备与培养 | 第21页 |
| ·胶原凝胶包埋细胞团 | 第21-22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-27页 |
| ·Myo X 与N-Cadherin 相互作用 | 第22页 |
| ·沉默Myo X 降低细胞粘附 | 第22-23页 |
| ·沉默Myo X 降低细胞骨架的稳定性 | 第23-24页 |
| ·沉默Myo X 导致N-Cadherin 转录与表达的下调 | 第24-25页 |
| ·N-Cadherin 的过表达补救 Myo X Knockdown 引起的细胞迁移能力减低 | 第25-27页 |
| 4 讨论 | 第27-29页 |
| 5 结论 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-33页 |
| 致谢 | 第33页 |
