| 前言 | 第1-5页 |
| 英文缩写词 | 第5-8页 |
| 目录 | 第8-16页 |
| 中文摘要 | 第16-18页 |
| 文献综述 | 第18-62页 |
| 盐酸克伦特罗在我国的非法使用及安全评价 | 第18-27页 |
| 1 “瘦肉精”中毒事件 | 第19-21页 |
| 2 我国政府对“瘦肉精”非法使用的综合治理 | 第21-24页 |
| 3 盐酸克伦特罗中毒的安全评价 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-27页 |
| β-肾上腺受体激动剂及其作用机理 | 第27-46页 |
| 1 β-激动剂的结构、作用、转化及应用限制 | 第28-37页 |
| 1．1 β-激动剂与动物生长 | 第28-29页 |
| 1．2 β-激动剂的化学特性 | 第29-32页 |
| 1．2．1 天然β-激动剂 | 第29-30页 |
| 1．2．2 苯乙醇胺类β-激动剂的化学特性 | 第30-32页 |
| 1．3 β-激动剂的生物转化 | 第32-35页 |
| 1．4 β-激动剂的应用 | 第35-37页 |
| 2 β-肾上腺素受体（β-AR）及亚型 | 第37-40页 |
| 2．1 β-AR亚型 | 第38-40页 |
| 2．2 β-AR亚型间的调节 | 第40页 |
| 2．3 骨骼肌和脂肪细胞上的β-AR亚型 | 第40页 |
| 3 β-激动剂的作用机理 | 第40-42页 |
| 3．1 对骨骼肌的作用 | 第40页 |
| 3．2 对脂肪组织的作用 | 第40-41页 |
| 3．3 对其它系统的影响 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 盐酸克伦特罗的残留、危害及检测 | 第46-62页 |
| 1 CL中毒事件及残留标准 | 第47-49页 |
| 2 CL在我国的非法使用 | 第49页 |
| 3 CL在动物体内的吸收与残留 | 第49-55页 |
| 4 CL的检测方法 | 第55-57页 |
| 5 反思 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 实验研究 | 第62-157页 |
| 实验一 盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备及免疫学特性研究 | 第62-90页 |
| 1 材料与方法 | 第63-75页 |
| 1．1 主要试剂 | 第63-64页 |
| 1．2 仪器设备 | 第64页 |
| 1．3 细胞 | 第64-65页 |
| 1．4 实验动物 | 第65页 |
| 1．5 缓冲液和培养基 | 第65-67页 |
| 1．5．1 PBSa缓冲液 | 第65页 |
| 1．5．2 PBST洗涤缓冲液 | 第65页 |
| 1．5．3 GNK溶液 | 第65页 |
| 1．5．4 PB缓冲液 | 第65页 |
| 1．5．5 包被液 | 第65-66页 |
| 1．5．6 封闭液 | 第66页 |
| 1．5．7 TMD底物缓冲液 | 第66页 |
| 1．5．8 终止液 | 第66页 |
| 1．5．9 0．2％台盼蓝溶液 | 第66页 |
| 1．5．10 100×青链霉素溶液 | 第66页 |
| 1．5．11 100×8-氮鸟嘌呤储存液 | 第66页 |
| 1．5．12 7．5％NaHCO_3溶液 | 第66页 |
| 1．5．13 50％聚乙二醇（PEG） | 第66-67页 |
| 1．5．14 饱和硫酸铵 | 第67页 |
| 1．5．15 培养基 | 第67页 |
| 1．5．15．1 基础培养基RPMI-1640 | 第67页 |
| 1．5．15．2 完全培养基RPMI-1640／10 | 第67页 |
| 1．5．15．3 HAT培养基 | 第67页 |
| 1．5．15．4 HT培养基 | 第67页 |
| 1．6 方法 | 第67-75页 |
| 1．6．1 抗原制备 | 第67-68页 |
| 1．6．2 小鼠免疫 | 第68页 |
| 1．6．3 杂交瘤细胞株的建立 | 第68-70页 |
| 1．6．3．1 NSO骨髓瘤细胞准备 | 第68页 |
| 1．6．3．2 饲养细胞的制备 | 第68-69页 |
| 1．6．3．3 脾细胞的制备 | 第69页 |
| 1．6．3．4 细胞融合 | 第69-70页 |
| 1．6．4 融合细胞的培养 | 第70页 |
| 1．6．5 筛选（Screening） | 第70页 |
| 1．6．6 克隆（Cloning） | 第70-71页 |
| 1．6．7 单克隆抗体生产 | 第71页 |
| 1．6．7．1 体外培养 | 第71页 |
| 1．6．7．2 体内诱生腹水 | 第71页 |
| 1．6．7．3 单克隆抗体腹水IgG的提纯 | 第71页 |
| 1．6．8 兔抗鼠IgG辣根过氧化物酶标记 | 第71-72页 |
| 1．6．8．1 兔抗鼠IgG的制备与提纯 | 第71-72页 |
| 1．6．8．2 兔抗鼠IgG与HRP的偶联 | 第72页 |
| 1．6．9 CL单克隆抗体的鉴定 | 第72-75页 |
| 1．6．9．1 CL单克隆抗体间接ELISA效价及工作浓度的测定 | 第72-73页 |
| 1．6．9．2 单克隆抗体同种型鉴定 | 第73页 |
| 1．6．9．3 单克隆抗体的交叉反应性 | 第73页 |
| 1．6．9．4 CL单抗反应动力学 | 第73-74页 |
| 1．6．9．4．1 CL单抗亲和力的测定 | 第73-74页 |
| 1．6．9．4．2 CL单抗EIA最适工作浓度和滴度测定 | 第74页 |
| 1．6．9．5 CL单抗的胶体金膜层析（WestGold）鉴定 | 第74-75页 |
| 2 结果 | 第75-80页 |
| 2．1 杂交瘤的稳定性及分泌单抗的间接ELISA效价 | 第75页 |
| 2．2 CL单抗的同种型鉴定 | 第75页 |
| 2．3 CL单抗的直接结合效价 | 第75-76页 |
| 2．4 CL单抗的交叉反应性 | 第76-79页 |
| 2．5 CL单抗的WestGold鉴定结果 | 第79-80页 |
| 3 小结与讨论 | 第80-86页 |
| 3．1 关于CL的抗原性 | 第80-81页 |
| 3．2 关于CL mAb的交叉反应性 | 第81-82页 |
| 3．3 关于CL mAb的亲和力 | 第82页 |
| 3．4 关于CL单抗与CL多抗 | 第82-84页 |
| 3．5 关于CL单抗鉴定的WestGold实验 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-90页 |
| 实验二 盐酸克伦特罗快速检测试剂盒的研制及盐酸克伦特罗在猪尿液中的消除规律研究 | 第90-111页 |
| 1 材料和方法 | 第91-96页 |
| 1．1 药品及试剂 | 第91页 |
| 1．1．1 CL标准品 | 第91页 |
| 1．1．2 稀释缓冲液 | 第91页 |
| 1．2 实验动物及饲养管理 | 第91页 |
| 1．3 抗CL单克隆抗体 | 第91-92页 |
| 1．4 CL快速检测试剂盒（CL-Kit）的制备 | 第92-93页 |
| 1．5 CL-Kit操作方法及结果判定 | 第93-95页 |
| 1．5．1 浓缩试剂的稀释 | 第93页 |
| 1．5．2 检测样品的处理 | 第93页 |
| 1．5．3 定量测定 | 第93-95页 |
| 1．6 CL-Kit鉴定 | 第95-96页 |
| 1．6．1 CL-Kit的交叉反应性 | 第95页 |
| 1．6．2 基质效应性 | 第95-96页 |
| 1．6．3 精确性和重复性实验 | 第96页 |
| 1．6．4 时间稳定性测定 | 第96页 |
| 1．7 应用CL-Kit测定CL在猪尿液中的消除规律 | 第96页 |
| 2 结果与分析 | 第96-102页 |
| 2．1 CL-Kit的标准曲线及质量认证 | 第96-97页 |
| 2．2 CL-Kit的交叉反应性 | 第97-98页 |
| 2．3 基质效应 | 第98页 |
| 2．4 试剂盒的精确性 | 第98-99页 |
| 2．5 试剂盒的时间稳定性 | 第99-101页 |
| 2．6 CL在猪尿液中的消除规律 | 第101-102页 |
| 3 讨论 | 第102-108页 |
| 3．1 关于小分子半抗原的免疫分析 | 第102-103页 |
| 3．2 关于半抗原免疫分析法的原理 | 第103-105页 |
| 3．3 关于CL在猪尿液中的消除规律 | 第105-106页 |
| 3．4 关于CL残留的控制原理及休药期 | 第106-108页 |
| 3．4．1 最高残留限量 | 第106-107页 |
| 3．4．2 休药期 | 第107-108页 |
| 4 结论 | 第108页 |
| 参考文献 | 第108-111页 |
| 实验三 猪尿液中盐酸克伦特罗残留的ELISA法和GC-MS法测定比较 | 第111-123页 |
| 1 材料和方法 | 第112-114页 |
| 1．1 试剂和仪器 | 第112页 |
| 1．2 方法 | 第112-114页 |
| 1．2．1 实验动物与样品采集 | 第112-113页 |
| 1．2．2 ELISA法样品处理及测定 | 第113页 |
| 1．2．3 GC-MS法样品处理及测定 | 第113-114页 |
| 1．2．3．1 样品的酶解与提取 | 第113页 |
| 1．2．3．2 样品的固相萃取与净化 | 第113页 |
| 1．2．3．3 衍生化 | 第113-114页 |
| 1．2．3．4 GC-MS测定参数 | 第114页 |
| 2 结果与分析 | 第114-119页 |
| 2．1 GC-MS标准曲线 | 第114-115页 |
| 2．2 猪尿液中CL测定的ELISA与GC-MS比较 | 第115-119页 |
| 3 讨论 | 第119-121页 |
| 3．1 气-质联用（GC-MS）分析的灵敏度 | 第119-120页 |
| 3．2 CL的衍生化 | 第120页 |
| 3．3 样品的消解和净化 | 第120-121页 |
| 4 结论 | 第121页 |
| 参考文献 | 第121-123页 |
| 实验四 应用ELISA和HPLC测定饲料中的盐酸克伦特罗 | 第123-132页 |
| 1 材料和方法 | 第124-126页 |
| 1．1 试剂和仪器 | 第124页 |
| 1．2 方法 | 第124-126页 |
| 1．2．1 添加CL饲料样品制备及预处理 | 第124-125页 |
| 1．2．2 ELISA测定 | 第125页 |
| 1．2．3 HPLC测定 | 第125-126页 |
| 1．2．3．1 样品的提纯与净化 | 第125-126页 |
| 1．2．3．2 标准曲线 | 第126页 |
| 1．2．3．3 色谱条件及测定 | 第126页 |
| 2 结果与分析 | 第126-129页 |
| 2．1 标准曲线及最低检出浓度 | 第126页 |
| 2．2 色谱图 | 第126-129页 |
| 2．3 饲料样品中CL的测定 | 第129页 |
| 3 讨论 | 第129-130页 |
| 3．1 反相HPLC测定饲料中CL | 第129-130页 |
| 3．2 样品回收率 | 第130页 |
| 4 结论 | 第130页 |
| 参考文献 | 第130-132页 |
| 实验五 单克隆抗体膜层析技术测定盐酸克伦特罗抗原 | 第132-145页 |
| 1 材料和方法 | 第133-136页 |
| 1．1 试剂和仪器 | 第133页 |
| 1．2 单抗的纯化 | 第133页 |
| 1．3 胶体金的制备 | 第133-134页 |
| 1．4 单抗的胶金标记 | 第134页 |
| 1．5 胶体金点免疫结合法检测CL抗原 | 第134页 |
| 1．6 用试纸条定量测定盐酸克伦特罗抗原 | 第134-135页 |
| 1．7 用CL快速检测试纸条半定量检测猪尿液中盐酸克伦特罗含量 | 第135-136页 |
| 2 结果 | 第136-139页 |
| 2．1 CL抗原的胶体金点免疫结合实验 | 第136页 |
| 2．2 试纸条法测定CL抗原 | 第136页 |
| 2．3 试纸条法和ELISA法检测猪尿液中CL的比较 | 第136-139页 |
| 3 小结与讨论 | 第139-144页 |
| 3．1 免疫膜层析技术的原理及灵敏性 | 第139-140页 |
| 3．2 CL残留检测方法的分类及灵敏度 | 第140-142页 |
| 3．3 CL残留分析方法的发展概况 | 第142-144页 |
| 参考文献 | 第144-145页 |
| 实验六 盐酸克伦特罗中毒的病理学研究 | 第145-157页 |
| 1 材料和方法 | 第146-147页 |
| 1．1 临床病理材料 | 第146页 |
| 1．2 实验病理材料 | 第146-147页 |
| 1．3 病理组织学标本制作 | 第147页 |
| 2 结果 | 第147-148页 |
| 2．1 中毒家兔的临床症状观察 | 第147页 |
| 2．2 中毒小鼠的临床症状观察 | 第147页 |
| 2．3 中毒小鼠的病理学观察 | 第147-148页 |
| 3 分析与讨论 | 第148-149页 |
| 3．1 CL中毒性瘫痪 | 第148页 |
| 3．2 CL中毒性心肌炎 | 第148-149页 |
| 参考文献 | 第149-151页 |
| 实验六 附图 | 第151-157页 |
| 结论 | 第157-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
| 英文摘要 | 第159-162页 |
| CURRICULUM VITAE | 第162-163页 |
| PUBLICATIONS | 第163-165页 |
| 作者版权声明 | 第165页 |
