摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语中英文对照 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-42页 |
·前言 | 第12页 |
·细胞因子及其受体 | 第12-14页 |
·细胞因子 | 第12-13页 |
·细胞因子受体 | 第13-14页 |
·催乳素及其受体 | 第14-30页 |
·催乳素 | 第14-15页 |
·催乳素受体 | 第15-17页 |
·催乳素受体基因多种启动子利用及转录本 | 第17-22页 |
·催乳素受体转录本选择性剪接及转录本异形体 | 第22-30页 |
·催乳素受体活化诱导的信号传导 | 第30-33页 |
·催乳素受体活化 | 第31页 |
·催乳素受体活化诱导的二种主要信号通路 | 第31-33页 |
参考文献 | 第33-42页 |
第二章 鹅催乳素受体基因克隆和基因组织表达分析 | 第42-80页 |
摘要 | 第42-43页 |
ABSTRACT | 第43-44页 |
·前言 | 第44-45页 |
·材料与方法 | 第45-54页 |
·实验材料和试剂 | 第45页 |
·总RNA分离 | 第45-46页 |
·RNA逆转录及cDNA质量鉴定 | 第46页 |
·mRNA分离 | 第46-47页 |
·5’ -及3’-RACE cDNA链合成 | 第47页 |
·cDNA克隆 | 第47-51页 |
·转录本异形体克隆 | 第51页 |
·微量羽髓细胞DNA提取 | 第51-52页 |
·疑似SNP位点验证 | 第52页 |
·成体组织基因表达分析 | 第52-53页 |
·DNA片段胶回收 | 第53页 |
·阳性克隆挑选、鉴定及序列分析 | 第53-54页 |
·结果与分析 | 第54-69页 |
·鹅催乳素受体基因 | 第54-57页 |
·鹅催乳素受体蛋白 | 第57-60页 |
·鹅与其它脊椎动物催乳素受体比对 | 第60-62页 |
·鹅催乳素受体基因转录本 | 第62-64页 |
·鹅催乳素受体基因转录本异形体 | 第64-68页 |
·鹅催乳素受体基因SNP | 第68页 |
·鹅成体组织催乳素受体基因表达 | 第68-69页 |
·讨论 | 第69-73页 |
·催乳素受体基因及鹅催乳素受体转录本 | 第69-70页 |
·单核酸多态性及鹅催乳素受体基因SNP | 第70-72页 |
·动物细胞DNA提取方法及微量动物细胞基因组DNA提取液 | 第72-73页 |
·结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
第三章 鹅催乳素受体多克隆抗体制备及受体组织表达分析 | 第80-96页 |
摘要 | 第80页 |
ABSTRACT | 第80-81页 |
·前言 | 第81-82页 |
·材料与方法 | 第82-87页 |
·实验材料和试剂 | 第82-83页 |
·总RNA分离、RNA逆转录及cDNA质量鉴定 | 第83页 |
·cDNA胞外域扩增及鉴定 | 第83页 |
·PCR产物双酶切及胶回收纯化 | 第83页 |
·pET-28a(+)质粒大量提取、双酶切及胶回收纯化 | 第83-84页 |
·胞外域重组蛋白exPRLR表达质粒exPRLR-pET-28a(+)构建 | 第84-85页 |
·表达质粒exPRLR-pET-28a(+)转化 | 第85-86页 |
·表达质粒exPRLR-pET-28a(+)诱导表达及重组蛋白exPRLR SDS-PAGE电泳分析 | 第86页 |
·细菌超声波裂解 | 第86页 |
·重组蛋白exPRLR纯化、复性及SDS-PAGE分析 | 第86页 |
·兔抗重组蛋白exPRLR抗体制备及抗体滴度测定 | 第86-87页 |
·重组蛋白exPRLR及鹅组织表达的PRLR Western blot鉴定 | 第87页 |
·阳性克隆挑选、鉴定及序列分析 | 第87页 |
·结果与分析 | 第87-91页 |
·鹅催乳素受体基因cDNA胞外域扩增 | 第87-88页 |
·鹅催乳素受体胞外域表达质粒exPRLR-pET-28a(+)阳性克隆鉴定 | 第88-89页 |
·鹅催乳素受体胞外域重组蛋白exPRLR电泳分析 | 第89-90页 |
·兔抗鹅胞外域重组蛋白exPRLR抗体Western blot鉴定 | 第90页 |
·鹅成体组织催乳素受体表达 | 第90-91页 |
·讨论 | 第91-92页 |
·表达质粒、感受态细胞转化、诱导表达、重组蛋白复性 | 第91-92页 |
·鹅催乳素受体体内存在形式 | 第92页 |
·结论 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-96页 |
全文结论 | 第96-98页 |
创新 | 第98-100页 |
附录 | 第100-102页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第102-104页 |
致谢 | 第104页 |