| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-26页 |
| ·植物基因启动子研究进展 | 第13-17页 |
| ·启动子结构和功能 | 第13页 |
| ·组成型启动子 | 第13-14页 |
| ·组织或器官特异性启动子 | 第14-15页 |
| ·诱导型启动子 | 第15-16页 |
| ·化学因素诱导表达的启动子 | 第15页 |
| ·生物因素诱导表达的启动子 | 第15-16页 |
| ·物理因素诱导表达的启动子 | 第16页 |
| ·R d29A 功能 | 第16-17页 |
| ·胁迫基因功能 | 第16页 |
| ·胁迫诱导基因的调控与表达 | 第16-17页 |
| ·植物低温信号转录因子研究进展 | 第17-19页 |
| ·植物转录因子的结构和功能 | 第17-18页 |
| ·转录因子作用的分子机理 | 第18页 |
| ·低温胁迫下 CBF 基因的表达与调控 | 第18-19页 |
| ·CBF 基因及其作用 | 第18-19页 |
| ·CBF 基因的表达 | 第19页 |
| ·植物遗传转化中的剔除标记基因的研究 | 第19-20页 |
| ·植物基因转化中常用的标记基因 | 第19页 |
| ·去除选择标记基因的必要性 | 第19-20页 |
| ·标记基因妨碍细胞多次重复转化 | 第19-20页 |
| ·标记基因的安全性问题 | 第20页 |
| ·耐盐基因 Na~+/H~+逆向转运蛋白基因研究进展 | 第20-26页 |
| ·盐胁迫下 Na~+的吸收与转运 | 第20-22页 |
| ·Na~+的吸收 | 第21页 |
| ·Na~+的外排 | 第21页 |
| ·Na~+的区隔化 | 第21-22页 |
| ·Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第22-24页 |
| ·质膜中的 Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第22页 |
| ·液泡膜 Na~+/H~+逆向转运蛋白克隆 | 第22-23页 |
| ·液泡膜 Na~+/H~+逆向转运蛋白特征与功能 | 第23-24页 |
| ·Na~+/H~+逆向转运蛋白与植物耐盐性 | 第24-26页 |
| 2 诱导表达的 AtCBF3 基因植物表达载体的构建 | 第26-42页 |
| ·试验材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·质粒和菌种 | 第26页 |
| ·酶及化学试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·溶液配制 | 第27页 |
| ·引物合成 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-34页 |
| ·植物材料处理 | 第27-28页 |
| ·基本分子生物学实验技术 | 第28-32页 |
| ·拟南芥基因组 DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·PCR 扩增 | 第29页 |
| ·大肠杆菌 DH5a 感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌转化及蓝白斑筛选方法 | 第30页 |
| ·转化子的进一步扩增和鉴定 | 第30-31页 |
| ·PCR 产物的分离纯化 | 第31-32页 |
| ·T/A 克隆回收片段与 T－载体的连接 | 第32页 |
| ·酶切反应体系与 DNA 片段连接反应体系 | 第32页 |
| ·拟南芥 CBF3 基因和 Rd29A 启动子的扩增 | 第32-33页 |
| ·植物表达载体的构建： | 第33页 |
| ·拟南芥 CBF3 基因和 Rd29A 启动子的扩增 | 第33页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化、农杆菌质粒的提取与鉴定 | 第33-34页 |
| ·试验结果与分析 | 第34-40页 |
| ·CBF3 基因的克隆以及重组质粒的鉴定 | 第34-36页 |
| ·CBF3 的生物信息学分析 | 第36-37页 |
| ·氨基酸序列比对及进化树分析 | 第36-37页 |
| ·Rd29A 启动子的克隆 | 第37-38页 |
| ·植物表达载体 pCAMBIA1301-Rd29A-CBF3 的构建与鉴定 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第40页 |
| ·结论 | 第40-42页 |
| 3 诱导表达的 AtCBF3 基因无选择标记植物表达载体的构建 | 第42-51页 |
| ·试验材料 | 第42-43页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·质粒及菌种 | 第42页 |
| ·酶及化学试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42页 |
| ·溶液配制 | 第42页 |
| ·引物合成 | 第42-43页 |
| ·试验方法 | 第43-46页 |
| ·植物材料处理 | 第43页 |
| ·基本分子生物学实验技术 | 第43-46页 |
| ·拟南芥基因组 DNA 的提取 | 第43页 |
| ·PCR 扩增 | 第43页 |
| ·用 CaC l2制备大肠杆菌感受态细胞 | 第43页 |
| ·大肠杆菌转化及蓝白斑筛选方法 | 第43-44页 |
| ·转化子的进一步扩增和鉴定 | 第44页 |
| ·PCR 产物的分离纯化 | 第44页 |
| ·T/A 克隆回收片段与 T－载体的连接 | 第44页 |
| ·pCAMBIA1301 质粒载体酶切反应体系 | 第44-45页 |
| ·pCAMBIA1301 质粒载体酶切后片段的末端平滑反应体系 | 第45-46页 |
| ·试验结果与分析 | 第46-50页 |
| ·pCAMBIA1301 去除潮霉素重组质粒的构建与鉴定 | 第46-47页 |
| ·无选择标记植物表达载体 pCAMBIA1301-NOhyg-CBF3 的构建与鉴定 | 第47-50页 |
| ·讨论 | 第50页 |
| ·无选择标记载体的构建 | 第50页 |
| ·农杆菌共转化方法在植物转基因工程中的运用 | 第50页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| 4 T hNHX1 基因无选择标记植物表达载体的构建 | 第51-63页 |
| ·试验材料 | 第51-52页 |
| ·植物材料 | 第51页 |
| ·质粒及菌种 | 第51页 |
| ·酶及化学试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器设备 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·溶液配制 | 第51-52页 |
| ·引物合成 | 第52页 |
| ·试验方法 | 第52-55页 |
| ·植物材料处理 | 第52页 |
| ·基本分子生物学实验技术 | 第52-55页 |
| ·盐芥基因组 RNA 的提取 | 第52-53页 |
| ·反转录 | 第53-54页 |
| ·PCR 扩增 | 第54页 |
| ·用 CaCl2制备大肠杆菌感受态细胞 | 第54页 |
| ·大肠杆菌转化及蓝白斑筛选方法 | 第54页 |
| ·转化子的进一步扩增和鉴定 | 第54页 |
| ·PCR 产物的分离纯化 | 第54页 |
| ·T/A 克隆回收片段与T-载体的连接 | 第54-55页 |
| ·pCAMBIA1301-NOhyg 质粒载体酶切反应体系 | 第55页 |
| ·试验结果与分析 | 第55-61页 |
| ·盐芥 ThNHX1 基因的扩增 | 第55-56页 |
| ·盐芥 ThNHX1 克隆和重组质粒的鉴定 | 第56-57页 |
| ·ThNHX1 基因的氨基酸序列比对及进化树分析 | 第57-59页 |
| ·ThNHX1 基因植物表达载体的构建与鉴定 | 第59-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·结论 | 第62-63页 |
| 缩略词 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
| [附]发表论文 | 第75页 |
