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鸭RIG-1基因抗禽流感病毒的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
英文缩略表第14-15页
第一章 引言第15-21页
   ·先天性免疫与病毒感染第15页
   ·先天性免疫系统中识别病原的受体第15-16页
   ·RIG-1 的结构和功能第16-17页
   ·RIG-1 的抗病毒机理第17-18页
   ·RIG-1 的其他功能第18-19页
     ·RIG-1 与炎症反应第18页
     ·RIG-1 与癌症第18页
     ·RIG-1 与细胞凋亡第18-19页
     ·RIG-1 与吞噬作用第19页
   ·RIG-1 与禽类抗病毒天然免疫第19-21页
第二章 鸭 RIG-1 基因的克隆及组织表达分析第21-26页
   ·材料和方法第21-23页
     ·实验动物第21页
     ·载体与菌株第21页
     ·主要仪器第21页
     ·主要试剂第21页
     ·引物设计第21-22页
     ·总 RNA 的提取与 cDNA 的合成第22页
     ·RIG-1 基因的克隆及序列分析第22页
     ·RIG-1 基因组织表达水平检测第22-23页
   ·结果第23-24页
     ·RIG-1 基因的克隆第23页
     ·同源性及进化树分析结果第23-24页
     ·RIG-1 在金定鸭不同组织中的表达水平第24页
   ·讨论第24-26页
第三章 鸭 RIG-1 蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备第26-34页
   ·材料和方法第26-29页
     ·主要仪器第26页
     ·实验动物第26页
     ·主要试剂第26页
     ·主要溶液的配制第26-27页
     ·引物设计第27页
     ·RIG-1 基因的分段克隆及原核表达载体的构建第27页
     ·RIG-1 蛋白的原核表达与纯化第27-28页
     ·鼠抗鸭 RIG-1 蛋白单克隆抗体(mAb)的制备第28页
     ·鼠抗鸭 RIG-1mAb 的鉴定分析第28-29页
   ·结果第29-33页
     ·RIG-1 蛋白分段表达纯化结果第29-30页
     ·RIG-1 蛋白抗体效价检测结果第30-31页
     ·RIG-1 蛋白抗体 Western 鉴定分析结果第31页
     ·RIG-1 蛋白抗体的 IFA 鉴定分析结果第31-33页
   ·讨论第33-34页
第四章 鸭 RIG-1 蛋白体外抗禽流感病毒的研究第34-40页
   ·材料和方法第34-36页
     ·病毒株和细胞第34页
     ·主要仪器第34页
     ·主要试剂第34页
     ·引物设计第34-35页
     ·细胞转染第35页
     ·Western blot 检测鸭 RIG-1 在 DF-1 细胞中的表达第35页
     ·病毒半数细胞培养感染量(TCID_50)的测定第35页
     ·qRT-PCR 检测 Mx、IFN-β和 AIV PB2 片段第35-36页
     ·IFA 检测 DF-1 细胞中 AIV 的复制第36页
   ·结果第36-38页
     ·鸭 RIG-1 基因在 DF-1 细胞中表达的检测结果第36页
     ·病毒 TCID_50测定结果第36页
     ·qRT-PCR 检测 IFN-β、Mx 及 AIV PB2 片段相对表达量结果第36-37页
     ·IFA 检测 DF-1 细胞中 AIV 复制结果第37-38页
   ·讨论第38-40页
第五章 禽流感病毒感染海兰白鸡感染模型的建立第40-45页
   ·材料和方法第40-41页
     ·毒株第40页
     ·实验动物第40页
     ·引物设计第40页
     ·病毒的繁殖及血凝价滴定第40页
     ·病毒鸡胚半数感染量(EID_50)的测定第40页
     ·病毒半数致死量(LD_50)的测定第40-41页
     ·GD1/96 对海兰白鸡致病性研究第41页
     ·病毒在濒死鸡肺组织中的滴定以及拭子滴定第41页
     ·qRT-PCR 法检测肺组织中 IFN-α和 TNF-α的相对表达第41页
   ·结果第41-43页
     ·病毒 EID_50的测定结果第41页
     ·病毒 LD_50的测定结果第41-42页
     ·AIV 对海兰白鸡致病性的结果第42页
     ·qRT-PCR 检测肺组织中 IFN-α和 TNF-α相对表达的结果第42-43页
   ·讨论第43-45页
第六章 全文结论第45-46页
参考文献第46-51页
致谢第51-52页
作者简历第52页

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