| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-29页 |
| ·异戊二烯介绍 | 第13-15页 |
| ·异戊二烯物理化学性质简介 | 第13页 |
| ·异戊二烯在工业中的生产方法及用途 | 第13-14页 |
| ·生物法制取异戊二烯研究概述 | 第14-15页 |
| ·重组大肠杆菌发酵工艺优化概述 | 第15-22页 |
| ·工程大肠杆菌本身遗传特性对发酵的影响 | 第16-18页 |
| ·大肠杆菌工程菌株发酵培养基 | 第18-19页 |
| ·影响大肠杆菌工程菌株发酵的重要参数 | 第19-21页 |
| ·培养方式和补料控制 | 第21-22页 |
| ·乙酸对工程大肠杆菌发酵的影响 | 第22页 |
| ·发酵工艺优化中的试验设计流程简概述 | 第22-26页 |
| ·单因素实验设计 | 第23页 |
| ·对重要影响因素的筛选实验设计 | 第23-24页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第24页 |
| ·重要影响因素的最佳水平值的确定 | 第24-25页 |
| ·实验设计及结果分析的软件应用 | 第25-26页 |
| ·研究内容和目的意义 | 第26-27页 |
| ·研究内容 | 第26页 |
| ·目的意义 | 第26-27页 |
| ·技术路线 | 第27-29页 |
| 第2章 重组菌株及发酵产物验证和检测方法建立 | 第29-41页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·菌株与质粒 | 第29-30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·主要培养基 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·菌株质粒验证 | 第31-34页 |
| ·发酵目标产物提纯及结构验证 | 第34页 |
| ·异戊二烯检测方法的建立 | 第34-35页 |
| ·菌体浓度测定 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-39页 |
| ·质粒提取电泳图谱 | 第35-36页 |
| ·重组质粒 pTRC-low 和 pACY 的双酶切验证 | 第36页 |
| ·核磁共振检测异戊二烯结构 | 第36-38页 |
| ·标准曲线实验设计及检测结果 | 第38页 |
| ·标准曲线 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第3章 摇瓶水平发酵培养基及条件优化 | 第41-57页 |
| ·引言 | 第41页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·菌株与质粒 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·主要培养基 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·种子培养方法 | 第42页 |
| ·摇瓶发酵培养及产量检测过程 | 第42页 |
| ·主要营养元素的筛选 | 第42页 |
| ·培养基组分的单因素实验 | 第42-43页 |
| ·响应面发优化培养基组分及浓度 | 第43-44页 |
| ·氨水和氢氧化钠调节发酵液 pH 值 | 第44页 |
| ·诱导剂 IPTG 的诱导浓度对异戊二烯产量的影响 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-56页 |
| ·主要营养元素的筛选实验 | 第44-46页 |
| ·培养基组成成分单因素优化结果 | 第46-50页 |
| ·响应面法优化培养基组成成分实验结果 | 第50-54页 |
| ·摇瓶发酵过程中 pH 调节及诱导用量对异戊二烯的影响 | 第54-55页 |
| ·诱导剂诱导浓度对异戊二烯产量的影响 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 第4章 5L 发酵罐水平发酵条件优化及质粒稳定性分析 | 第57-69页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·菌株与质粒 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57-58页 |
| ·主要仪器 | 第58页 |
| ·培养基及配置 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-60页 |
| ·5 L发酵罐发酵操作流程 | 第58-59页 |
| ·菌浓测定 | 第59页 |
| ·葡萄糖测定 | 第59页 |
| ·异戊二烯产量计算 | 第59页 |
| ·细胞生长曲线绘制 | 第59页 |
| ·5 L 发酵罐发酵条件优化 | 第59页 |
| ·质粒稳定性检测方法 | 第59-60页 |
| ·结果及分析 | 第60-67页 |
| ·产异戊二烯工程大肠杆菌细胞生长曲线 | 第60-61页 |
| ·三种发酵培养基对工程菌株发酵产异戊二烯作用比较 | 第61-63页 |
| ·温度对大肠杆菌菌株发酵产异戊二烯的影响 | 第63-65页 |
| ·不同溶氧控制对菌株发酵产异戊二烯的影响 | 第65-66页 |
| ·菌株不同发酵阶段质粒的稳定性 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| 第5章 结论与展望 | 第69-71页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| ·展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 附录 A | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 在学期间的主要科研成果 | 第81页 |
| 一、发表的学术论文 | 第81页 |
