烟草NtCIPK23基因的克隆、表达分析及转基因过量表达研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-17页 |
| ·植物钙信号系统研究进展 | 第8-17页 |
| ·CaM/CML 信号系统 | 第10页 |
| ·CDPK 信号系统 | 第10-11页 |
| ·CBL-CIPK 信号系统 | 第11-17页 |
| 2 引言 | 第17-19页 |
| ·研究目的及意义 | 第17页 |
| ·主要研究内容 | 第17-18页 |
| ·研究技术路线 | 第18-19页 |
| 3 烟草 NtCIPK23 基因的克隆与分析 | 第19-38页 |
| ·实验材料与试剂 | 第19-22页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·实验试剂 | 第19-22页 |
| ·实验方法与步骤 | 第22-28页 |
| ·NtCIPK23 基因的电子克隆 | 第22-23页 |
| ·材料处理 | 第23页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·RNA 的消化 | 第24页 |
| ·反转录反应 | 第24-25页 |
| ·cDNA 检测 | 第25页 |
| ·NtCIPK23 基因的 PCR 扩增 | 第25页 |
| ·NtCIPK23 基因目的片段的回收 | 第25-26页 |
| ·连接反应 | 第26页 |
| ·连接产物的转化 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的 PCR 鉴定与测序 | 第27-28页 |
| ·半定量 RT-PCR 分析 | 第28页 |
| ·实验结果与分析 | 第28-37页 |
| ·烟草叶片总 RNA 的提取及检测 | 第28-29页 |
| ·烟草 NtCIPK23 的克隆与序列分析 | 第29-34页 |
| ·烟草 NtCIPK23 的表达分析 | 第34-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 4 烟草 NtCIPK23 转基因 | 第38-52页 |
| ·实验材料与试剂 | 第38页 |
| ·实验方法与步骤 | 第38-44页 |
| ·NtCIPK23 超表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第39-40页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第40页 |
| ·转基因的操作流程 | 第40-41页 |
| ·转基因植株的生物学鉴定分析 | 第41-44页 |
| ·实验结果与分析 | 第44-50页 |
| ·NtCIPK23 超表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·转基因植株的生物学鉴定分析 | 第45-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 5 总结与展望 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| A. 发表的论文 | 第61页 |
| B. 待发表的论文 | 第61页 |
| C. 参加的研究课题 | 第61页 |
| D. 缩略词表 | 第61-62页 |
