| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 缩略语表 | 第15-17页 |
| 1 前言 | 第17-30页 |
| ·脂肪细胞分化及其分子调节 | 第17-20页 |
| ·转录因子 | 第18-19页 |
| ·脂肪形成的诱导因素 | 第19-20页 |
| ·脂肪形成的抑制因素 | 第20页 |
| ·脂类代谢 | 第20-22页 |
| ·脂肪酸合成 | 第20-21页 |
| ·脂肪酸氧化 | 第21-22页 |
| ·CIDE家族的研究进展 | 第22-30页 |
| ·CIDE家族的发现 | 第23-24页 |
| ·CIDE家族的结构和功能特征 | 第24-27页 |
| ·CIDEa | 第25-26页 |
| ·CIDEb | 第26页 |
| ·CIDEc/FSP27 | 第26-27页 |
| ·CIDE家族的组织特异性分布 | 第27页 |
| ·CIDE家族的亚细胞定位 | 第27页 |
| ·CIDE家族与脂肪代谢 | 第27-29页 |
| ·CIDE家族与细胞凋亡 | 第29-30页 |
| ·研究的目的和意义 | 第30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-48页 |
| ·材料 | 第30-34页 |
| ·实验动物及RNA样品 | 第30页 |
| ·DNA样品 | 第30-31页 |
| ·cDNA | 第30-31页 |
| ·用于基因片段分离的基因组DNA | 第31页 |
| ·用于基因染色体定位的DNA | 第31页 |
| ·工具酶及主要生化试剂 | 第31页 |
| ·试剂盒 | 第31-32页 |
| ·质粒和菌株 | 第32页 |
| ·细胞 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| ·常用试剂配制 | 第33页 |
| ·分子生物学软件 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-48页 |
| ·总RNA的提取、纯化处理及鉴定 | 第34-35页 |
| ·组织总RNA的提取(参照Trizol(上海生工)说明书) | 第34页 |
| ·细胞总RNA的提取(参照Invitrogon Trizol说明书) | 第34-35页 |
| ·组织总RNA的纯化(参照DNase Ⅰ说明书) | 第35页 |
| ·总RNA质量、纯度及含量检测 | 第35页 |
| ·CIDE家族基因的克隆 | 第35-40页 |
| ·CIDE家族基因cDNA制备 | 第35-38页 |
| ·PCR扩增产物的纯化 | 第38页 |
| ·扩增产物的鉴定(克隆和测序) | 第38-40页 |
| ·DNA序列同源性比较与鉴定 | 第40页 |
| ·CIDE家族基因的染色体定位 | 第40-42页 |
| ·总DNA提取 | 第40页 |
| ·CIDEa、CIDEc基因内含子序列的扩增 | 第40页 |
| ·CIDEb基因组序列的扩增 | 第40-41页 |
| ·CIDEc全基因组序列的电子扩增 | 第41页 |
| ·染色体定位所用引物的设计及特异性检测 | 第41页 |
| ·各基因染色体定位所扩增片断大小及PCR反应条件 | 第41-42页 |
| ·PCR扩增条带分型 | 第42页 |
| ·染色体定位及数据分析 | 第42页 |
| ·半定量PCR检测猪CIDE家族基因的组织表达谱 | 第42-43页 |
| ·组织表达谱的引物设计 | 第42-43页 |
| ·CIDE家族基因和GAPDH扩增的指数期循环数的确定 | 第43页 |
| ·CIDE家族基因和GAPDH扩增的PCR反应条件 | 第43页 |
| ·半定量分析 | 第43页 |
| ·细胞实验 | 第43-48页 |
| ·CIDEb真核表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·质粒的大量制备 | 第44-45页 |
| ·质粒浓度和纯度检测 | 第45页 |
| ·细胞培养条件 | 第45页 |
| ·细胞瞬时转染 | 第45-46页 |
| ·CIDEb启动子的载体构建 | 第46-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-69页 |
| ·总RNA质量和含量测定 | 第48页 |
| ·猪CIDE家族基因全长cDNA的克隆与序列分析 | 第48-59页 |
| ·猪CIDEa、CIDEb、CIDEc基因全编码区cDNA的克隆与序列分析 | 第48-56页 |
| ·猪CIDEb基因差异剪接体全编码区cDNA的克隆与序列分析 | 第56-59页 |
| ·猪CIDEb及其差异剪接体的部分cDNA的特异扩增 | 第56-58页 |
| ·CIDEb差异剪接体在其他物种中的检测 | 第58页 |
| ·猪CIDEb及其差异剪接体的组织表达谱 | 第58-59页 |
| ·猪CIDE家族基因组序列及染色体定位 | 第59-64页 |
| ·猪CIDE家族基因组片断的扩增 | 第59-60页 |
| ·猪CIDE家族基因组序列分析 | 第60-61页 |
| ·猪CIDE家族基因的染色体定位 | 第61-62页 |
| ·猪CIDEb基因组启动子区的克隆及结构分析 | 第62-64页 |
| ·猪CIDE家族基因各成员的组织表达谱 | 第64-67页 |
| ·CIDE家族基因各成员在梅山猪不同组织中的表达差异 | 第64-66页 |
| ·CIDE家族基因在脂肪和肝脏中表达的遗传差异 | 第66-67页 |
| ·猪CIDEb真核表达载体的构建及表达 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-74页 |
| ·猪CIDE家族基因的结构分析 | 第69-70页 |
| ·猪CIDE家族基因的染色体位置 | 第70-72页 |
| ·辐射杂种板细胞系技术作为基因定位方法的优缺点 | 第70-71页 |
| ·猪CIDE家族基因在染色体上定位结果及其定位区域QTL分布 | 第71-72页 |
| ·猪CIDE家族基因表达的组织及品种差异 | 第72-74页 |
| ·CIDE家族基因的表达分布与脂肪沉积的关系 | 第73-74页 |
| 5 结论与创新点 | 第74-76页 |
| ·结论 | 第74页 |
| ·创新点 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 研究生在读期间论文发表情况 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 附录1 | 第84-92页 |
| 附录2 | 第92页 |
