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西瓜连作土传枯萎病微生物生态学机理及其生物防治

摘要第1-15页
ABSTRACT第15-20页
缩略语及专有词汇检索表第20-22页
主要仪器和化学试剂检索表第22-24页
 1.仪器第22-23页
 2.试剂第23-24页
第一部分 文献综述第24-36页
 第一章、西瓜连作障碍及枯萎病研究综述第24-36页
  1.西瓜生产及西瓜连作障碍的各种表现及成因第24-26页
  2.研究西瓜连作障碍及枯萎病的目的和意义第26-27页
  3.西瓜枯萎病的发生发展条件和表现及其危害第27-28页
  4.西瓜枯萎病病原菌的生物学特征及生活史第28-29页
  5.西瓜尖孢镰刀菌研究进展第29-31页
  6.西瓜枯萎病的防治第31-36页
   ·物理防治第32页
   ·化学防治第32页
   ·农业防治第32-33页
   ·选育抗枯萎病西瓜品种第33页
   ·生物防治第33-34页
   ·现行方法的优缺点比较及未来发展方向第34-36页
第二部分 研究报告第36-190页
 第二章、西瓜连作土壤中微生物区系分析及可培养微生物分离鉴定第36-59页
  1.材料方法第37-42页
   ·供试土壤第38页
   ·微生物区系分析及可培养微生物分离鉴定培养基第38-41页
     ·细菌培养基第38-40页
     ·放线菌培养基第40页
     ·真菌培养基第40-41页
     ·镰刀菌培养基第41页
   ·土壤微生物的分离、计数第41页
   ·可培养微生物物种丰度、多度、及生物多样性计算第41-42页
   ·所用仪器和化学试剂第42页
   ·数据处理第42页
  2.结果分析第42-56页
   ·西瓜连作土中微生物区系分析第42-43页
   ·西瓜连作土中可培养细菌的分离鉴定第43页
   ·西瓜连作土中可培养放线菌的分离鉴定第43-51页
   ·西瓜连作土中可培养真菌的分离鉴定第51-54页
   ·西瓜连作土中可培养镶刀菌的分离鉴定第54-56页
   ·西瓜连作土中可培养微生物多样性变化第56页
  3.讨论第56-58页
  4.本章小结第58-59页
 第三章、西瓜连作土中尖孢镶刀菌西瓜专化型分离、鉴定及休闲后微生物区系和微生物多样性变化第59-83页
  1.材料方法第61-67页
   ·菌株分离鉴定及纯化培养第61页
   ·供试作物品种第61-62页
   ·生理生化试验第62-63页
     ·温度试验第62页
     ·pH试验第62页
     ·生长曲线第62页
     ·产毒试验第62页
     ·产酶试验第62-63页
   ·西瓜枯萎病病原菌的分子生物学特征鉴定第63-66页
     ·西瓜尖孢镰刀菌菌丝体基因组总DNA的提取第63-64页
     ·西瓜尖孢镰刀菌基因组总DNA片段扩增的引物设计和PCR扩增第64页
     ·基因组DNAPCR产物纯化、回收及其与pMD19-T载体连接T/A克隆第64页
     ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化第64-65页
     ·质粒DNA的小量提取第65-66页
     ·质粒DNA的小量酶切验证第66页
     ·DNA序列测定第66页
     ·西瓜尖孢镰刀菌系统发育地位第66页
   ·供试土壤第66-67页
   ·土壤微生物区系分析培养基(见第二章)第67页
   ·土壤样品的采集及微生物的分离、计数第67页
   ·可培养微生物物种丰度、多度、及生物多样性计算(见第二章)第67页
   ·数据处理第67页
   ·所用仪器和化学试剂第67页
  2.结果分析第67-79页
   ·尖孢镰刀菌菌株分离鉴定第67-68页
   ·回接发病试验第68-70页
   ·尖孢镰刀菌西瓜专化型鉴定第70-71页
   ·西瓜尖孢镰刀菌分子生物学特征鉴定第71页
   ·尖孢镰刀菌西瓜专化型生理生化特征第71-74页
   ·休闲条件下西瓜连作土中微生物丰度的季节变化第74页
   ·休闲条件下西瓜连作土中微生物丰度的不同年度变化第74-76页
   ·西瓜连作土休闲过程中西瓜尖孢镰刀菌丰度的变化第76-77页
   ·西瓜连作土休闲过程中微生物多样性变化第77页
   ·西瓜连作土休闲后优势微生物种群的变化第77-79页
  3.讨论第79-82页
  4.本章小结第82-83页
 第四章、西瓜连作土中尖孢镰刀菌西瓜专化型与其它可培养微生物生态互作关系第83-93页
  1.材料方法第84-85页
   ·病原菌培养方法第84-85页
   ·西瓜尖孢镰刀菌液体培养及毒素提取第85页
   ·所用仪器和化学试剂第85页
  2.结果分析第85-89页
   ·西瓜连作土中可培养细菌与尖孢镰刀菌西瓜专化型相互作用第86页
   ·西瓜连作土中可培养放线菌与尖孢镰刀菌西瓜专化型相互作用第86-87页
   ·西瓜连作土中可培养真菌与尖孢镰刀菌西瓜专化型相互作用第87-88页
   ·西瓜连作土中可培养镰刀菌与尖孢镰刀菌西瓜专化型相互作用第88-89页
  3.讨论第89-92页
  4.本章小结第92-93页
 第五章、西瓜根系分泌物对尖孢镰刀菌生长和毒性因子的影响第93-113页
  1.材料方法第94-96页
   ·病原菌和西瓜品种第94页
   ·西瓜根系分泌物收集、纯化、浓缩第94-95页
   ·根系分泌物液相色谱测定第95页
   ·西瓜根系分泌物对尖孢镰刀菌菌落生长第95页
   ·孢子萌发测定第95页
   ·生物量和水解酶活测定第95-96页
   ·产孢测定第96页
   ·真菌毒素提取和测定第96页
   ·试验设计和数据分析第96页
   ·所用仪器试剂第96页
  2.结果分析第96-98页
   ·西瓜根系分泌物中酚酸成分及含量分析第96-97页
   ·西瓜根系分泌物对尖孢镰刀菌生物量和菌落生长的影响第97-98页
   ·对孢子萌发和产孢影响第98页
   ·对产毒的影响第98页
   ·对水解酶活性的影响第98页
  3.讨论第98-112页
  4.本章小结第112-113页
 第六章、西瓜植株腐解物对尖孢镰刀菌生长和毒性因子的影响第113-132页
  1.材料方法第114-116页
   ·病原菌和西瓜品种第114页
   ·西瓜腐解物浸提物收集、纯化、浓缩第114-115页
   ·西瓜腐解物液相色谱测定第115页
   ·尖孢镰刀菌生长测定第115页
   ·生物量和水解酶活测定第115页
   ·产孢测定第115页
   ·真菌毒素提取和测定第115页
   ·试验设计和数据分析第115页
   ·所用仪器试剂第115-116页
  2.结果分析第116-128页
   ·西瓜植株腐解物中酚酸成分及含量分析第116-123页
   ·西瓜植株腐解物浸提物对尖孢镰刀菌生物量和菌落生长的影响第123-125页
   ·对尖孢镰刀菌产孢影响第125页
   ·对尖孢镰刀菌产毒影响第125页
   ·对尖孢镰刀菌水解酶活性的影响第125-128页
  3.讨论第128-130页
  4.本章小结第130-132页
 第七章、外源酚酸对尖孢镰刀菌生长和毒性因子的影响第132-148页
  1.材料方法第133-134页
   ·病原菌和西瓜品种第133页
   ·酚酸对尖孢镰刀菌菌落生长第133页
   ·孢子萌发测定第133页
   ·生物量和水解酶活测定第133页
   ·产孢测定第133页
   ·真菌毒素提取和测定第133-134页
   ·试验设计和数据分析第134页
   ·所用仪器试剂第134页
  2.结果第134-144页
   ·酚酸对尖孢镰刀菌菌丝和菌落生长影响第134-136页
   ·酚酸对尖孢镰刀菌孢子萌发的影响第136-138页
   ·酚酸对尖孢镰刀菌产孢的影响第138-139页
   ·酚酸对尖孢镰刀菌产毒的影响第139-140页
   ·酚酸对尖孢镰刀菌水解酶活性的影响第140-143页
   ·酚酸对尖孢镰刀菌总体影响第143-144页
  3.讨论第144-146页
  4.本章小结第146-148页
 第八章、西瓜枯萎病的生物防治第148-164页
  1.材料方法第149-152页
   ·材料第149页
   ·方法第149-152页
     ·不同拮抗菌对尖孢镰刀菌的影响第149-150页
     ·有机肥对尖孢镰刀菌的影响第150页
     ·生物有机肥对尖孢镰刀菌的影响第150-151页
     ·相关指标生物测定及发病考察和防治效果评估第151-152页
     ·数据处理和统计分析第152页
   ·所用仪器及试剂第152页
  2.结果第152-160页
   ·不同拮抗菌对尖孢镰刀菌的影响第153-154页
   ·有机肥对尖孢镰刀菌的影响和对枯萎病的防治第154页
   ·有机肥和生物有机肥对尖孢镰刀菌的影响第154-160页
     ·有机肥和生物有机肥对西瓜枯萎病的防治第154-156页
     ·有机肥和生物有机肥对西瓜细胞膜脂质过氧化的影响(MDA)第156-157页
     ·有机肥和生物有机肥对西瓜鲜重的影响第157页
     ·有机肥和生物有机肥对西瓜过氧化氢酶(CAT)的影响第157页
     ·有机肥和生物有机肥对西瓜过氧化物酶(POD)的影响第157-159页
     ·有机肥和生物有机肥对西瓜超氧化物酶(SOD)的影响第159页
     ·有机肥和生物有机肥对西瓜细胞β-1,3-葡聚糖酶的影响第159-160页
     ·有机肥和生物有机肥对西瓜细胞几丁质酶的影响第160页
  3.讨论第160-163页
  4.本章小结第163-164页
 参考文献第164-190页
全文讨论第190-193页
 1.西瓜连作障碍与枯萎病的关系第190页
 2.西瓜-尖孢镰刀菌-土壤生态三角关系第190-192页
 3.拮抗菌与枯萎病的关系第192-193页
全文结论第193-194页
研究创新点第194-196页
附件第196-246页
 附件一:尖孢镰刀菌对西瓜幼苗生长和相关生理生化参数的影响第196-231页
  1.材料方法第197-203页
   ·尖孢镰刀菌对不同抗性品种西瓜幼苗的致病率第197-198页
     ·供试西瓜品种第197页
     ·试验方法第197-198页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜种子发芽影响第198-199页
     ·尖孢镰刀菌培养及毒素的浓缩纯化第198页
     ·西瓜种子处理及萌发试验第198页
     ·西瓜种子发芽势和发芽率第198-199页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗根系生长及生物量的影响第199页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗叶绿素及光合作用的影响第199页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗根系活力及抗氧化酶的影响第199-200页
     ·根系脱氢酶活性的测定第199页
     ·抗氧化酶及脂质过氧化测定第199-200页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗病程相关蛋白的影响第200-201页
     ·β-1,3-葡聚糖酶测定第200页
     ·几丁质酶测定第200-201页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗根细胞跨膜电位的影响第201页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗氮素代谢的影响第201-203页
     ·西瓜幼苗预处理培养条件及试验设计第201页
     ·植株酶提取和测定第201-203页
   ·数据统计处理第203页
   ·所用仪器试剂第203页
  2.结果分析第203-222页
   ·尖孢镰刀菌对不同抗性品种西瓜幼苗的致病率第203-204页
   ·尖孢镰刀菌毒素(FA)对西瓜种子发芽影响第204页
   ·尖孢镰刀菌毒素(FA)对西瓜幼苗根系生长及生物量的影响第204-206页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗叶绿素及光合作用的影响第206-209页
     ·对光合作用的影响第206-209页
     ·对叶绿素含量的影响第209页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗根系活力及抗氧化酶的影响第209-212页
     ·对根细胞脱氢酶活性影响第209页
     ·对叶片细胞膜脂质过氧化及丙二醛的影响第209-210页
     ·FA对叶片抗氧化酶活性影响第210-212页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗叶片细胞病程相关蛋白的影响第212-214页
     ·对β-1,3葡聚糖酶影响第213页
     ·对几丁质酶活性影响第213-214页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗根细胞跨膜电位的影响第214页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗氯素代谢的影响第214-222页
     ·FA对西瓜叶片中不同形态氮素含量得影响第214-215页
     ·对相关氮代谢酶的影响第215-222页
  3.讨论第222-229页
   ·西瓜尖孢镰刀菌对西瓜种子萌发和幼苗生长的影响第222-223页
   ·尖孢镰刀菌对西瓜幼苗叶片叶绿素和光合作用的影响第223-224页
   ·尖孢镰刀菌毒素对西瓜幼苗根系功能和叶片抗氧化酶及病程相关蛋白影响第224-229页
  4.本章小结第229-231页
 附件二:土壤环境生态因子对尖孢镰刀菌生长的影响第231-246页
  1.材料方法第232-234页
   ·温度对尖孢镰刀菌孢子萌发和菌落生长的影响第232页
   ·湿度对尖孢镰刀菌孢子萌发的影响第232-233页
   ·氧气对尖孢镰刀菌孢子萌发和菌落生长的影响第233页
   ·pH对尖孢镰刀菌的影响第233页
   ·腐殖酸对尖孢镰刀菌的影响第233页
   ·紫外线对尖孢镰刀菌孢子萌发的影响第233页
   ·杀虫剂对尖孢镰刀菌菌落生长的影响第233页
   ·杀菌剂对尖孢镰刀菌菌落生长的影响第233-234页
   ·除草剂对尖孢镰刀菌菌落生长的影响第234页
   ·盐分对尖孢镰刀菌的影响第234页
   ·有机酸对尖孢镰刀菌的影响第234页
   ·氨基酸对尖孢镰刀菌的影响第234页
   ·化学肥料对尖孢镰刀菌的影响第234页
   ·所用仪器和化学试剂第234页
  2.结果分析第234-243页
   ·温度对尖孢镰刀菌孢子萌发和菌落直径生长的影响第235页
   ·湿度对尖孢镰刀菌孢子萌发的影响第235页
   ·氧气对尖孢镰刀菌孢子萌发和菌落直径的影响第235-236页
   ·pH对尖孢镰刀菌菌落生长影响第236-237页
   ·腐殖酸对尖孢镰刀菌生长的影响第237页
   ·紫外线对尖孢镰刀菌孢子萌发的影响第237-238页
   ·杀虫剂对尖孢镰刀菌菌落生长的影响第238-239页
   ·杀菌剂对尖孢镰刀菌菌落生长的影响第239-240页
   ·除草剂对尖孢镰刀菌菌落生长的影响第240-241页
   ·盐分对尖孢镰刀菌的影响第241页
   ·有机酸对尖孢镰刀菌的影响第241-242页
   ·氨基酸对尖孢镰刀菌的影响第242页
   ·化学肥料对尖孢镰刀菌的影响第242-243页
  3.讨论第243-245页
  4.本章小结第245-246页
致谢第246-248页
攻读博士学位期间发表的SCI论文第248-249页

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