中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
前言 | 第13-19页 |
1 前列腺癌背景介绍 | 第13页 |
2 前列腺癌相关基因PC-1研究进展 | 第13-15页 |
3 PC-1启动子简介 | 第15页 |
4 前列腺癌转基因鼠模型研究进展 | 第15-18页 |
5 Filamin A简介 | 第18-19页 |
第一部分 mPC-1启动子活性检测 | 第19-24页 |
1 材料与方法 | 第20-21页 |
·材料 | 第20页 |
·方法 | 第20-21页 |
2 结果与讨论 | 第21-23页 |
mPC-1启动子活性检测 | 第21-23页 |
3 小结 | 第23-24页 |
第二部分 PC-1表达载体构建 | 第24-41页 |
1 材料与方法 | 第25-32页 |
·材料 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-32页 |
2 结果与讨论 | 第32-40页 |
·p MPP-PC-1载体构建 | 第32-37页 |
·PC-1基因的获得 | 第33页 |
·pPC-1-IRES2-EGFP载体构建 | 第33-34页 |
·pPC-1-IRES2-EGFP-PstI载体构建 | 第34-35页 |
·pMPP-Cre载体的改构 | 第35-36页 |
·p MPP-PC-1-0.8载体构建 | 第36页 |
·p MPP-PC-1载体构建 | 第36-37页 |
·pCAGGS-PC-1-NotI载体构建 | 第37-38页 |
·pCAGGS-NotI载体构建 | 第37-38页 |
·pCAGGS-PC-1-NotI载体构建 | 第38页 |
·pCAGGS-PC-1-PC-1-NotI载体构建 | 第38-39页 |
·pCAGGS-PC-1载体构建 | 第38页 |
·pCAGGS-PC-1-NotI载体构建 | 第38-39页 |
·pCAGGS-PC-1-PC-1-NotI载体构建 | 第39页 |
·pMPP-PC-1-NdeI载体构建 | 第39-40页 |
·pPC-1-IRES2-EGFP载体构建 | 第39页 |
·pMPP-PC-1-NdeI载体构建 | 第39-40页 |
3 小结 | 第40-41页 |
第三部分 显微注射制备PC-1转基因鼠 | 第41-47页 |
1 材料与方法 | 第41-43页 |
·材料 | 第41页 |
·方法 | 第41-43页 |
2 结果与讨论 | 第43-46页 |
·p MPP-PC-1载体构建效果验证 | 第43-44页 |
·pCAGGS-PC-1-XhoI和pCAGGS-PC-1-PC-1-NotI载体构建效果验证 | 第44页 |
·pMPP-PC-1-NdeI载体构建效果验证 | 第44-45页 |
·绿色荧光检测pMPP-PC-1-NdeI载体构建效果 | 第44-45页 |
·Western-blot检测PC-1蛋白表达 | 第45页 |
·显微注射 | 第45-46页 |
3 小结 | 第46-47页 |
第四部分 Filamin A基因功能研究 | 第47-56页 |
1 材料与方法 | 第47-49页 |
·材料 | 第47页 |
·方法 | 第47-49页 |
2 结果与讨论 | 第49-55页 |
·PC-1影响Filamin A的表达 | 第49-50页 |
·Filamin A的表达谱 | 第50-51页 |
·Filamin A表达的干涉 | 第51-53页 |
·发夹siRNA模板的设计和表达载体的构建 | 第51页 |
·RNAi载体构建的PCR鉴定 | 第51-52页 |
·Filamin A siRNA对Filamin A基因表达的影响 | 第52-53页 |
·建立抑制Filamin A表达的前列腺癌细胞株 | 第53页 |
·干涉Filamin A导致C4-2细胞对辐射抵抗力增强 | 第53-54页 |
·干涉Filamin A促进C4-2细胞生长 | 第54-55页 |
3 小结 | 第55-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
缩略词表 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
引物及说明 | 第62-63页 |
载体构建流程 | 第63-67页 |