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长枝木霉菌几丁质酶基因克隆和抑菌活性物质结构鉴定

摘要第1-5页
Abstract第5-14页
1 绪论第14-30页
   ·木霉分子系统学研究概况第14-17页
     ·同工酶分析第14页
     ·蛋白电泳分析第14-15页
     ·DNA指纹分析第15页
     ·ITS序列分析第15-16页
     ·RAPD分析第16页
     ·线粒体DNA分析第16-17页
   ·木霉在生物防治上的应用研究概况第17-18页
     ·木霉菌在土壤病害防治上的应用概况第17-18页
     ·木霉菌在地上部病害防治上的应用概况第18页
   ·木霉生防机制研究概况第18-27页
     ·重要的细胞壁降解酶—几丁质酶第20-21页
     ·抗生作用与次生代谢产物第21-27页
   ·杨树烂皮病、稻瘟病和杨叶枯病概况第27-28页
     ·杨树烂皮病第27页
     ·稻瘟病第27页
     ·杨树叶枯病第27-28页
   ·研究目的和意义第28-29页
   ·研究的主要内容第29页
   ·课题来源第29-30页
2 长枝木霉分子生物学鉴定第30-35页
   ·材料与方法第30-32页
     ·材料第30页
     ·方法第30-32页
   ·结果与分析第32-34页
   ·本章小结第34-35页
3 长枝木霉几丁质酶和葡聚糖酶酶活曲线测定第35-43页
   ·材料与方法第35-38页
     ·材料第35-36页
     ·方法第36-38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶透明圈观察第38-39页
     ·胞外几丁质酶活性的检测第39-40页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的活性测定第40-41页
   ·本章小结第41-43页
4 长枝木霉几丁质酶基因cDNA全长克隆第43-57页
   ·材料与方法第43-50页
     ·材料第43-44页
     ·方法第44-50页
   ·结果与分析第50-56页
     ·基因组DNA的提取第50-51页
     ·几丁质酶基因片段扩增第51页
     ·总RNA的提取第51-52页
     ·RT-PCR扩增cDNA基因片段第52-54页
     ·3’RACE第54-55页
     ·5’RACE第55-56页
   ·本章小结第56-57页
5 长枝木霉几丁质酶基因生物信息学分析第57-72页
   ·材料与方法第57-58页
     ·长枝木霉几丁质酶基因全长cDNA基本参数分析第57页
     ·长枝木霉菌几丁质酶基因全长cDNA的核苷酸序列同源性比较及成分分析第57页
     ·长枝木霉菌几丁质酶氨基酸组成分析第57页
     ·长枝木霉菌几丁质酶氨基酸序列基本信息预测第57页
     ·长枝木霉菌几丁质酶蛋白序列同源性比较第57页
     ·长枝木霉菌几丁质酶蛋白序列信号肽预测第57页
     ·长枝木霉菌几丁质酶蛋白序列亲/疏水性及蛋白跨膜区分析第57-58页
     ·长枝木霉菌几丁质酶氨基酸的亚细胞定位第58页
     ·长枝木霉菌几丁质酶蛋白序列二级结构预测第58页
     ·长枝木霉菌几丁质酶蛋白序列三级结构预测第58页
   ·结果与分析第58-71页
     ·长枝木霉几丁质酶基因全长cDNA基本参数分析第58-60页
     ·长枝木霉菌几丁质酶基因全长cDNA的核苷酸序列同源性比较及成分分析第60页
     ·长枝木霉菌几丁质酶氨基酸组成分析第60-61页
     ·长枝木霉菌几丁质酶氨基酸序列基本信息预测第61页
     ·长枝木霉菌几丁质酶保守结构域预测第61-62页
     ·长枝木霉菌几丁质酶蛋白序列同源性比对及系统发育树的构建第62-64页
     ·长枝木霉菌几丁质酶蛋白序列信号肽预测第64-65页
     ·长枝木霉菌几丁质酶氨基酸的疏水性及跨膜区分析第65-67页
     ·长枝木霉菌几丁质酶蛋白的亚细胞定位第67-68页
     ·长枝木霉菌几丁质酶蛋白序列二级结构预测第68-70页
     ·长枝木霉菌几丁质酶蛋白序列三级结构预测第70-71页
   ·本章小结第71-72页
6 长枝木霉抑菌活性物质的分离纯化与结构鉴定第72-80页
   ·材料与方法第72-75页
     ·材料第72页
     ·方法第72-75页
   ·结果与分析第75-79页
     ·最佳萃取溶剂的确定第75页
     ·温度和pH对抑菌活性物质的影响第75-76页
     ·薄层层析展开剂的选择第76-77页
     ·硅胶柱层析分离结果第77页
     ·粗提样品的高效液相色谱检测第77-78页
     ·sephadex LH20柱层析纯化结果第78页
     ·长枝木霉菌抑菌活性物质的纯度分析第78页
     ·长枝木霉抑菌活性物质结构鉴定第78-79页
   ·本章小结第79-80页
结论第80-82页
参考文献第82-89页
附录第89-92页
攻读学位期间发表的学术论文第92-93页
致谢第93-94页

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