| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| 1 高等植物脂肪酸合成路径研究进展 | 第9-10页 |
| 2 油菜籽中各种脂肪酸成分含量分析 | 第10页 |
| 3 影响油菜籽中油酸含量相关基因研究进展 | 第10-14页 |
| ·油酸含量与FAD2基因的关系 | 第10-12页 |
| ·油酸含量与FAD3基因 | 第12-13页 |
| ·油酸含量与FATB基因 | 第13-14页 |
| 4 植物RNA干扰机理及应用 | 第14-15页 |
| 5 多基因共表达研究进展及载体构建策略 | 第15-16页 |
| ·多启动子表达载体构建 | 第15-16页 |
| ·多顺反子表达载体构建 | 第16页 |
| 6 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 7 实验原理示意图 | 第17-18页 |
| 第二章 甘蓝型油菜FAD2、FAD3、FATB基因的克隆及RNAI载体的构建 | 第18-30页 |
| 1 材料与方法 | 第18-22页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·供试品种 | 第18页 |
| ·实验菌株 | 第18页 |
| ·实验载体 | 第18页 |
| ·分子生物学试剂 | 第18页 |
| ·仪器 | 第18页 |
| ·溶液配制 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-22页 |
| ·甘蓝型油菜总DNA的提取 | 第19页 |
| ·RNA的提取和检测 | 第19-20页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第20页 |
| ·PCR扩增 | 第20页 |
| ·PCR产物回收(参照安比奥凝胶回收使用说明说明) | 第20-21页 |
| ·FADB重组干扰片段的融合 | 第21页 |
| ·干扰载体的构建 | 第21-22页 |
| ·冻融法转化根癌农杆菌 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-30页 |
| ·目的序列的克隆与PCR扩增检测结果 | 第22-23页 |
| ·甘蓝型油菜Napin启动子的克隆及检测结果 | 第22-23页 |
| ·甘蓝型油菜Fad2i、Fad3i、Fatbi片段的克隆 | 第23页 |
| ·测序结果的同源性比对 | 第23-27页 |
| ·甘蓝型油菜种子特异性启动子Napin序列比对 | 第23-25页 |
| ·甘蓝型油菜Fad2i序列比对结果 | 第25页 |
| ·甘蓝型油菜Fad3i序列比对结果 | 第25-26页 |
| ·甘蓝型油菜Fatbi序列比对结果 | 第26-27页 |
| ·FADB干扰片段的克隆及菌落PCR扩增的检测结果 | 第27页 |
| ·干扰载体的酶切验证 | 第27-29页 |
| ·Napin启动子双酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·干扰片段FADB序列反向连入PFGC5941.Napinp酶切鉴定 | 第28页 |
| ·干扰片段FADB序列正向连入PFGC5941.Napinp酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·转化农杆菌质粒PCR检测结果 | 第29-30页 |
| 第三章 中双9号的遗传转化及转化子的筛选 | 第30-36页 |
| 1 材料与方法 | 第30-32页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·供试品种 | 第30页 |
| ·菌株和载体 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·抗生素 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·筛选培养基中PPT浓度的确定 | 第31页 |
| ·甘蓝型油菜的遗传转化 | 第31页 |
| ·转化苗的筛选 | 第31-32页 |
| ·转基因油菜发育中种子 | 第32页 |
| ·转基因油菜种子脂肪酸含量测定 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-36页 |
| ·PPT浓度梯度筛选 | 第32-33页 |
| ·抗性苗PCR筛选结果 | 第33页 |
| ·转基因油菜种子中脂肪酸含量测定结果 | 第33-34页 |
| ·转基因油菜种子中FAD2、FAD3、FATB基因荧光定量表达结果 | 第34-35页 |
| ·转基因油菜植株各发育时期 | 第35-36页 |
| 第四章 讨论 | 第36-40页 |
| 1 转基因油菜种子中脂肪酸组分变化影响因素分析 | 第36-38页 |
| ·NAPIN启动子对脂肪酸组分的影响 | 第36-37页 |
| ·FAD2、FAD3、FATB同工酶类或其它脂肪酸合成路径的存在对脂肪酸组分的影响 | 第37-38页 |
| ·Fatb同工酶Fata对棕榈酸及硬脂酸合成的影响 | 第37页 |
| ·Fad2、Fad3同工酶及其它脂肪酸合成路径存在的可能性分析 | 第37-38页 |
| 2 重组PCR在载体构建中的应用及条件摸索 | 第38页 |
| 3 转基因对甘蓝型油菜植株影响 | 第38-39页 |
| 4 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 作者简介 | 第47页 |
