摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
前言 | 第10-13页 |
参考文献 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1 鸡球虫病概述 | 第13页 |
·鸡球虫病种类及危害 | 第13页 |
2 顶复门原虫入侵相关因子的研究进展 | 第13-20页 |
·顶复门原虫的宿主细胞入侵过程 | 第13-14页 |
·顶复门原虫入侵相关因子 | 第14-16页 |
·菱形蛋白样蛋白酶(rhomboid-like proteases,ROMs) | 第16-20页 |
3 展望 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-25页 |
第二章 柔嫩艾美耳球虫菱形蛋白样蛋白酶基因的克隆及分析 | 第25-65页 |
1 引言 | 第25页 |
2 材料及方法 | 第25-40页 |
·材料 | 第25-29页 |
·方法 | 第29-40页 |
3 结果与分析 | 第40-61页 |
·子孢子总RNA的提取 | 第40页 |
·EtROMs基因克隆 | 第40-42页 |
·EtROMs转化产物的菌液PCR鉴定 | 第42-43页 |
·EtROMs测序结果分析 | 第43-49页 |
·EtROMs编码氨基酸序列保守结构域分析 | 第49-50页 |
·EtROMs蛋白结构预测结果及分析 | 第50-52页 |
·EtROMs编码氨基酸序列与其它原虫比对结果 | 第52-57页 |
·艾美耳球虫三种不同ROMs编码氨基酸序列的比对分析 | 第57-58页 |
·三种EtROMs三维结构预测及分析 | 第58-61页 |
4 讨论 | 第61-64页 |
参考文献 | 第64-65页 |
第三章 艾美耳球虫不同发育阶段EtROMs转录水平差异的研究 | 第65-81页 |
1 引言 | 第65页 |
2 材料 | 第65-66页 |
·虫株 | 第65页 |
·仪器与试剂 | 第65-66页 |
·各种溶液的配制 | 第66页 |
·Real-time PCR的引物 | 第66页 |
3 方法 | 第66-71页 |
·E.tenella各发育阶段样品的制备 | 第66-67页 |
·各阶段样品总RNA的提取 | 第67-68页 |
·常规PCR验证引物并筛选反应浓度 | 第68-69页 |
·Real-Time PCR反应程序 | 第69-71页 |
4 结果与分析 | 第71-77页 |
·各发育阶段虫体总RNA提取质量检测 | 第71页 |
·Real- time PCR引物浓度的筛选结果 | 第71-72页 |
·EtROM1、EtROM3、EtROM4的扩增效率建立 | 第72-73页 |
·不同时期EtROMs样品扩增曲线 | 第73-74页 |
·EtROM1、EtROM3、EtROM4、Etactin熔解曲线 | 第74-75页 |
·相对转录水平差异分析 | 第75-77页 |
5 讨论 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-81页 |
全文总结 | 第81-83页 |
致谢 | 第83页 |