| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-28页 |
| ·银杏的生物学特性 | 第11-13页 |
| ·银杏性别鉴定研究现状及进展 | 第13-16页 |
| ·以外部形态学为依据 | 第13页 |
| ·以生理生化的差异为依据 | 第13-14页 |
| ·以细胞水平的差异为依据 | 第14页 |
| ·以 DNA 分子标记技术为依据 | 第14-16页 |
| ·差异表达基因分离技术 | 第16-27页 |
| ·递减杂交技术 | 第16页 |
| ·mRNA 差别显示技术(DDRT-PCR) | 第16-17页 |
| ·代表性差异分析(RDA) | 第17页 |
| ·cDNA-AFLP 技术 | 第17-18页 |
| ·抑制性差减杂交技术 | 第18-27页 |
| ·抑制性产差减杂交(SSH)技术的基本原理 | 第18-19页 |
| ·抑制性产差减杂交(SSH)技术的基本步骤 | 第19-20页 |
| ·抑制性产差减杂交(SSH)技术的技术评价 | 第20-21页 |
| ·抑制性产差减杂交(SSH)技术的技术要点 | 第21页 |
| ·抑制性差减杂交技术(SSH)在分离差异表达基因中的应用 | 第21-27页 |
| ·应用 SSH 技术分离植物组织特异性表达的基因 | 第22-24页 |
| ·应用 SSH 技术分离诱导型表达的抗性相关基因 | 第24-27页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-38页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·供试银杏材料 | 第28页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-38页 |
| ·样品采集 | 第29页 |
| ·总 RNA 提取与 mRNA 纯化 | 第29-31页 |
| ·总 RNA 提取 | 第29-30页 |
| ·RNA 纯化与质检 | 第30页 |
| ·mRNA 分离纯化 | 第30-31页 |
| ·抑制差减杂交 | 第31-38页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第31-32页 |
| ·cDNA 第二链的合成 | 第32页 |
| ·cDNA 纯化 | 第32-33页 |
| ·cDNA RsaⅠ酶切 | 第33页 |
| ·接头连接 | 第33-34页 |
| ·第一轮杂交 | 第34-35页 |
| ·第二轮杂交 | 第35页 |
| ·两轮差减 PCR | 第35-36页 |
| ·两次差减 PCR 扩增产物的纯化 | 第36-37页 |
| ·差减文库的克隆(T 载体克隆) | 第37页 |
| ·连接产物的转化 | 第37页 |
| ·PCR 鉴定差减文库的克隆插入片断大小 | 第37-38页 |
| ·序列分析 | 第38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-46页 |
| ·银杏雌、雄花芽 mRNA 的制备 | 第38-39页 |
| ·银杏雌、雄花芽差减 cDNA 文库的构建 | 第39-43页 |
| ·银杏雌、雄花芽优势表达序列的鉴定和分析 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| ·RNA 的提取质量的影响因素 | 第46页 |
| ·SSH-cDNA 文库 | 第46-47页 |
| ·银杏雌、雄花芽发育速度和代谢状态可能存在差异 | 第47页 |
| ·银杏雌性性别决定和雌花发育过程的转录调控机制可能比雄性复杂 | 第47-48页 |
| ·异胡豆苷合成酶(Strictosidine synthase)基因可能参与银杏雄性性别决定或雄花发育过程 | 第48页 |
| ·雌雄花芽特异序列与已知序列之间同源性较低 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第60页 |