| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-19页 |
| ·研究背景 | 第8-9页 |
| ·国内外研究现状 | 第9-18页 |
| ·纤维素类物质转化生产燃料乙醇 | 第9-12页 |
| ·乙醇发酵型细菌研究进展 | 第12-18页 |
| ·课题来源及主要研究内容 | 第18-19页 |
| ·课题来源 | 第18页 |
| ·主要研究内容及意义 | 第18-19页 |
| 第2章 材料与方法 | 第19-32页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·菌株和质粒 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·酶与试剂 | 第19页 |
| ·实验药品 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·常用试剂和缓冲液 | 第20-22页 |
| ·引物设计及相关软件 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-32页 |
| ·发酵液乙醇浓度的测定 | 第22-23页 |
| ·运动发酵单胞菌Z-1 乙醇发酵曲线的绘制 | 第23页 |
| ·运动发酵单胞菌Z-1 发酵条件单因子优化 | 第23-24页 |
| ·发酵培养基基础成分正交优化实验设计 | 第24-25页 |
| ·乙醇发酵关键酶基因pdc 的原核表达载体的构建 | 第25-29页 |
| ·重组质粒pET-28a-pdc 的诱导表达 | 第29-30页 |
| ·重组质粒pET-28a-pdc 的诱导条件优化 | 第30页 |
| ·重组大肠杆菌的乙醇发酵试验 | 第30-32页 |
| 第3章 运动发酵单胞菌发酵条件的优化 | 第32-44页 |
| ·重铬酸钾法测定乙醇浓度标准曲线的绘制 | 第32-33页 |
| ·运动发酵单胞菌Z-1 的乙醇发酵曲线的绘制 | 第33-34页 |
| ·运动发酵单胞菌发酵条件单因子实验 | 第34-41页 |
| ·发酵培养基含糖量对乙醇发酵的影响 | 第34-37页 |
| ·种子培养物接种量对乙醇发酵的影响 | 第37-38页 |
| ·发酵温度对乙醇发酵的影响 | 第38-39页 |
| ·发酵液pH 值对乙醇发酵的影响 | 第39-41页 |
| ·RM 培养基基础成分的发酵正交优化实验 | 第41-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 第4章 乙醇发酵关键酶基因的原核表达 | 第44-53页 |
| ·原核表达质粒pET-28a-pdc 的构建 | 第44-48页 |
| ·运动发酵单胞菌基因组的提取及目的片段的克隆 | 第44-45页 |
| ·目的片段pdc 基因和表达质粒pET-28a 的双酶切及产物连接 | 第45-46页 |
| ·重组质粒pET-28a-pdc 的转化 | 第46-48页 |
| ·重组质粒pET-28a-pdc 在大肠杆菌中的诱导表达及优化 | 第48-51页 |
| ·重组质粒pET-28a-pdc 在BL21 中的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·重组质粒pET-28a-pdc 在BL21 中的诱导表达条件优化 | 第49-51页 |
| ·重组质粒表达菌株BL21-pET-28a-pdc 乙醇发酵试验 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录1 运动发酵单胞菌pdc 基因编码区序列 | 第58-59页 |
| 附录2 重组质粒pET-28a-pdc 中pdc 基因测序峰图 | 第59-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |