中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
·高等植物启动子概述 | 第13-16页 |
·启动子的结构特点 | 第13-14页 |
·启动子的分类 | 第14-16页 |
·植物启动子抗性基因工程的研究进展 | 第16-19页 |
·植物对生物胁迫的应答 | 第17-18页 |
·植物对非生物胁迫的应答 | 第18-19页 |
·植物启动子的研究方法 | 第19-22页 |
·植物启动子的功能研究 | 第19-21页 |
·植物启动子的克隆方法 | 第21-22页 |
·本研究目的和意义 | 第22-24页 |
第二章 玉米逆境诱导型基因 ZmRXO1 及 ZmapH 启动子的克隆及表达载体的构建 | 第24-46页 |
·材料 | 第24-26页 |
·植物材料 | 第24页 |
·宿主菌及载体 | 第24页 |
·酶及试剂 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·主要试剂及培养基的配制 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-32页 |
·启动子分析的数据库与软件 | 第26页 |
·玉米逆境诱导型启动子序列的获得与分析 | 第26页 |
·启动子的引物设计合成 | 第26页 |
·CTAB 法提取玉米基因组 DNA 启动子序列的 PCR 扩增 | 第26-27页 |
·DNA 启动子序列的 PCR 扩增 | 第27-28页 |
·启动子 PCR 产物的回收 | 第28页 |
·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
·克隆载体的连接 | 第29页 |
·冻融法转化 | 第29-30页 |
·质粒的提取 | 第30页 |
·质粒酶切鉴定 | 第30-31页 |
·植物表达载体的构建 | 第31页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
·农杆菌 EHA105 的转化及鉴定 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-44页 |
·ZmRXO1 启动子的克隆及表达载体的构建 | 第32-38页 |
·ZmapH 启动子的克隆及表达载体的构建 | 第38-44页 |
·结论与讨论 | 第44-46页 |
第三章 烟草的遗传转化及转基因植株的检测 | 第46-55页 |
·材料 | 第46-47页 |
·植物材料 | 第46页 |
·宿主菌及载体 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要仪器设备 | 第46页 |
·主要试剂及培养基的配制 | 第46-47页 |
·方法 | 第47-50页 |
·农杆菌介导法转化烟草及转基因烟草的筛选 | 第47-50页 |
·结果与分析 | 第50-53页 |
·农杆菌介导法转化烟草及转基因烟草的筛选 | 第50-51页 |
·转基因烟草的鉴定 | 第51-53页 |
·结论与讨论 | 第53-55页 |
第四章 组织化学染色分析 | 第55-62页 |
·材料 | 第55-56页 |
·植物材料 | 第55页 |
·主要试剂 | 第55页 |
·主要仪器设备 | 第55页 |
·主要试剂的配制 | 第55-56页 |
·方法 | 第56页 |
·转基因烟草子叶期的 GUS 组织化学染色分析 | 第56页 |
·转基因烟草的 GUS 组织化学染色诱导分析 | 第56页 |
·结果与分析 | 第56-60页 |
·烟草子叶期的 GUS 组织化学染色分析 | 第56-58页 |
·转基因烟草的 GUS 组织化学染色诱导分析 | 第58-60页 |
·结论与讨论 | 第60-62页 |
第五章 启动子缺失片段的克隆及表达载体的构建 | 第62-70页 |
·材料 | 第62页 |
·宿主菌及载体 | 第62页 |
·酶及试剂 | 第62页 |
·主要仪器设备 | 第62页 |
·主要试剂及培养基的配制 | 第62页 |
·方法 | 第62-65页 |
·启动子 5′端缺失片段的克隆 | 第62-64页 |
·缺失片段表达载体的构建及农杆菌转化 | 第64-65页 |
·结果与分析 | 第65-69页 |
·ZmRXO1 基因启动子 5′端的渐变缺失 | 第65-67页 |
·ZmapH 基因启动子 5′端的渐变缺失 | 第67-69页 |
·结论与讨论 | 第69-70页 |
第六章 启动子及其缺失片段的定量分析 | 第70-92页 |
·材料 | 第70-71页 |
·植物材料 | 第70页 |
·宿主菌 | 第70页 |
·主要试剂 | 第70页 |
·主要仪器设备 | 第70-71页 |
·主要试剂及培养基的配置 | 第71页 |
·方法 | 第71-77页 |
·启动子诱导活性的 RT-PCR 定量分析 | 第71-75页 |
·启动子缺失片段诱导活性的 CUS 荧光定量分析 | 第75-77页 |
·结果与分析 | 第77-89页 |
·启动子诱导活性的 RT-PCR 定量分析 | 第77-84页 |
·启动子缺失片段诱导活性的 GUS 荧光定量分析 | 第84-89页 |
·结论与讨论 | 第89-92页 |
第七章 全文结论 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-106页 |
致谢 | 第106页 |