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亲和性离子液体的合成及应用于组氨酸标签蛋白纯化的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
目录第10-13页
第1章 引言第13-26页
   ·离子液体第13-17页
     ·离子液体的特性第13-14页
     ·离子液体的应用第14-17页
   ·功能化离子液体(Functionalized ionic liquids,FILs)第17-20页
     ·功能化离子液体的合成第18-19页
     ·功能化离子液体的应用前景第19-20页
   ·固定化金属离子亲和色谱(Immobilized metal ion affinity chromatography,IMAC)第20-22页
     ·IMAC基本原理第20-21页
     ·1,4,7-triazacyclononane(tacn)在IMAC中的应用第21-22页
   ·功能化离子液体应用于蛋白纯化第22-24页
     ·基于离子液体的辅助萃取体系第22-23页
     ·亲和性离子液体(Affinity ionic liquid,AIL)第23-24页
   ·应用于组氨酸标签蛋白纯化的亲和性离子液体液液萃取体系的设计及研究第24-26页
     ·液液萃取技术第24页
     ·亲和性离子液体萃取体系的设计及研究第24-25页
     ·本研究的主要意义第25-26页
第2章 亲和性离子液体的合成第26-33页
   ·试剂与仪器第26-27页
   ·亲和性离子液体的合成路线及方法第27-30页
     ·1,4-dimethyl-1,4,7-triazacyclononane的合成第28-29页
     ·亲和性离子液体的合成第29-30页
   ·实验结果第30-31页
     ·1,4-dimethyl-1,4,7-triazacyclononane及主要中间产物数据第30-31页
     ·亲和性离子液体及中间产物数据第31页
   ·本章小结第31-33页
第3章 亲和性离子液体螯合金属离子及其亲和性能的研究第33-42页
   ·试剂与仪器第33-34页
   ·亲和性离子液体与金属离子螯合特性分析第34-36页
     ·亲和性离子液体与金属离子的结合与解吸第34-35页
     ·亲和性离子液体结合金属离子量的检测第35-36页
   ·亲和性离子液体与聚组氨酸多肽亲和性能的研究第36-37页
     ·亲和性离子液体与FITC-(His)_6-OH的准备第36页
     ·亲和性离子液体与FITC-(His)_6-OH的亲和测试第36-37页
   ·结果与讨论第37-41页
     ·亲和性离子液体与金属离子的螯合特性第37-38页
     ·亲和性离子液体螯合金属离子后对聚六组氨酸多肽的亲和第38-41页
   ·本章小结第41-42页
第4章 离子强度及亲和性离子液体浓度对于亲和介质与组氨酸标签增强型绿色荧光蛋白结合的影响第42-51页
   ·试剂与仪器第42-43页
   ·试验方法第43-45页
     ·His-tag EGFP与M-AIL在不同离子强度下的亲和与洗脱第43-44页
     ·AIL浓度对M-AIL与His-tag EGFP结合的影响第44页
     ·BCA法测定洗脱蛋白浓度第44-45页
   ·结果与讨论第45-49页
     ·离子强度对M-AIL亲和His-tag EGFP的影响第45-47页
     ·AIL浓度对M-AIL与His-tag EGFP结合的影响第47-49页
   ·本章小结第49-51页
第5章 亲和性离子液体液液萃取纯化大肠杆菌表达的组氨酸标签增强型绿色荧光蛋白第51-60页
   ·试剂与仪器第51-52页
   ·试验方法第52-55页
     ·IMAC法纯化大肠杆菌表达粗蛋白中的His-tag EGFP第52-53页
     ·通过M-AIL纯化大肠杆菌表达粗蛋白中的His-tag EGFP第53页
     ·Zn-AIL与Cu-AIL对于His-tag EGFP的二次纯化第53-54页
     ·SDS-PAGE分析第54-55页
   ·结果与讨论第55-59页
   ·本章小结第59-60页
第6章 M-AIL重复利用能力以及重复利用方法的研究第60-65页
   ·试剂与仪器第60-61页
   ·M-AIL的重复利用测试第61-62页
   ·结果与讨论第62-64页
   ·本章小结第64-65页
第7章 总结、创新点与展望第65-69页
   ·总结第65-67页
   ·创新点第67页
   ·展望第67-69页
参考文献第69-78页
附录1:主要合成产物核磁、质谱图第78-85页
附录2:研究生期间发表论文情况第85-86页
致谢第86-87页

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