猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查及NSP2、ORF5基因的遗传变异分析
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征 | 第10页 |
| ·PRRS的流行病学特点及其危害 | 第10-11页 |
| ·PRRSV病原特性 | 第11-16页 |
| ·PRRSV的分类 | 第11-12页 |
| ·PRRSV的理化特性 | 第12页 |
| ·PRRSV的抗原性 | 第12-13页 |
| ·PRRSV体外培养及体内组织分布 | 第13页 |
| ·PRRSV致病机理及生物学特性 | 第13-16页 |
| ·PRRSV分子生物学研究进展 | 第16-22页 |
| ·PRRSV基因组结构及功能 | 第16-19页 |
| ·PRRSV的基因组遗传变异 | 第19-22页 |
| 第2章 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 第3章 材料与方法 | 第23-30页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·病料、菌株、克隆载体 | 第23页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基及抗生素的配制 | 第24页 |
| ·主要缓冲溶液及相关试剂配制 | 第24页 |
| ·感受态细胞制备保存用试剂 | 第24-25页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第25页 |
| ·引物设计与合成 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-30页 |
| ·样品采集与处理 | 第25页 |
| ·总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·两步法RT-PCR | 第26-27页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第27页 |
| ·回收后的DNA片度与质粒连接 | 第27-28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28页 |
| ·质粒的小量提取(试剂盒购自全式金公司) | 第28-29页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·测序 | 第29-30页 |
| 第4章 结果与分析 | 第30-44页 |
| ·样品的检测 | 第30-31页 |
| ·2006年到2010年PRRSV流行状况分析 | 第31-32页 |
| ·目的基因扩增、重组质粒构建及鉴定结果 | 第32-34页 |
| ·HUBQJ1-2_2009的发现 | 第34页 |
| ·NSP2氨基酸序列同源性分析 | 第34-35页 |
| ·NSP2氨基酸序列比对分析 | 第35-36页 |
| ·NSP2氨基酸序列进化树分析 | 第36-38页 |
| ·ORF5推导的氨基酸序列同源性分析 | 第38页 |
| ·ORF5推导的氨基酸序列比对分析 | 第38-40页 |
| ·ORF5推导的氨基酸序列进化树分析 | 第40-42页 |
| ·GP5 N-糖基化位点分析 | 第42-44页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第44-47页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| ·结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54-60页 |
