中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
前言 | 第9-11页 |
材料与方法 | 第11-33页 |
1 材料 | 第11-17页 |
·原代细胞和细胞系 | 第11页 |
·抗体 | 第11页 |
·培养基、试剂盒和主要试剂 | 第11-12页 |
·主要溶液的配制 | 第12-15页 |
·引物序列 | 第15页 |
·耗材 | 第15-16页 |
·主要仪器设备 | 第16-17页 |
2 实验方法 | 第17-33页 |
·质粒的构建 | 第17-20页 |
·Ad-293细胞的复苏、传代培养和冻存 | 第20-22页 |
·大鼠乳鼠心肌细胞的原代培养 | 第22页 |
·重组腺病毒的构建、包装、扩增和感染 | 第22-23页 |
·PCR鉴定转基因小鼠 | 第23页 |
·小鼠心肌缺血/再灌注模型的复制 | 第23-24页 |
·小鼠心脏功能检测 | 第24页 |
·小鼠心肌缺血和梗死范围的判定 | 第24-25页 |
·细胞凋亡的检测 | 第25页 |
·RT-PCR检测基因的表达量 | 第25-28页 |
·Western blot检测蛋白的表达量 | 第28-31页 |
·免疫细胞化学染色 | 第31页 |
·H&E染色 | 第31-32页 |
·免疫组织化学染色 | 第32页 |
·统计学分析 | 第32-33页 |
实验结果 | 第33-51页 |
1 心肌I/R损伤上调Nrdp1表达 | 第33-34页 |
2 Nrdp1对I/R诱导的原代大鼠心肌细胞凋亡和炎症的影响 | 第34-36页 |
3 心脏特异性过表达Nrdp1转基因小鼠的构建 | 第36-38页 |
4 心脏特异性过表达Nrdp1对小鼠的心功能无明显影响 | 第38-39页 |
5 心脏特异性过表达Nrdp1促进I/R诱导的心肌梗死和小鼠的死亡率 | 第39-41页 |
6 心脏特异性过表达Nrdp1促进I/R诱导的心肌细胞凋亡 | 第41-43页 |
7 心脏特异性过表达Nrdp1促进心肌纤维紊乱和炎症反应 | 第43-45页 |
8 心脏特异性过表达Nrdp1降低其底物蛋自ErbB3及下游信号蛋白的表达和活性 | 第45-48页 |
9 体外心肌细胞过表达Nrdp1抑制其底物蛋自ErbB3及下游蛋白的表达;而过表达显性负性突变的Nrdp1促进上述蛋白的表达 | 第48-51页 |
讨论 | 第51-55页 |
小结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
附录 | 第60-77页 |
1 英文名词及缩写 | 第60-62页 |
2 发表的文章 | 第62-64页 |
3 综述 | 第64-75页 |
参考文献 | 第72-75页 |
4 个人简历 | 第75-76页 |
5 致谢 | 第76-77页 |