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内质网应激相关基因在自身免疫性疾病中的表达

英文缩略词表第1-10页
中文摘要第10-13页
英文摘要第13-17页
1 前言第17-18页
2 实验材料第18-22页
   ·动物第18页
   ·菌株、细胞株及质粒第18-19页
   ·主要试剂第19-20页
   ·引物及 siRNA第20-21页
   ·主要仪器与设备第21-22页
3 实验方法第22-32页
   ·主要试剂溶液的配方第22-23页
   ·临床样本收集及处理第23-24页
     ·健康人及 SLE、RA 及 AS 病人外周血样收集第23页
     ·外周血白细胞分离第23-24页
   ·重组质粒的构建及质粒提取第24-28页
     ·引物设计及合成第24页
     ·样本 RNA 的提取、定量第24-25页
     ·RT 反应 cDNA 的制备第25页
     ·常规 PCR 以及产物回收第25-26页
     ·凝胶 DNA 片段的回收第26页
     ·DNA 连接第26-27页
     ·DH5α感受态细胞的制备第27页
     ·质粒转化第27页
     ·质粒的小量提取第27-28页
     ·重组质粒酶切及测序鉴定第28页
   ·使用 SYBR GreenⅠ进行 Real-time PCR 反应第28-30页
     ·Real-time PCR 反应条件的优化第28-29页
     ·定量标准曲线的制备第29页
     ·重复性试验第29-30页
   ·临床病例资料的整理分析第30页
     ·病例对照分析第30页
     ·临床指标与实验结果相关性分析第30页
   ·细胞培养及转染第30-32页
     ·肿瘤细胞第30页
     ·原代细胞第30-32页
   ·淋巴癌细胞株中 ATF6 基因沉默第32页
   ·统计分析第32页
4 结果第32-52页
   ·临床样本的收集第32-35页
   ·定量 PCR 方法的建立第35-40页
     ·目的基因引物设计结果第35页
     ·PCR 产物鉴定第35-37页
     ·重组质粒的筛选第37页
     ·定量 PCR 反应条件的优化第37-38页
     ·定量 PCR 曲线的建立第38-40页
     ·SYBR GreenⅠPCR 的重复性第40页
   ·SLE、RA 及 AS 患者外周血 ER 应激相关基因的表达第40-43页
   ·ATF6-siRNA 的设计和验证第43-44页
   ·沉默 ATF6 后降低 EL4 对应激刺激的敏感性第44-45页
   ·UPR 基因表达水平与 SLE 临床指标的相关性第45-49页
     ·SLE 病人临床指标之间相关性分析第45-46页
     ·SLE、RA 中 UPR 基因表达水平之间相关性分析第46-48页
     ·SLE、RA 中 UPR 基因表达水平与临床指标的相关性分析第48-49页
   ·丝裂原诱导的脾细胞活化与 ER 应激有关第49-52页
     ·原代脾脏细胞分离及培养第49-50页
     ·脾细胞中丝裂原诱导的 ER 应激相关基因表达第50-52页
5 讨论第52-55页
6 结论第55-56页
7 本研究的创新点第56页
8 参考文献第56-60页
附录第60-61页
致谢第61-62页
综述第62-78页
 参考文献第70-78页

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