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两种佐剂对大菱鲆鳗弧菌浸泡疫苗免疫效果的影响

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
引言第11-12页
第一章 绪论第12-23页
   ·大菱鲆养殖概况第12页
   ·鳗弧菌的主要特征第12-13页
   ·鱼用免疫佐剂的研究现状第13-22页
     ·免疫佐剂的分类第14页
     ·佐剂在鱼类疫苗免疫中的应用现状第14-20页
     ·免疫佐剂的作用机制第20页
     ·影响免疫佐剂作用的因素第20-21页
     ·发展趋势第21-22页
   ·本研究的目的及意义第22-23页
第二章 佐剂皂角苷对大菱鲆的溶血毒性检测第23-32页
   ·材料与方法第23-26页
     ·实验材料第23页
     ·血细胞的制备第23-24页
     ·皂角苷体外溶血实验第24页
     ·皂角苷溶液浸泡大菱鲆 96h 半致死浓度实验第24-25页
     ·急性毒性实验与取样第25页
     ·显微镜观察皂角苷对大菱鲆血细胞体外溶血第25页
     ·数据处理第25-26页
   ·结果与分析第26-30页
     ·皂角苷对大菱鲆的半致死浓度第26页
     ·皂角苷的体外溶血毒性第26-27页
     ·毒性实验第27页
     ·不同浓度皂角苷溶液对大菱鲆血液中 LDH 活性的影响第27-29页
     ·显微镜大菱鲆血细胞溶血试验第29-30页
   ·讨论第30-32页
第三章 佐剂增强鳗弧菌灭活疫苗免疫作用的条件第32-42页
   ·材料与方法第32-37页
     ·实验材料第32-33页
     ·大菱鲆及其饲养第33页
     ·疫苗制备第33-34页
     ·大菱鲆半致死剂量(LD50)测定第34页
     ·免疫实验第34-35页
     ·攻毒感染与免疫相对保护率第35页
     ·病原菌的分离鉴定第35-36页
     ·数据分析第36-37页
   ·结果与分析第37-40页
     ·疫苗无菌检验和安全性检验第37页
     ·大菱鲆 LD_(50)计算第37页
     ·不同攻毒方式对疫苗免疫效果的初步评估第37-40页
   ·讨论第40-42页
第四章 二硫苏糖醇对大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗的浸泡免疫效果初步评估第42-52页
   ·材料与方法第42-45页
     ·实验材料第42-43页
     ·大菱鲆及饲养第43页
     ·疫苗制备第43页
     ·大菱鲆半致死剂量(LD_(50))测定第43-44页
     ·免疫实验第44页
     ·攻毒感染与免疫相对保护率第44-45页
     ·数据分析第45页
   ·结果与分析第45-51页
     ·疫苗无菌检验和安全性检验第45页
     ·大菱鲆 LD_(50)计算第45-46页
     ·免疫效果初步评估第46-51页
   ·讨论第51-52页
第五章 皂角苷增强鳗弧菌灭活疫苗免疫作用的研究第52-70页
   ·材料与方法第52-58页
     ·实验材料第52-53页
     ·大菱鲆及饲养第53页
     ·免疫实验第53-54页
     ·攻毒感染与免疫相对保护率第54页
     ·样品采集第54页
     ·ELISA 检测血清及黏液抗体效价第54-55页
     ·总 RNA 提取及 cDNA 合成第55-57页
     ·Real time PCR第57-58页
     ·数据分析第58页
   ·结果与分析第58-68页
     ·免疫组攻毒后的累计死亡率及免疫相对保护率第58-63页
     ·抗体效价动态分析第63-64页
     ·总 RNA 提取及检测第64-65页
     ·大菱鲆β-actin、IgM 基因 RT-PCR 中溶解曲线分析第65页
     ·鳗弧菌灭活疫苗添加佐剂皂角苷对大菱鲆 IgM 基因表达的影响第65-68页
   ·讨论第68-70页
结论第70-71页
参考文献第71-80页
附录第80-82页
致谢第82-83页
攻读学位期间的科研成果第83页

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