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氧化葡萄糖酸杆菌D-木糖代谢途经的遗传分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 前言第11-22页
   ·醋酸菌第11-12页
     ·醋酸菌的特性第11页
     ·醋酸菌的分类和生理学第11-12页
   ·氧化葡萄糖酸杆菌第12-18页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌的简介第12-13页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌的基因组特征第13页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌的呼吸链第13-15页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌的脱氢酶第15-17页
       ·细胞膜上的氧化还原酶第15页
       ·细胞内的氧化还原酶第15-17页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌的中心代谢第17-18页
   ·氧化葡萄糖酸杆菌的木糖代谢途径第18-19页
   ·氧化葡萄糖酸杆菌木糖代谢中的相关酶第19-20页
     ·木糖醇脱氢酶第19-20页
     ·木酮糖激酶第20页
   ·本课题研究的主要内容第20-22页
第二章 氧化葡萄糖酸杆菌621H和621H Δmgdh在木糖培养基上的生长第22-29页
   ·引言第22页
   ·实验材料第22-23页
     ·菌种第22页
     ·培养基第22页
     ·实验仪器第22-23页
   ·实验方法第23-26页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌的培养第23页
     ·细胞生长的测定第23-24页
     ·木糖含量检测第24-25页
     ·木糖酸含量检测第25页
     ·静息细胞催化验证第25-26页
   ·结果与分析第26-28页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌621H和621H Δmgdh在木糖培养基上的生长第26-27页
     ·静息细胞催化验证第27-28页
   ·本章小结第28-29页
第三章 氧化葡萄糖酸杆菌xdh基因的功能鉴定第29-45页
   ·引言第29页
   ·实验材料第29-31页
     ·菌株和质粒第29-30页
     ·培养基第30页
     ·实验仪器第30-31页
   ·实验方法第31-38页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌基因组DNA的提取第31-32页
     ·质粒提取第32页
     ·常规PCR反应第32-33页
     ·胶回收第33-34页
     ·DNA的酶切与连接第34页
     ·大肠杆菌JM109感受态的制备第34-35页
     ·转化第35页
     ·敲除载体的构建第35-36页
     ·三亲本接合转移第36-37页
     ·粗酶液的制备第37页
     ·木糖醇脱氢酶活性检测第37-38页
     ·蛋白浓度的测定第38页
   ·结果与分析第38-43页
     ·敲除载体pSUP202-xdh::Km的酶切验证第38-39页
     ·621H Δxdh敲除菌的PCR验证第39-40页
     ·木糖醇脱氢酶的酶活检测第40-41页
     ·621H和621H Δxdh在木糖及木糖醇培养基上的生长第41-43页
   ·本章小结第43-45页
第四章 氧化葡萄糖酸杆菌xk基因的功能鉴定第45-63页
   ·引言第45页
   ·实验材料第45-47页
     ·菌株和质粒第45-46页
     ·培养基第46-47页
     ·实验仪器第47页
   ·实验方法第47-53页
     ·xk基因的异源表达第47页
     ·大肠杆菌细胞的破碎第47-48页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第48-49页
       ·试剂的配制第48页
       ·SDS-聚丙烯凝酰胺胶电泳第48-49页
     ·分子伴侣共表达系统的构建第49-50页
     ·重组蛋白的纯化第50-51页
       ·缓冲液配方第50页
       ·His-tag柱纯化蛋白第50-51页
     ·敲除载体的构建第51-52页
     ·三亲本接合转移第52页
     ·木酮糖激酶活性检测第52页
     ·回补菌的构建及筛选第52-53页
   ·结果与分析第53-61页
     ·xk基因异源表达载体的构建第53页
     ·xk基因的异源可溶表达第53-55页
     ·敲除载体pSUP202-xk::Gen的酶切验证第55-56页
     ·621H Δxk敲除菌的PCR验证第56-57页
     ·木酮糖激酶的酶活检测第57-58页
     ·621H和621H Δxk在木糖及木糖醇培养基上的生长第58-59页
     ·621H和621H Δxk在不同碳源培养基上的生长第59-60页
     ·621H Δxk回补菌的构建第60-61页
     ·621H、621H Δxk和621H Δxk回补菌在甘油培养基上的生长第61页
   ·本章小结第61-63页
第五章 结论与展望第63-65页
   ·结论第63-64页
   ·展望第64-65页
参考文献第65-72页
硕士期间论文发表情况第72-73页
致谢第73页

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