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人类寡肽转运蛋白hPepT2(579-664)的原核表达及其性质研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-11页
第一章 引言第11-28页
   ·寡肽转运蛋白 PepT2第12-20页
     ·寡肽转运蛋白 PepT2 的结构与功能第12-15页
     ·寡肽转运蛋白 PepT2 的底物结构第15-19页
     ·寡肽转运蛋白 PepT2 的活性调控第19-20页
   ·蛋白的表达第20-25页
     ·目的基因的获得第21-22页
     ·重组质粒的构建与转化第22-24页
     ·重组蛋白的表达与纯化第24-25页
     ·重组蛋白的性质研究第25页
   ·活性寡肽的合成第25-27页
   ·本课题的选题意义及主要内容第27-28页
第二章 寡肽转运蛋白 hPepT2(579-664)的原核表达第28-49页
   ·实验材料第28-31页
     ·实验仪器第28-29页
     ·实验试剂第29-31页
     ·实验菌种及载体质粒第31页
   ·实验方法第31-39页
     ·hPepT2(579-664)基因的 PCR 扩增第31-32页
       ·引物设计第31-32页
       ·hPepT2(579-664)基因的 PCR 扩增第32页
     ·重组质粒 pET30a(+)-hPepT2(579-664)的制备第32-34页
       ·载体质粒 pET30a(+)的制备第32-33页
       ·PCR 产物和 pET30a(+)质粒的双酶切第33页
       ·hPepT2(579-664)基因与 pET30a(+)载体的连接第33-34页
     ·重组质粒 hPepT2(579-664) -pET30a(+)的转化第34-35页
       ·大肠杆菌 DH5α和 BL21(DE3)pLysS 生长曲线测定第34页
       ·细菌感受态细胞的少量制备(CaCl2 法)第34页
       ·pET30a(+)-hPepT2(579-664)重组质粒的转化第34-35页
     ·重组质粒 pET30a(+)-hPepT2(579-664)的检测与鉴定第35-36页
       ·pET30a(+)-hPepT2(579-664)的电泳检测第35页
       ·pET30a(+)-hPepT2(579-664)的酶切鉴定第35-36页
       ·pET30a(+)-hPepT2(579-664)质粒 PCR 鉴定第36页
       ·pET30a(+)-hPepT2(579-664)质粒测序第36页
     ·hPepT2(579-664)的诱导表达第36-37页
     ·hPepT2(579-664)的分离纯化第37-38页
       ·hPepT2(579-664)的分离第37-38页
       ·hPepT2(579-664)的纯化第38页
     ·hPepT2(579-664)的性质研究第38-39页
       ·hPepT2(579-664)的溶解度测定第38-39页
       ·hPepT2(579-664)的稳定性第39页
   ·实验结果与讨论第39-48页
     ·hPepT2(579-664)基因的 PCR 扩增第39页
     ·pET30a(+)-hPepT2(579-664)表达质粒的构建第39-40页
     ·大肠杆菌 DH5α和 BL21(DE3)pLysS 的生长曲线第40-41页
     ·pET30a(+)-hPepT2(579-664)表达质粒的鉴定第41-42页
     ·hPepT2(579-664)蛋白的诱导表达第42-44页
     ·hPepT2(579-664)蛋白的分离纯化第44-47页
     ·hPepT2(579-664)蛋白的性质研究第47-48页
       ·hPepT2(579-664)的溶解度测定第47-48页
       ·hPepT2(579-664)的稳定性第48页
   ·本章小结第48-49页
第三章 活性寡肽的合成及其与蛋白的相互作用第49-65页
   ·材料与方法第49-53页
     ·实验材料第49-50页
     ·实验试剂第50页
     ·实验方法第50-53页
       ·酪胺酰甘氨酸(YG)的合成第50-52页
       ·其他二肽的合成第52页
       ·二肽的分析纯化第52-53页
       ·二肽与蛋白的相互作用第53页
   ·结果与讨论第53-63页
     ·二肽的合成与表征第53-60页
       ·二肽的合成第53-54页
       ·二肽的表征第54-60页
     ·荧光光谱法研究二肽与蛋白的相互作用第60-63页
       ·二肽结构第60-61页
       ·反应时间对相互作用的影响第61-63页
       ·二肽浓度对相互作用的影响第63页
   ·本章小结第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
附录第75-78页
个人简历第78页

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