| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 图表目录 | 第11-12页 |
| 主要符号列表 | 第12-13页 |
| 文献综述 | 第13-22页 |
| 1 引言 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-41页 |
| ·材料 | 第24-28页 |
| ·试验菌株与质粒载体 | 第24页 |
| ·质控菌株 | 第24页 |
| ·主要药品与试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基的配制 | 第25页 |
| ·抗生素药敏纸片 | 第25-26页 |
| ·所用耐药基因检测引物 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-41页 |
| ·副猪嗜血杆菌药敏试验 | 第28-29页 |
| ·副猪嗜血杆菌耐药基因的检测 | 第29-31页 |
| ·tbpA 基因的扩增 | 第31页 |
| ·原核表达载体 pET-SUMO-tbpA 的构建 | 第31-35页 |
| ·重组表达质粒的诱导表达及初步鉴定 | 第35页 |
| ·重组蛋白诱导条件的优化 | 第35页 |
| ·重组 TbpA 蛋白的细胞定位分析 | 第35-36页 |
| ·重组 TbpA 蛋白的纯化 | 第36-38页 |
| ·重组 TbpA 蛋白对豚鼠免疫保护力的研究 | 第38-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-52页 |
| ·副猪嗜血杆菌分离株耐药表型测定结果 | 第41-42页 |
| ·副猪嗜血杆菌耐药基因检测结果 | 第42-44页 |
| ·副猪嗜血杆菌分离株基因组 DNA 耐药基因检测结果 | 第42-43页 |
| ·副猪嗜血杆菌分离株质粒 DNA 耐药基因检测结果 | 第43-44页 |
| ·tbpA 基因的扩增 | 第44-45页 |
| ·重组表达质粒 pET-SUMO-tbpA 的鉴定 | 第45-47页 |
| ·重组表达质粒的 PCR 鉴定 | 第45页 |
| ·重组表达质粒的测序鉴定 | 第45-47页 |
| ·重组蛋白的诱导表达、鉴定及纯化 | 第47-49页 |
| ·重组蛋白的初步表达鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组表达蛋白诱导条件的优化 | 第48页 |
| ·重组表达蛋白的细胞定位分析 | 第48页 |
| ·重组表达蛋白纯化分析及含量测定 | 第48-49页 |
| ·重组表达蛋白免疫印迹分析(Western-blotting) | 第49页 |
| ·重组蛋白对豚鼠免疫保护效力的研究 | 第49-52页 |
| ·HPS 绝对致死量的测定 | 第49页 |
| ·豚鼠免疫后的抗体水平 | 第49-50页 |
| ·二免后血液中细胞因子水平 | 第50-51页 |
| ·豚鼠免疫保护率的测定 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-59页 |
| ·Kirby-Bauer 纸片法检测耐药性 | 第52页 |
| ·副猪嗜血杆菌耐药性 | 第52-53页 |
| ·副猪嗜血杆菌耐药性的变化 | 第53页 |
| ·猪嗜血杆菌耐药基因的分布 | 第53-54页 |
| ·耐药性与血清型、基因型之间的关系 | 第54-55页 |
| ·转铁结合蛋白 A | 第55页 |
| ·重组蛋白的表达系统 | 第55-56页 |
| ·重组表达蛋白免疫免疫佐剂的选择 | 第56页 |
| ·动物模型和感染途径的选择 | 第56-57页 |
| ·免疫后抗体水平及细胞因子水平变化 | 第57-58页 |
| ·重组蛋白免疫保护作用 | 第58-59页 |
| 全文结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 附录 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
| 在读期间发表论文 | 第75页 |
