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白念珠菌CaRCK2基因的克隆与鉴定

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
第一章 文献综述第7-17页
   ·酵母菌简介第7-11页
     ·酵母菌是一类单细胞真菌第7页
     ·酿酒酵母:一种真核生物模式菌第7-10页
     ·白念珠菌:人体内最重要的致病真菌第10-11页
   ·酿酒酵母HOG-MAPK级联途径与抗氧化胁迫第11-15页
     ·氧化胁迫与氧化损伤第11-12页
     ·酿酒酵母HOG-MAPK途径与抗氧化胁迫第12-13页
     ·酿酒酵母RCK2 基因研究进展第13-15页
   ·本论文的研究内容与意义第15-17页
     ·本论文的研究内容第15-16页
     ·本论文的研究意义第16-17页
第二章 实验材料与方法第17-33页
   ·实验材料第17-23页
     ·菌种第17-18页
     ·质粒第18页
     ·主要实验仪器第18-19页
     ·培养基第19-20页
     ·试剂第20-21页
     ·常用溶液与缓冲液第21-23页
   ·实验方法第23-33页
     ·大肠杆菌和酵母菌的培养与菌种保存第23页
     ·CaCl_2法制备感受态细胞第23-24页
     ·质粒转化E.coli感受态细胞第24页
     ·SDS碱裂解法小量制备质粒DNA第24-25页
     ·SDS碱裂解法大量制备质粒DNA第25页
     ·玻璃珠法提取酵母基因组DNA第25-26页
     ·液氮法提取酵母基因组DNA第26页
     ·PCR扩增DNA片断第26-27页
     ·乙醇沉淀法纯化DNA片断第27页
     ·DNA片断的柱纯化第27-28页
     ·酶切第28-29页
     ·连接第29页
     ·α互补筛选阳性克隆实验第29-30页
     ·乙酸锂法转化酿酒酵母细胞第30页
     ·乙酸锂法转化白念珠菌细胞第30-31页
     ·梯度连续稀释实验第31页
     ·网络共享资源简介第31-33页
第三章 白念珠菌CaRCK2 基因的克隆与功能互补第33-46页
   ·引言第33-34页
   ·CaRCK2 基因的生物信息学分析第34-36页
   ·白念珠菌CaRCK2 基因的克隆第36-43页
     ·白念珠菌基因组DNA的提取第36页
     ·白念珠菌CaRCK2 基因的PCR扩增第36-39页
     ·pRS316 质粒的提取与酶切第39-40页
     ·DNA的连接与重组质粒的检测第40-42页
     ·重组质粒pRSRCK2-2 的测序第42-43页
     ·结果与讨论第43页
   ·白念珠菌orf19.9808 序列对酿酒酵母RCK2 基因的功能互补研究第43-45页
     ·重组质粒pRSRCK2 转化酿酒酵母细胞第43页
     ·梯度稀释实验第43-44页
     ·实验结果与讨论第44-45页
   ·本章结论第45-46页
参考文献第46-50页
发表论文和科研情况说明第50-51页
致谢第51-52页
附录I 重组质粒pRSRCK2 中插入片段的DNA序列第52-55页
附录II 质粒pRS316 酶切图谱第55页

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