| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-19页 |
| ·共轭亚油酸概述 | 第10-11页 |
| ·共轭亚油酸作用及来源 | 第10页 |
| ·共轭亚油酸含量测定方法 | 第10-11页 |
| ·亚油酸异构酶概述 | 第11-13页 |
| ·产亚油酸异构酶微生物 | 第11页 |
| ·亚油酸异构酶学性质 | 第11-13页 |
| ·亚油酸异构酶基因的克隆表达 | 第13-17页 |
| ·亚油酸异构酶基因原核表达系统 | 第14-15页 |
| ·亚油酸异构酶基因真核表达系统 | 第15-17页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| ·研究目的 | 第17页 |
| ·研究意义 | 第17-18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第19-42页 |
| ·实验材料 | 第19-25页 |
| ·实验菌株 | 第19页 |
| ·工具酶和标准分子量 | 第19-20页 |
| ·试剂盒 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·常用试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·SDS- PAGE 电泳所需试剂配制 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-42页 |
| ·亚油酸异构酶基因片段的获得 | 第25-31页 |
| ·Ｔ载体连接 | 第31页 |
| ·连接产物的转化 | 第31-32页 |
| ·克隆载体的鉴定 | 第32-33页 |
| ·亚油酸异构酶基因表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·表达载体 pPICZαA-LAI和 pPICZαA -LPI 的鉴定 | 第35页 |
| ·毕赤酵母工程菌构建 | 第35-40页 |
| ·毕赤酵母工程菌的培养和诱导表达 | 第40页 |
| ·重组亚油酸异构酶的 SDS- PAGE 检测及生物学活性检测 | 第40-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-55页 |
| ·嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶毕赤酵母工程菌构建 | 第42-48页 |
| ·目的基因引物设计 | 第42页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增 | 第42-43页 |
| ·目的基因克隆载体 pMD19T -LAI 构建 | 第43-44页 |
| ·目的基因表达载体 pPICZαA -LAI 构建 | 第44-46页 |
| ·毕赤酵母生长曲线测定 | 第46页 |
| ·毕赤酵母工程菌基因组 DNA 的提取及 PCR 鉴定 | 第46-47页 |
| ·重组亚油酸异构酶 SDS- PAGE 检测及酶活力测定 | 第47-48页 |
| ·植物乳杆菌亚油酸异构酶毕赤酵母工程菌构建 | 第48-55页 |
| ·目的基因引物设计 | 第48页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增 | 第48-49页 |
| ·目的基因克隆载体 pMD19T -LPI 构建 | 第49-51页 |
| ·目的基因表达载体 pPICZαA -LPI 构建 | 第51-52页 |
| ·毕赤酵母工程菌基因组 DNA 的提取及 PCR 鉴定 | 第52-54页 |
| ·重组亚油酸异构酶 SDS- PAGE 检测及酶活力测定 | 第54-55页 |
| 第四章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-83页 |
| 个人简历 | 第83页 |
| 攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第83页 |
