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鹅催乳素受体基因克隆和多克隆抗体制备及组织表达分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语中英文对照第11-12页
第一章 文献综述第12-42页
   ·前言第12页
   ·细胞因子及其受体第12-14页
     ·细胞因子第12-13页
     ·细胞因子受体第13-14页
   ·催乳素及其受体第14-30页
     ·催乳素第14-15页
     ·催乳素受体第15-17页
     ·催乳素受体基因多种启动子利用及转录本第17-22页
     ·催乳素受体转录本选择性剪接及转录本异形体第22-30页
   ·催乳素受体活化诱导的信号传导第30-33页
     ·催乳素受体活化第31页
     ·催乳素受体活化诱导的二种主要信号通路第31-33页
 参考文献第33-42页
第二章 鹅催乳素受体基因克隆和基因组织表达分析第42-80页
 摘要第42-43页
 ABSTRACT第43-44页
   ·前言第44-45页
   ·材料与方法第45-54页
     ·实验材料和试剂第45页
     ·总RNA分离第45-46页
     ·RNA逆转录及cDNA质量鉴定第46页
     ·mRNA分离第46-47页
     ·5’ -及3’-RACE cDNA链合成第47页
     ·cDNA克隆第47-51页
     ·转录本异形体克隆第51页
     ·微量羽髓细胞DNA提取第51-52页
     ·疑似SNP位点验证第52页
     ·成体组织基因表达分析第52-53页
     ·DNA片段胶回收第53页
     ·阳性克隆挑选、鉴定及序列分析第53-54页
   ·结果与分析第54-69页
     ·鹅催乳素受体基因第54-57页
     ·鹅催乳素受体蛋白第57-60页
     ·鹅与其它脊椎动物催乳素受体比对第60-62页
     ·鹅催乳素受体基因转录本第62-64页
     ·鹅催乳素受体基因转录本异形体第64-68页
     ·鹅催乳素受体基因SNP第68页
     ·鹅成体组织催乳素受体基因表达第68-69页
   ·讨论第69-73页
     ·催乳素受体基因及鹅催乳素受体转录本第69-70页
     ·单核酸多态性及鹅催乳素受体基因SNP第70-72页
     ·动物细胞DNA提取方法及微量动物细胞基因组DNA提取液第72-73页
   ·结论第73-74页
 参考文献第74-80页
第三章 鹅催乳素受体多克隆抗体制备及受体组织表达分析第80-96页
 摘要第80页
 ABSTRACT第80-81页
   ·前言第81-82页
   ·材料与方法第82-87页
     ·实验材料和试剂第82-83页
     ·总RNA分离、RNA逆转录及cDNA质量鉴定第83页
     ·cDNA胞外域扩增及鉴定第83页
     ·PCR产物双酶切及胶回收纯化第83页
     ·pET-28a(+)质粒大量提取、双酶切及胶回收纯化第83-84页
     ·胞外域重组蛋白exPRLR表达质粒exPRLR-pET-28a(+)构建第84-85页
     ·表达质粒exPRLR-pET-28a(+)转化第85-86页
     ·表达质粒exPRLR-pET-28a(+)诱导表达及重组蛋白exPRLR SDS-PAGE电泳分析第86页
     ·细菌超声波裂解第86页
     ·重组蛋白exPRLR纯化、复性及SDS-PAGE分析第86页
     ·兔抗重组蛋白exPRLR抗体制备及抗体滴度测定第86-87页
     ·重组蛋白exPRLR及鹅组织表达的PRLR Western blot鉴定第87页
     ·阳性克隆挑选、鉴定及序列分析第87页
   ·结果与分析第87-91页
     ·鹅催乳素受体基因cDNA胞外域扩增第87-88页
     ·鹅催乳素受体胞外域表达质粒exPRLR-pET-28a(+)阳性克隆鉴定第88-89页
     ·鹅催乳素受体胞外域重组蛋白exPRLR电泳分析第89-90页
     ·兔抗鹅胞外域重组蛋白exPRLR抗体Western blot鉴定第90页
     ·鹅成体组织催乳素受体表达第90-91页
   ·讨论第91-92页
     ·表达质粒、感受态细胞转化、诱导表达、重组蛋白复性第91-92页
     ·鹅催乳素受体体内存在形式第92页
   ·结论第92-93页
 参考文献第93-96页
全文结论第96-98页
创新第98-100页
附录第100-102页
攻读博士学位期间发表的论文第102-104页
致谢第104页

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