摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
英文缩略表 | 第14-15页 |
第一章 引言 | 第15-21页 |
·先天性免疫与病毒感染 | 第15页 |
·先天性免疫系统中识别病原的受体 | 第15-16页 |
·RIG-1 的结构和功能 | 第16-17页 |
·RIG-1 的抗病毒机理 | 第17-18页 |
·RIG-1 的其他功能 | 第18-19页 |
·RIG-1 与炎症反应 | 第18页 |
·RIG-1 与癌症 | 第18页 |
·RIG-1 与细胞凋亡 | 第18-19页 |
·RIG-1 与吞噬作用 | 第19页 |
·RIG-1 与禽类抗病毒天然免疫 | 第19-21页 |
第二章 鸭 RIG-1 基因的克隆及组织表达分析 | 第21-26页 |
·材料和方法 | 第21-23页 |
·实验动物 | 第21页 |
·载体与菌株 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·引物设计 | 第21-22页 |
·总 RNA 的提取与 cDNA 的合成 | 第22页 |
·RIG-1 基因的克隆及序列分析 | 第22页 |
·RIG-1 基因组织表达水平检测 | 第22-23页 |
·结果 | 第23-24页 |
·RIG-1 基因的克隆 | 第23页 |
·同源性及进化树分析结果 | 第23-24页 |
·RIG-1 在金定鸭不同组织中的表达水平 | 第24页 |
·讨论 | 第24-26页 |
第三章 鸭 RIG-1 蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备 | 第26-34页 |
·材料和方法 | 第26-29页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·实验动物 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·主要溶液的配制 | 第26-27页 |
·引物设计 | 第27页 |
·RIG-1 基因的分段克隆及原核表达载体的构建 | 第27页 |
·RIG-1 蛋白的原核表达与纯化 | 第27-28页 |
·鼠抗鸭 RIG-1 蛋白单克隆抗体(mAb)的制备 | 第28页 |
·鼠抗鸭 RIG-1mAb 的鉴定分析 | 第28-29页 |
·结果 | 第29-33页 |
·RIG-1 蛋白分段表达纯化结果 | 第29-30页 |
·RIG-1 蛋白抗体效价检测结果 | 第30-31页 |
·RIG-1 蛋白抗体 Western 鉴定分析结果 | 第31页 |
·RIG-1 蛋白抗体的 IFA 鉴定分析结果 | 第31-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
第四章 鸭 RIG-1 蛋白体外抗禽流感病毒的研究 | 第34-40页 |
·材料和方法 | 第34-36页 |
·病毒株和细胞 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·引物设计 | 第34-35页 |
·细胞转染 | 第35页 |
·Western blot 检测鸭 RIG-1 在 DF-1 细胞中的表达 | 第35页 |
·病毒半数细胞培养感染量(TCID_50)的测定 | 第35页 |
·qRT-PCR 检测 Mx、IFN-β和 AIV PB2 片段 | 第35-36页 |
·IFA 检测 DF-1 细胞中 AIV 的复制 | 第36页 |
·结果 | 第36-38页 |
·鸭 RIG-1 基因在 DF-1 细胞中表达的检测结果 | 第36页 |
·病毒 TCID_50测定结果 | 第36页 |
·qRT-PCR 检测 IFN-β、Mx 及 AIV PB2 片段相对表达量结果 | 第36-37页 |
·IFA 检测 DF-1 细胞中 AIV 复制结果 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第五章 禽流感病毒感染海兰白鸡感染模型的建立 | 第40-45页 |
·材料和方法 | 第40-41页 |
·毒株 | 第40页 |
·实验动物 | 第40页 |
·引物设计 | 第40页 |
·病毒的繁殖及血凝价滴定 | 第40页 |
·病毒鸡胚半数感染量(EID_50)的测定 | 第40页 |
·病毒半数致死量(LD_50)的测定 | 第40-41页 |
·GD1/96 对海兰白鸡致病性研究 | 第41页 |
·病毒在濒死鸡肺组织中的滴定以及拭子滴定 | 第41页 |
·qRT-PCR 法检测肺组织中 IFN-α和 TNF-α的相对表达 | 第41页 |
·结果 | 第41-43页 |
·病毒 EID_50的测定结果 | 第41页 |
·病毒 LD_50的测定结果 | 第41-42页 |
·AIV 对海兰白鸡致病性的结果 | 第42页 |
·qRT-PCR 检测肺组织中 IFN-α和 TNF-α相对表达的结果 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第六章 全文结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简历 | 第52页 |