| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-22页 |
| ·课题背景及意义 | 第12-13页 |
| ·文献综述 | 第13-21页 |
| ·木聚糖 | 第13页 |
| ·木聚糖酶和木聚糖酶基因 | 第13-18页 |
| ·木聚糖酶应用的研究 | 第18-19页 |
| ·纤维质原料生产酒精现状 | 第19-20页 |
| ·耐受酒精微生物研究现状 | 第20-21页 |
| ·课题来源及主要研究内容 | 第21-22页 |
| ·课题来源 | 第21页 |
| ·主要研究内容 | 第21-22页 |
| 第2章 材料和方法 | 第22-40页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·土样 | 第22页 |
| ·菌株及载体 | 第22页 |
| ·实验药品 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·引物 | 第23-24页 |
| ·试剂配制 | 第24-25页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-39页 |
| ·木聚糖酶测定方法 | 第25-26页 |
| ·菌种筛选 | 第26-27页 |
| ·菌种鉴定 | 第27-31页 |
| ·DT83 生长条件优化 | 第31-32页 |
| ·DT83 酒精耐受性研究 | 第32页 |
| ·DT83 发酵产酶条件优化 | 第32-33页 |
| ·DT83 所产木聚糖酶性质研究 | 第33-34页 |
| ·木聚糖酶基因(xynA)克隆 | 第34-35页 |
| ·木聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第35-38页 |
| ·原核表达条件优化 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第3章 耐受酒精的半纤维素降解菌筛选和鉴定 | 第40-47页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·菌种的分离和筛选 | 第40-42页 |
| ·木糖标准曲线绘制 | 第40页 |
| ·菌株初筛 | 第40-41页 |
| ·菌株复筛 | 第41-42页 |
| ·对DT83 的菌种鉴定 | 第42-45页 |
| ·形态学观察 | 第42页 |
| ·生理生化鉴定 | 第42-44页 |
| ·16SrDNA鉴定 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·菌种筛选地点和方法的选择 | 第45-46页 |
| ·菌种鉴定方法的讨论 | 第46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第4章 DT83 生长条件优化及菌体酒精耐受性分析 | 第47-55页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·短小芽孢杆菌DT83 生长条件优化 | 第47-52页 |
| ·生长曲线绘制 | 第47-48页 |
| ·氮源对DT83 生长的影响 | 第48页 |
| ·碳源对DT83 生长的影响 | 第48-49页 |
| ·正交优化分析氮源对DT83 生长的影响 | 第49-50页 |
| ·pH对DT83 生长的影响 | 第50-51页 |
| ·温度对DT83 生长的影响 | 第51-52页 |
| ·短小芽孢杆菌DT83 酒精耐受性分析 | 第52-53页 |
| ·DT83 在平板上的酒精耐受性分析 | 第52页 |
| ·DT83 在液体培养基中的酒精耐受度分析 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·生长条件优化取样时间点的选择 | 第53页 |
| ·培养条件优化中的问题 | 第53-54页 |
| ·酒精耐受性中存在的问题 | 第54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 第5章 DT83 产酶条件优化及木聚糖酶酶学性质 | 第55-64页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·短小芽孢杆菌DT83 发酵产木聚糖酶的研究 | 第55-60页 |
| ·DT83 产木聚糖酶曲线 | 第55-56页 |
| ·不同氮源对DT83 产木聚糖酶的影响 | 第56页 |
| ·不同碳源对DT83 产木聚糖酶的影响 | 第56-57页 |
| ·氮源对DT83 产木聚糖酶影响的正交优化试验 | 第57-58页 |
| ·不同pH对DT83 产木聚糖酶的影响 | 第58-59页 |
| ·培养温度对DT83 产木聚糖酶的影响 | 第59-60页 |
| ·木聚糖酶酶学性质 | 第60-62页 |
| ·木聚糖酶酶促反应的最佳温度 | 第60页 |
| ·木聚糖酶反应的最适pH值 | 第60-61页 |
| ·木聚糖酶的酒精耐受性 | 第61-62页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析短小芽孢杆菌DT83 产木聚糖酶情况 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·DT83 产酶条件优化中的问题 | 第62-63页 |
| ·木聚糖酶酒精耐受性的问题 | 第63页 |
| ·SDS-PAGE分析木聚糖酶的讨论 | 第63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 第6章 木聚糖酶基因(xynA)的克隆及表达 | 第64-79页 |
| ·引言 | 第64页 |
| ·木聚糖酶基因的克隆及序列分析 | 第64-67页 |
| ·木聚糖酶基因的克隆 | 第64-65页 |
| ·木聚糖酶基因序列分析 | 第65-66页 |
| ·木聚糖酶蛋白序列分析 | 第66-67页 |
| ·非融合表达载体的构建 | 第67-68页 |
| ·xynA基因PCR反应结果 | 第67页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第67-68页 |
| ·菌落PCR结果 | 第68页 |
| ·木聚糖酶基因在大肠杆菌BL21 中的表达 | 第68-70页 |
| ·含有目的基因的载体转化大肠杆菌BL21 | 第68-69页 |
| ·转化子中木聚糖酶基因的表达 | 第69-70页 |
| ·转化子产木聚糖酶条件优化 | 第70-72页 |
| ·转化子胞外木聚糖酶活随时间变化情况 | 第70-71页 |
| ·IPTG浓度对转化子木聚糖酶表达的影响 | 第71页 |
| ·温度对转化子木聚糖酶表达的影响 | 第71-72页 |
| ·转化子木聚糖酶活性最高数值的测量 | 第72页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析转化子产木聚糖酶情况 | 第72-75页 |
| ·转化子胞内蛋白表达情况 | 第72-73页 |
| ·转化子胞外蛋白表达情况 | 第73-75页 |
| ·讨论 | 第75-78页 |
| ·DT83 木聚糖酶基因的克隆及分析的讨论 | 第75页 |
| ·非融合表达天然蛋白载体的构建 | 第75-77页 |
| ·木聚糖酶基因在大肠杆菌BL21 表达的讨论 | 第77页 |
| ·关于原核表达条件优化的讨论 | 第77-78页 |
| ·本章小结 | 第78-79页 |
| 结论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 附录 | 第85-87页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |