中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-17页 |
·酵母菌简介 | 第7-11页 |
·酵母菌是一类单细胞真菌 | 第7页 |
·酿酒酵母:一种真核生物模式菌 | 第7-10页 |
·白念珠菌:人体内最重要的致病真菌 | 第10-11页 |
·酿酒酵母HOG-MAPK级联途径与抗氧化胁迫 | 第11-15页 |
·氧化胁迫与氧化损伤 | 第11-12页 |
·酿酒酵母HOG-MAPK途径与抗氧化胁迫 | 第12-13页 |
·酿酒酵母RCK2 基因研究进展 | 第13-15页 |
·本论文的研究内容与意义 | 第15-17页 |
·本论文的研究内容 | 第15-16页 |
·本论文的研究意义 | 第16-17页 |
第二章 实验材料与方法 | 第17-33页 |
·实验材料 | 第17-23页 |
·菌种 | 第17-18页 |
·质粒 | 第18页 |
·主要实验仪器 | 第18-19页 |
·培养基 | 第19-20页 |
·试剂 | 第20-21页 |
·常用溶液与缓冲液 | 第21-23页 |
·实验方法 | 第23-33页 |
·大肠杆菌和酵母菌的培养与菌种保存 | 第23页 |
·CaCl_2法制备感受态细胞 | 第23-24页 |
·质粒转化E.coli感受态细胞 | 第24页 |
·SDS碱裂解法小量制备质粒DNA | 第24-25页 |
·SDS碱裂解法大量制备质粒DNA | 第25页 |
·玻璃珠法提取酵母基因组DNA | 第25-26页 |
·液氮法提取酵母基因组DNA | 第26页 |
·PCR扩增DNA片断 | 第26-27页 |
·乙醇沉淀法纯化DNA片断 | 第27页 |
·DNA片断的柱纯化 | 第27-28页 |
·酶切 | 第28-29页 |
·连接 | 第29页 |
·α互补筛选阳性克隆实验 | 第29-30页 |
·乙酸锂法转化酿酒酵母细胞 | 第30页 |
·乙酸锂法转化白念珠菌细胞 | 第30-31页 |
·梯度连续稀释实验 | 第31页 |
·网络共享资源简介 | 第31-33页 |
第三章 白念珠菌CaRCK2 基因的克隆与功能互补 | 第33-46页 |
·引言 | 第33-34页 |
·CaRCK2 基因的生物信息学分析 | 第34-36页 |
·白念珠菌CaRCK2 基因的克隆 | 第36-43页 |
·白念珠菌基因组DNA的提取 | 第36页 |
·白念珠菌CaRCK2 基因的PCR扩增 | 第36-39页 |
·pRS316 质粒的提取与酶切 | 第39-40页 |
·DNA的连接与重组质粒的检测 | 第40-42页 |
·重组质粒pRSRCK2-2 的测序 | 第42-43页 |
·结果与讨论 | 第43页 |
·白念珠菌orf19.9808 序列对酿酒酵母RCK2 基因的功能互补研究 | 第43-45页 |
·重组质粒pRSRCK2 转化酿酒酵母细胞 | 第43页 |
·梯度稀释实验 | 第43-44页 |
·实验结果与讨论 | 第44-45页 |
·本章结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
发表论文和科研情况说明 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
附录I 重组质粒pRSRCK2 中插入片段的DNA序列 | 第52-55页 |
附录II 质粒pRS316 酶切图谱 | 第55页 |