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无载体骨架无选择标记玉米转化体系的优化

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
引言第13-15页
1 文献综述第15-41页
   ·转基因植物的优越性及其生物安全性探讨第15-27页
     ·转基因植物的优越性第15-17页
     ·转基因植物的发展前景第17-18页
     ·转基因植物的生物安全性争论第18-19页
     ·引发转基因植物安全性的因素及解决对策第19-27页
       ·载体骨架序列整合到植物染色体中的现象及安全性隐患第19-22页
       ·解决载体骨架序列问题的策略第22-23页
       ·选择标记基因的安全性隐患及解决策略第23-26页
       ·直接获得无载体骨架无选择标记的转基因植株第26-27页
   ·花粉管通道转基因技术研究进展第27-32页
     ·外源DNA直接导入受体植物技术的理论依据第27-28页
     ·花粉管通道法的提出及发展第28-30页
     ·花粉管通道法的细胞胚胎学机理探讨第30-31页
     ·花粉管通道法存在的问题和解决思路第31-32页
   ·外源基因在转基因植物中的整合及遗传特性第32-40页
     ·外源基因在转基因植物中整合方式的多样性第33-34页
     ·外源基因在转基因植物中的遗传多样性第34-39页
       ·单位点整合孟德尔遗传第35页
       ·多位点整合孟德尔遗传第35-36页
       ·非孟德尔遗传第36-39页
     ·探索植物转基因新方法对外源基因整合、表达和遗传的影响第39-40页
   ·本研究的目的和意义第40-41页
2 玉米子房滴注转化方法的建立与优化第41-60页
   ·试验材料第41-43页
     ·试验仪器第41-42页
     ·商品试剂第42页
     ·配制试剂第42-43页
     ·试验材料第43页
     ·引物设计与合成第43页
       ·制备线性转化元件所用引物第43页
       ·转化材料检测所用引物第43页
   ·试验方法第43-50页
     ·线性GFP基因转化元件的制备第43-46页
     ·苯胺兰染色观察花粉管第46页
     ·转化方法第46-47页
     ·外源DNA转化后的显微观察和示踪第47-48页
     ·转化材料的PCR检测第48-50页
   ·结果与分析第50-57页
     ·线性转化元件的制备第50-51页
     ·苯胺兰染色观察花粉管第51-52页
     ·玉米子房滴注法的建立与优化第52-57页
   ·讨论第57-59页
   ·小结第59-60页
3 线性转化元件在转基因植株中的整合、表达及遗传分析第60-76页
   ·试验材料第60-61页
     ·植物材料第60页
     ·试验仪器第60页
     ·商品试剂第60-61页
     ·配制试剂第61页
     ·引物设计与合成第61页
   ·试验方法第61-66页
     ·狭缝杂交检测第61-62页
     ·Southern blot检测第62-63页
     ·RT-PCR检测第63-65页
     ·Northern blot检测第65页
     ·转基因植株GFP表达检测第65-66页
     ·转基因植株后代遗传分析第66页
   ·结果与分析第66-74页
     ·狭缝杂交检测第66-67页
     ·转基因植株的Southern blot检测第67-69页
     ·RT-PCR检测第69-70页
     ·转基因植株的Northern blot检测第70-71页
     ·GFP表达第71页
     ·转基因植株后代遗传分析第71-74页
   ·讨论第74-75页
   ·小结第75-76页
4 子房滴注法转化线性GUS基因转化元件第76-90页
   ·试验材料第76-78页
     ·植物材料和质粒第76页
     ·试验仪器第76页
     ·商品试剂第76-77页
     ·配制试剂第77页
     ·引物设计与合成第77-78页
       ·制备线性转化元件所用引物第77-78页
       ·转化材料检测所用引物第78页
   ·试验方法第78-81页
     ·线性GUS基因转化元件的制备第78-80页
     ·子房滴注法转化线性GUS基因转化元件第80页
     ·转化材料的PCR检测第80-81页
     ·Southern blot检测第81页
     ·RT-PCR检测第81页
     ·组织化学染色检测GUS表达第81页
     ·转基因植株后代遗传分析第81页
   ·结果与分析第81-87页
     ·线性转化元件的制备第81-82页
     ·转化材料的PCR检测第82-83页
     ·狭缝杂交检测第83-84页
     ·转基因植株的Southern blot检测第84-85页
     ·RT-PCR检测第85-86页
     ·GUS表达第86页
     ·转基因植株后代遗传分析第86-87页
   ·讨论第87-89页
   ·小结第89-90页
5 花粉管通道法转化线性GFP转化元件及简便、高效检测方法的建立第90-99页
   ·试验材料第90-91页
     ·植物材料和质粒第90页
     ·试验仪器第90页
     ·商品试剂第90-91页
     ·配制试剂第91页
   ·试验方法第91-92页
     ·花粉管通道法转化线性GFP基因转化元件第91页
     ·花粉管通道法转化部位的初步确定第91-92页
     ·转基因植株筛选第92页
     ·Southern blot检测第92页
     ·Northern blot检测第92页
   ·结果与分析第92-96页
     ·花粉管通道法转化部位的初步确定第92-94页
     ·转基因植株的筛选第94页
     ·转基因植株的Southern blot检测第94-95页
     ·转基因植株的Northern blot检测第95-96页
   ·讨论第96-98页
   ·小结第98-99页
6 结论与展望第99-102页
   ·结论第99-100页
   ·创新点摘要第100页
   ·有待进一步开展的工作第100页
   ·展望第100-102页
参考文献第102-115页
附录Ⅰ 缩略语第115-116页
附录Ⅱ 论文中所用的DNA Marker第116-117页
攻读博士学位期间发表学术论文情况第117-118页
致谢第118-119页
个人简介第119-120页

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