摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第12-23页 |
·大菱鲆养殖概况 | 第12页 |
·鳗弧菌的主要特征 | 第12-13页 |
·鱼用免疫佐剂的研究现状 | 第13-22页 |
·免疫佐剂的分类 | 第14页 |
·佐剂在鱼类疫苗免疫中的应用现状 | 第14-20页 |
·免疫佐剂的作用机制 | 第20页 |
·影响免疫佐剂作用的因素 | 第20-21页 |
·发展趋势 | 第21-22页 |
·本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
第二章 佐剂皂角苷对大菱鲆的溶血毒性检测 | 第23-32页 |
·材料与方法 | 第23-26页 |
·实验材料 | 第23页 |
·血细胞的制备 | 第23-24页 |
·皂角苷体外溶血实验 | 第24页 |
·皂角苷溶液浸泡大菱鲆 96h 半致死浓度实验 | 第24-25页 |
·急性毒性实验与取样 | 第25页 |
·显微镜观察皂角苷对大菱鲆血细胞体外溶血 | 第25页 |
·数据处理 | 第25-26页 |
·结果与分析 | 第26-30页 |
·皂角苷对大菱鲆的半致死浓度 | 第26页 |
·皂角苷的体外溶血毒性 | 第26-27页 |
·毒性实验 | 第27页 |
·不同浓度皂角苷溶液对大菱鲆血液中 LDH 活性的影响 | 第27-29页 |
·显微镜大菱鲆血细胞溶血试验 | 第29-30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
第三章 佐剂增强鳗弧菌灭活疫苗免疫作用的条件 | 第32-42页 |
·材料与方法 | 第32-37页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·大菱鲆及其饲养 | 第33页 |
·疫苗制备 | 第33-34页 |
·大菱鲆半致死剂量(LD50)测定 | 第34页 |
·免疫实验 | 第34-35页 |
·攻毒感染与免疫相对保护率 | 第35页 |
·病原菌的分离鉴定 | 第35-36页 |
·数据分析 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-40页 |
·疫苗无菌检验和安全性检验 | 第37页 |
·大菱鲆 LD_(50)计算 | 第37页 |
·不同攻毒方式对疫苗免疫效果的初步评估 | 第37-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
第四章 二硫苏糖醇对大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗的浸泡免疫效果初步评估 | 第42-52页 |
·材料与方法 | 第42-45页 |
·实验材料 | 第42-43页 |
·大菱鲆及饲养 | 第43页 |
·疫苗制备 | 第43页 |
·大菱鲆半致死剂量(LD_(50))测定 | 第43-44页 |
·免疫实验 | 第44页 |
·攻毒感染与免疫相对保护率 | 第44-45页 |
·数据分析 | 第45页 |
·结果与分析 | 第45-51页 |
·疫苗无菌检验和安全性检验 | 第45页 |
·大菱鲆 LD_(50)计算 | 第45-46页 |
·免疫效果初步评估 | 第46-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
第五章 皂角苷增强鳗弧菌灭活疫苗免疫作用的研究 | 第52-70页 |
·材料与方法 | 第52-58页 |
·实验材料 | 第52-53页 |
·大菱鲆及饲养 | 第53页 |
·免疫实验 | 第53-54页 |
·攻毒感染与免疫相对保护率 | 第54页 |
·样品采集 | 第54页 |
·ELISA 检测血清及黏液抗体效价 | 第54-55页 |
·总 RNA 提取及 cDNA 合成 | 第55-57页 |
·Real time PCR | 第57-58页 |
·数据分析 | 第58页 |
·结果与分析 | 第58-68页 |
·免疫组攻毒后的累计死亡率及免疫相对保护率 | 第58-63页 |
·抗体效价动态分析 | 第63-64页 |
·总 RNA 提取及检测 | 第64-65页 |
·大菱鲆β-actin、IgM 基因 RT-PCR 中溶解曲线分析 | 第65页 |
·鳗弧菌灭活疫苗添加佐剂皂角苷对大菱鲆 IgM 基因表达的影响 | 第65-68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-80页 |
附录 | 第80-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读学位期间的科研成果 | 第83页 |