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柔嫩艾美耳球虫菱形蛋白样蛋白酶(EtROMs)基因的克隆及不同发育阶段转录水平研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
前言第10-13页
 参考文献第12-13页
第一章 文献综述第13-25页
 1 鸡球虫病概述第13页
   ·鸡球虫病种类及危害第13页
 2 顶复门原虫入侵相关因子的研究进展第13-20页
   ·顶复门原虫的宿主细胞入侵过程第13-14页
   ·顶复门原虫入侵相关因子第14-16页
   ·菱形蛋白样蛋白酶(rhomboid-like proteases,ROMs)第16-20页
 3 展望第20-21页
 参考文献第21-25页
第二章 柔嫩艾美耳球虫菱形蛋白样蛋白酶基因的克隆及分析第25-65页
 1 引言第25页
 2 材料及方法第25-40页
   ·材料第25-29页
   ·方法第29-40页
 3 结果与分析第40-61页
   ·子孢子总RNA的提取第40页
   ·EtROMs基因克隆第40-42页
   ·EtROMs转化产物的菌液PCR鉴定第42-43页
   ·EtROMs测序结果分析第43-49页
   ·EtROMs编码氨基酸序列保守结构域分析第49-50页
   ·EtROMs蛋白结构预测结果及分析第50-52页
   ·EtROMs编码氨基酸序列与其它原虫比对结果第52-57页
   ·艾美耳球虫三种不同ROMs编码氨基酸序列的比对分析第57-58页
   ·三种EtROMs三维结构预测及分析第58-61页
 4 讨论第61-64页
 参考文献第64-65页
第三章 艾美耳球虫不同发育阶段EtROMs转录水平差异的研究第65-81页
 1 引言第65页
 2 材料第65-66页
   ·虫株第65页
   ·仪器与试剂第65-66页
   ·各种溶液的配制第66页
   ·Real-time PCR的引物第66页
 3 方法第66-71页
   ·E.tenella各发育阶段样品的制备第66-67页
   ·各阶段样品总RNA的提取第67-68页
   ·常规PCR验证引物并筛选反应浓度第68-69页
   ·Real-Time PCR反应程序第69-71页
 4 结果与分析第71-77页
   ·各发育阶段虫体总RNA提取质量检测第71页
   ·Real- time PCR引物浓度的筛选结果第71-72页
   ·EtROM1、EtROM3、EtROM4的扩增效率建立第72-73页
   ·不同时期EtROMs样品扩增曲线第73-74页
   ·EtROM1、EtROM3、EtROM4、Etactin熔解曲线第74-75页
   ·相对转录水平差异分析第75-77页
 5 讨论第77-79页
 参考文献第79-81页
全文总结第81-83页
致谢第83页

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