摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-28页 |
·银杏的生物学特性 | 第11-13页 |
·银杏性别鉴定研究现状及进展 | 第13-16页 |
·以外部形态学为依据 | 第13页 |
·以生理生化的差异为依据 | 第13-14页 |
·以细胞水平的差异为依据 | 第14页 |
·以 DNA 分子标记技术为依据 | 第14-16页 |
·差异表达基因分离技术 | 第16-27页 |
·递减杂交技术 | 第16页 |
·mRNA 差别显示技术(DDRT-PCR) | 第16-17页 |
·代表性差异分析(RDA) | 第17页 |
·cDNA-AFLP 技术 | 第17-18页 |
·抑制性差减杂交技术 | 第18-27页 |
·抑制性产差减杂交(SSH)技术的基本原理 | 第18-19页 |
·抑制性产差减杂交(SSH)技术的基本步骤 | 第19-20页 |
·抑制性产差减杂交(SSH)技术的技术评价 | 第20-21页 |
·抑制性产差减杂交(SSH)技术的技术要点 | 第21页 |
·抑制性差减杂交技术(SSH)在分离差异表达基因中的应用 | 第21-27页 |
·应用 SSH 技术分离植物组织特异性表达的基因 | 第22-24页 |
·应用 SSH 技术分离诱导型表达的抗性相关基因 | 第24-27页 |
·本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-38页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·供试银杏材料 | 第28页 |
·主要仪器与试剂 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-38页 |
·样品采集 | 第29页 |
·总 RNA 提取与 mRNA 纯化 | 第29-31页 |
·总 RNA 提取 | 第29-30页 |
·RNA 纯化与质检 | 第30页 |
·mRNA 分离纯化 | 第30-31页 |
·抑制差减杂交 | 第31-38页 |
·cDNA 第一链合成 | 第31-32页 |
·cDNA 第二链的合成 | 第32页 |
·cDNA 纯化 | 第32-33页 |
·cDNA RsaⅠ酶切 | 第33页 |
·接头连接 | 第33-34页 |
·第一轮杂交 | 第34-35页 |
·第二轮杂交 | 第35页 |
·两轮差减 PCR | 第35-36页 |
·两次差减 PCR 扩增产物的纯化 | 第36-37页 |
·差减文库的克隆(T 载体克隆) | 第37页 |
·连接产物的转化 | 第37页 |
·PCR 鉴定差减文库的克隆插入片断大小 | 第37-38页 |
·序列分析 | 第38页 |
3 结果与分析 | 第38-46页 |
·银杏雌、雄花芽 mRNA 的制备 | 第38-39页 |
·银杏雌、雄花芽差减 cDNA 文库的构建 | 第39-43页 |
·银杏雌、雄花芽优势表达序列的鉴定和分析 | 第43-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
·RNA 的提取质量的影响因素 | 第46页 |
·SSH-cDNA 文库 | 第46-47页 |
·银杏雌、雄花芽发育速度和代谢状态可能存在差异 | 第47页 |
·银杏雌性性别决定和雌花发育过程的转录调控机制可能比雄性复杂 | 第47-48页 |
·异胡豆苷合成酶(Strictosidine synthase)基因可能参与银杏雄性性别决定或雄花发育过程 | 第48页 |
·雌雄花芽特异序列与已知序列之间同源性较低 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第60页 |