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银杏雌雄花芽差异表达基因的分析和性别相关基因的鉴定

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-28页
   ·银杏的生物学特性第11-13页
   ·银杏性别鉴定研究现状及进展第13-16页
     ·以外部形态学为依据第13页
     ·以生理生化的差异为依据第13-14页
     ·以细胞水平的差异为依据第14页
     ·以 DNA 分子标记技术为依据第14-16页
   ·差异表达基因分离技术第16-27页
     ·递减杂交技术第16页
     ·mRNA 差别显示技术(DDRT-PCR)第16-17页
     ·代表性差异分析(RDA)第17页
     ·cDNA-AFLP 技术第17-18页
     ·抑制性差减杂交技术第18-27页
       ·抑制性产差减杂交(SSH)技术的基本原理第18-19页
       ·抑制性产差减杂交(SSH)技术的基本步骤第19-20页
       ·抑制性产差减杂交(SSH)技术的技术评价第20-21页
       ·抑制性产差减杂交(SSH)技术的技术要点第21页
       ·抑制性差减杂交技术(SSH)在分离差异表达基因中的应用第21-27页
         ·应用 SSH 技术分离植物组织特异性表达的基因第22-24页
         ·应用 SSH 技术分离诱导型表达的抗性相关基因第24-27页
   ·本研究的目的和意义第27-28页
2 材料与方法第28-38页
   ·实验材料第28-29页
     ·供试银杏材料第28页
     ·主要仪器与试剂第28-29页
   ·实验方法第29-38页
     ·样品采集第29页
     ·总 RNA 提取与 mRNA 纯化第29-31页
       ·总 RNA 提取第29-30页
       ·RNA 纯化与质检第30页
       ·mRNA 分离纯化第30-31页
     ·抑制差减杂交第31-38页
       ·cDNA 第一链合成第31-32页
       ·cDNA 第二链的合成第32页
       ·cDNA 纯化第32-33页
       ·cDNA RsaⅠ酶切第33页
       ·接头连接第33-34页
       ·第一轮杂交第34-35页
       ·第二轮杂交第35页
       ·两轮差减 PCR第35-36页
       ·两次差减 PCR 扩增产物的纯化第36-37页
       ·差减文库的克隆(T 载体克隆)第37页
       ·连接产物的转化第37页
       ·PCR 鉴定差减文库的克隆插入片断大小第37-38页
   ·序列分析第38页
3 结果与分析第38-46页
   ·银杏雌、雄花芽 mRNA 的制备第38-39页
   ·银杏雌、雄花芽差减 cDNA 文库的构建第39-43页
   ·银杏雌、雄花芽优势表达序列的鉴定和分析第43-46页
4 讨论第46-49页
   ·RNA 的提取质量的影响因素第46页
   ·SSH-cDNA 文库第46-47页
   ·银杏雌、雄花芽发育速度和代谢状态可能存在差异第47页
   ·银杏雌性性别决定和雌花发育过程的转录调控机制可能比雄性复杂第47-48页
   ·异胡豆苷合成酶(Strictosidine synthase)基因可能参与银杏雄性性别决定或雄花发育过程第48页
   ·雌雄花芽特异序列与已知序列之间同源性较低第48-49页
5 结论第49-50页
参考文献第50-59页
致谢第59-60页
攻读硕士期间发表论文情况第60页

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