| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 英文缩略词表 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 布鲁氏菌与自噬研究进展 | 第15-25页 |
| 1 布鲁氏菌基本特征 | 第15-18页 |
| ·布鲁氏菌的分类与特点 | 第15-16页 |
| ·人布鲁氏菌病 | 第16页 |
| ·牛布鲁氏菌病 | 第16-17页 |
| ·非调理布鲁氏菌在细胞内的生存方式 | 第17页 |
| ·调理布鲁氏菌在细胞内的生存方式 | 第17页 |
| ·布鲁氏菌的毒力、胞内生存和复制 | 第17-18页 |
| 2 布鲁氏菌外膜蛋白研究进展 | 第18-20页 |
| ·外膜蛋白概述 | 第18页 |
| ·第一组外膜蛋白 | 第18页 |
| ·第二组外膜蛋白 | 第18-19页 |
| ·第三组外膜蛋白 | 第19-20页 |
| 3 布鲁氏菌与自噬研究进展 | 第20-25页 |
| ·自噬概述 | 第20页 |
| ·自噬的激活 | 第20-21页 |
| ·自噬与疾病 | 第21页 |
| ·自噬的监测方法 | 第21-23页 |
| ·布鲁氏菌与自噬 | 第23-25页 |
| 第二章 实验研究 | 第25-69页 |
| 实验一 布鲁氏菌omp25基因原核表达载体的构建与表达 | 第25-37页 |
| 摘要 | 第25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-33页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·方法 | 第27-33页 |
| 2 结果 | 第33-35页 |
| ·omp25基因PCR扩增结果 | 第33-34页 |
| ·测序结果 | 第34页 |
| ·重组表达质粒pET28a-GFP-omp25的酶切鉴定结果 | 第34页 |
| ·OMP25蛋白的表达和纯化结果 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| 实验二 布鲁氏菌S2308Δomp25基因缺失株的构建及其稳定性检测 | 第37-57页 |
| 摘要 | 第37页 |
| 1 材料与方法 | 第37-47页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·方法 | 第38-47页 |
| 2 结果 | 第47-54页 |
| ·扩增omp25基因上、下游同源臂 | 第47页 |
| ·omp25基因上、下游同源臂融合PCR | 第47页 |
| ·SacB基因的扩增 | 第47-48页 |
| ·酶切鉴定重组质粒（T载体）pMD19-omp2534 | 第48页 |
| ·酶切鉴定重组质粒（自杀载体）pGEM-7zf+-omp25-SacB | 第48-49页 |
| ·布鲁氏菌omp25基因缺失株同源重组单双交换子的筛选 | 第49-50页 |
| ·2308Δomp25基因缺失株的遗传稳定性检测 | 第50-51页 |
| ·2308Δomp25基因缺失株毒力的初步评价 | 第51-54页 |
| 3 讨论 | 第54-57页 |
| ·基因敲除技术 | 第54页 |
| ·电转化效率 | 第54页 |
| ·omp25基因缺失株毒力 | 第54-57页 |
| 实验三 布鲁氏菌omp25基因缺失株对胚胎滋养层细胞的自噬作用 | 第57-69页 |
| 摘要 | 第57-58页 |
| 1 材料方法 | 第58-63页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-63页 |
| 2 结果 | 第63-66页 |
| ·激光共聚焦 | 第63-65页 |
| ·RNA提取 | 第65页 |
| ·实时定量检测 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-69页 |
| ·镜检样本制作的分析 | 第66页 |
| ·缺失株对细胞自噬的作用 | 第66-69页 |
| 结论 | 第69-71页 |
| 创新点 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 作者简介 | 第85-86页 |
| 附件 | 第86页 |
