| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词中英文对照 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-34页 |
| 1 发酵床饲养技术研究背景及发展现状 | 第13-14页 |
| 2 发酵床主要微生物 | 第14-16页 |
| ·芽孢杆菌 | 第14-15页 |
| ·大肠杆菌 | 第15页 |
| ·乳酸杆菌 | 第15-16页 |
| ·产甲烷菌 | 第16页 |
| 3 影响发酵床中微生物活性的因素 | 第16-18页 |
| ·C/N | 第16-17页 |
| ·pH | 第17-18页 |
| ·温度 | 第18页 |
| ·含氧量与含水量 | 第18页 |
| 4 发酵床温室气体产生因素 | 第18-22页 |
| ·CO_2 | 第19页 |
| ·CH_4 | 第19页 |
| ·N_2O | 第19-20页 |
| ·CO | 第20-22页 |
| ·NH_3 | 第22页 |
| 5 分子技术 | 第22-28页 |
| ·以生化技术为基础的研究方法 | 第23-24页 |
| ·现代分子生物学技术 | 第24-25页 |
| ·宏基因组学 | 第25页 |
| ·基因指纹图谱技术 | 第25-26页 |
| ·Real-Time PCR | 第26-27页 |
| ·DGGE | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-34页 |
| 第二章 试验部分 | 第34-88页 |
| 试验一 去除发酵床垫料中PCR抑制因子的方法 | 第34-49页 |
| 摘要 | 第34页 |
| 1 材料与方法 | 第34-38页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·样本细菌总DNA的分离 | 第34-36页 |
| ·不同盐酸硫胺素浓度梯度提取效果 | 第36页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳定性分析 | 第36-37页 |
| ·Real-Time PCR定量分析 | 第37-38页 |
| 2 结果 | 第38-45页 |
| ·传统试剂盒法 | 第38-39页 |
| ·传统CTAB方法 | 第39-40页 |
| ·试剂盒改进方法 | 第40-41页 |
| ·CTAB改进方法 | 第41-42页 |
| ·不同盐酸硫胺素浓度梯度提取效果比较 | 第42-43页 |
| ·Real-Time PCR法检测盐酸硫胺素对发酵床垫料细菌DNA提取质量的影响 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| ·影响发酵床垫料PCR扩增的因素 | 第45-46页 |
| ·去除发酵床垫料PCR抑制因子的方法 | 第46页 |
| ·不同盐酸硫胺素浓度对发酵床垫料样本PCR结果的影响 | 第46-47页 |
| ·不同聚合酶对发酵床垫料细菌总DNA样本进行Real-Time PCR检测的影响 | 第47页 |
| 4 小结 | 第47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 试验二 发酵床不同深度垫料中菌群相似性分析 | 第49-56页 |
| 摘要 | 第49-50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-52页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·样本细菌总DNA的分离 | 第50页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测DNA | 第50-51页 |
| ·PCR扩增 | 第51页 |
| ·DGGE | 第51-52页 |
| ·数据分析 | 第52页 |
| 2. 结果与讨论 | 第52-54页 |
| 3. 小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| 试验三 REAL-TIME PCR检测发酵床垫料中大肠杆菌、乳酸杆菌、产甲烷菌数量的研究 | 第56-65页 |
| 摘要 | 第56-57页 |
| 1 材料与方法 | 第57-59页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·样本细菌总DNA的分离 | 第57页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳定性分析 | 第57-58页 |
| ·Real-Time PCR定量分析 | 第58-59页 |
| 2 结果 | 第59-62页 |
| ·采用Real-Time PCR对发酵床不同深度中大肠杆菌数量的研究 | 第59-60页 |
| ·采用Real-Time PCR对发酵床不同深度中乳酸杆菌数量的研究 | 第60-61页 |
| ·采用Real-Time PCR对发酵床不同深度中产甲烷菌数量的研究 | 第61-62页 |
| 3. 讨论 | 第62-63页 |
| ·发酵床垫料中大肠杆菌分布 | 第62页 |
| ·发酵床垫料中乳酸杆菌分布 | 第62-63页 |
| ·发酵床垫料中产甲烷菌分布 | 第63页 |
| 4. 小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-65页 |
| 试验四 发酵床不同深度垫料中温室气体的研究 | 第65-88页 |
| 摘要 | 第65-66页 |
| 1. 材料与方法 | 第66页 |
| 2. 结果与讨论 | 第66-85页 |
| ·发酵床不同深度垫料中CO_2浓度分布研究 | 第66-70页 |
| ·发酵床不同深度垫中CH_4浓度分布 | 第70-74页 |
| ·发酵床不同深度垫料中CO与N_2O浓度分布的研究 | 第74-81页 |
| ·发酵床不同深度垫料中NH_3浓度分布 | 第81-85页 |
| ·发酵床不同深度垫料中H_2O浓度分布 | 第85页 |
| 3. 小结 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-88页 |
| 全文结论 | 第88-90页 |
| 已发表文章 | 第90-92页 |
| 创新点 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94页 |