摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
第一章 引言 | 第11-28页 |
·寡肽转运蛋白 PepT2 | 第12-20页 |
·寡肽转运蛋白 PepT2 的结构与功能 | 第12-15页 |
·寡肽转运蛋白 PepT2 的底物结构 | 第15-19页 |
·寡肽转运蛋白 PepT2 的活性调控 | 第19-20页 |
·蛋白的表达 | 第20-25页 |
·目的基因的获得 | 第21-22页 |
·重组质粒的构建与转化 | 第22-24页 |
·重组蛋白的表达与纯化 | 第24-25页 |
·重组蛋白的性质研究 | 第25页 |
·活性寡肽的合成 | 第25-27页 |
·本课题的选题意义及主要内容 | 第27-28页 |
第二章 寡肽转运蛋白 hPepT2(579-664)的原核表达 | 第28-49页 |
·实验材料 | 第28-31页 |
·实验仪器 | 第28-29页 |
·实验试剂 | 第29-31页 |
·实验菌种及载体质粒 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-39页 |
·hPepT2(579-664)基因的 PCR 扩增 | 第31-32页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·hPepT2(579-664)基因的 PCR 扩增 | 第32页 |
·重组质粒 pET30a(+)-hPepT2(579-664)的制备 | 第32-34页 |
·载体质粒 pET30a(+)的制备 | 第32-33页 |
·PCR 产物和 pET30a(+)质粒的双酶切 | 第33页 |
·hPepT2(579-664)基因与 pET30a(+)载体的连接 | 第33-34页 |
·重组质粒 hPepT2(579-664) -pET30a(+)的转化 | 第34-35页 |
·大肠杆菌 DH5α和 BL21(DE3)pLysS 生长曲线测定 | 第34页 |
·细菌感受态细胞的少量制备(CaCl2 法) | 第34页 |
·pET30a(+)-hPepT2(579-664)重组质粒的转化 | 第34-35页 |
·重组质粒 pET30a(+)-hPepT2(579-664)的检测与鉴定 | 第35-36页 |
·pET30a(+)-hPepT2(579-664)的电泳检测 | 第35页 |
·pET30a(+)-hPepT2(579-664)的酶切鉴定 | 第35-36页 |
·pET30a(+)-hPepT2(579-664)质粒 PCR 鉴定 | 第36页 |
·pET30a(+)-hPepT2(579-664)质粒测序 | 第36页 |
·hPepT2(579-664)的诱导表达 | 第36-37页 |
·hPepT2(579-664)的分离纯化 | 第37-38页 |
·hPepT2(579-664)的分离 | 第37-38页 |
·hPepT2(579-664)的纯化 | 第38页 |
·hPepT2(579-664)的性质研究 | 第38-39页 |
·hPepT2(579-664)的溶解度测定 | 第38-39页 |
·hPepT2(579-664)的稳定性 | 第39页 |
·实验结果与讨论 | 第39-48页 |
·hPepT2(579-664)基因的 PCR 扩增 | 第39页 |
·pET30a(+)-hPepT2(579-664)表达质粒的构建 | 第39-40页 |
·大肠杆菌 DH5α和 BL21(DE3)pLysS 的生长曲线 | 第40-41页 |
·pET30a(+)-hPepT2(579-664)表达质粒的鉴定 | 第41-42页 |
·hPepT2(579-664)蛋白的诱导表达 | 第42-44页 |
·hPepT2(579-664)蛋白的分离纯化 | 第44-47页 |
·hPepT2(579-664)蛋白的性质研究 | 第47-48页 |
·hPepT2(579-664)的溶解度测定 | 第47-48页 |
·hPepT2(579-664)的稳定性 | 第48页 |
·本章小结 | 第48-49页 |
第三章 活性寡肽的合成及其与蛋白的相互作用 | 第49-65页 |
·材料与方法 | 第49-53页 |
·实验材料 | 第49-50页 |
·实验试剂 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-53页 |
·酪胺酰甘氨酸(YG)的合成 | 第50-52页 |
·其他二肽的合成 | 第52页 |
·二肽的分析纯化 | 第52-53页 |
·二肽与蛋白的相互作用 | 第53页 |
·结果与讨论 | 第53-63页 |
·二肽的合成与表征 | 第53-60页 |
·二肽的合成 | 第53-54页 |
·二肽的表征 | 第54-60页 |
·荧光光谱法研究二肽与蛋白的相互作用 | 第60-63页 |
·二肽结构 | 第60-61页 |
·反应时间对相互作用的影响 | 第61-63页 |
·二肽浓度对相互作用的影响 | 第63页 |
·本章小结 | 第63-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
附录 | 第75-78页 |
个人简历 | 第78页 |