摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 前言 | 第11-22页 |
·醋酸菌 | 第11-12页 |
·醋酸菌的特性 | 第11页 |
·醋酸菌的分类和生理学 | 第11-12页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌 | 第12-18页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌的简介 | 第12-13页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌的基因组特征 | 第13页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌的呼吸链 | 第13-15页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌的脱氢酶 | 第15-17页 |
·细胞膜上的氧化还原酶 | 第15页 |
·细胞内的氧化还原酶 | 第15-17页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌的中心代谢 | 第17-18页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌的木糖代谢途径 | 第18-19页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌木糖代谢中的相关酶 | 第19-20页 |
·木糖醇脱氢酶 | 第19-20页 |
·木酮糖激酶 | 第20页 |
·本课题研究的主要内容 | 第20-22页 |
第二章 氧化葡萄糖酸杆菌621H和621H Δmgdh在木糖培养基上的生长 | 第22-29页 |
·引言 | 第22页 |
·实验材料 | 第22-23页 |
·菌种 | 第22页 |
·培养基 | 第22页 |
·实验仪器 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-26页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌的培养 | 第23页 |
·细胞生长的测定 | 第23-24页 |
·木糖含量检测 | 第24-25页 |
·木糖酸含量检测 | 第25页 |
·静息细胞催化验证 | 第25-26页 |
·结果与分析 | 第26-28页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌621H和621H Δmgdh在木糖培养基上的生长 | 第26-27页 |
·静息细胞催化验证 | 第27-28页 |
·本章小结 | 第28-29页 |
第三章 氧化葡萄糖酸杆菌xdh基因的功能鉴定 | 第29-45页 |
·引言 | 第29页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·菌株和质粒 | 第29-30页 |
·培养基 | 第30页 |
·实验仪器 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-38页 |
·氧化葡萄糖酸杆菌基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
·质粒提取 | 第32页 |
·常规PCR反应 | 第32-33页 |
·胶回收 | 第33-34页 |
·DNA的酶切与连接 | 第34页 |
·大肠杆菌JM109感受态的制备 | 第34-35页 |
·转化 | 第35页 |
·敲除载体的构建 | 第35-36页 |
·三亲本接合转移 | 第36-37页 |
·粗酶液的制备 | 第37页 |
·木糖醇脱氢酶活性检测 | 第37-38页 |
·蛋白浓度的测定 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-43页 |
·敲除载体pSUP202-xdh::Km的酶切验证 | 第38-39页 |
·621H Δxdh敲除菌的PCR验证 | 第39-40页 |
·木糖醇脱氢酶的酶活检测 | 第40-41页 |
·621H和621H Δxdh在木糖及木糖醇培养基上的生长 | 第41-43页 |
·本章小结 | 第43-45页 |
第四章 氧化葡萄糖酸杆菌xk基因的功能鉴定 | 第45-63页 |
·引言 | 第45页 |
·实验材料 | 第45-47页 |
·菌株和质粒 | 第45-46页 |
·培养基 | 第46-47页 |
·实验仪器 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-53页 |
·xk基因的异源表达 | 第47页 |
·大肠杆菌细胞的破碎 | 第47-48页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第48-49页 |
·试剂的配制 | 第48页 |
·SDS-聚丙烯凝酰胺胶电泳 | 第48-49页 |
·分子伴侣共表达系统的构建 | 第49-50页 |
·重组蛋白的纯化 | 第50-51页 |
·缓冲液配方 | 第50页 |
·His-tag柱纯化蛋白 | 第50-51页 |
·敲除载体的构建 | 第51-52页 |
·三亲本接合转移 | 第52页 |
·木酮糖激酶活性检测 | 第52页 |
·回补菌的构建及筛选 | 第52-53页 |
·结果与分析 | 第53-61页 |
·xk基因异源表达载体的构建 | 第53页 |
·xk基因的异源可溶表达 | 第53-55页 |
·敲除载体pSUP202-xk::Gen的酶切验证 | 第55-56页 |
·621H Δxk敲除菌的PCR验证 | 第56-57页 |
·木酮糖激酶的酶活检测 | 第57-58页 |
·621H和621H Δxk在木糖及木糖醇培养基上的生长 | 第58-59页 |
·621H和621H Δxk在不同碳源培养基上的生长 | 第59-60页 |
·621H Δxk回补菌的构建 | 第60-61页 |
·621H、621H Δxk和621H Δxk回补菌在甘油培养基上的生长 | 第61页 |
·本章小结 | 第61-63页 |
第五章 结论与展望 | 第63-65页 |
·结论 | 第63-64页 |
·展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
硕士期间论文发表情况 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |