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拟黑多刺蚁acetylcholinesterase基因的克隆mRNA水平表达及其与发育相关性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 前言第10-18页
   ·乙酰胆碱酯酶简述第10页
   ·乙酰胆碱酯酶在动物体内的分布第10-11页
   ·乙酰胆碱酯酶的功能第11-13页
   ·乙酰胆碱酯酶的分子结构第13-14页
   ·乙酰胆碱酯酶的编码基因第14-15页
   ·拟黑多刺蚁简述第15-16页
   ·研究目的和意义第16-17页
   ·研究目标和整体路线第17-18页
第二章 拟黑多刺蚁Pv-ace基因cDNA序列的克隆第18-39页
   ·材料第18-20页
     ·动物材料第18页
     ·仪器设备第18页
     ·主要实验试剂第18-19页
     ·常用溶液配置第19页
     ·琼脂糖凝胶的制备第19-20页
   ·方法第20-33页
     ·RNA的提取与鉴定第20-21页
     ·第一链cDNA的合成第21-22页
     ·引物设计与合成第22-23页
     ·拟黑多刺蚁Pv-ace基因全长序列扩增第23-27页
     ·拟黑多刺蚁Pv-ace cDNA序列5’端的扩增(5’RACE)第27-31页
     ·拟黑多刺蚁Pv-ace cDNA序列3’端的扩增(3’RACE)第31-32页
     ·序列的拼接第32-33页
   ·结果与分析第33-39页
     ·总RNA的提取第33页
     ·拟黑多刺蚁Pv-ace基因全长cDNA序列的扩增第33-35页
     ·拟黑多刺蚁Pv-acecDNA序列开放阅读框分析第35-39页
第三章 拟黑多刺蚁Pv-AChE蛋白序列的生物信息学分析第39-50页
   ·分析方法与结果第39-50页
     ·蛋白序列的同源性分析第39-40页
     ·蛋白序列的系统进化分析第40-42页
     ·蛋白质的保守结构域分析第42页
     ·蛋白质理化性质分析第42-45页
     ·疏水性分析第45页
     ·信号肽分析第45-47页
     ·蛋白质二级结构分析第47-48页
     ·蛋白质三维结构分析第48-50页
第4章 荧光实时定量PCR技术检测拟黑多刺蚁Pv-ace基因mRNA水平表达第50-60页
   ·实验材料和方法第50页
     ·生物材料第50页
     ·主要试剂与仪器第50页
   ·实验方法第50-53页
     ·总RNA的提取及第一链cDNA的制备第50-51页
     ·引物设计第51页
     ·模板及引物质量检测第51-52页
     ·SYBRGreen实时定量PCR实验第52-53页
     ·数据分析方法第53页
   ·结果与分析第53-60页
     ·引物的专一性检测第53-55页
     ·模板质量的检测第55-56页
     ·拟黑多刺蚁不同品级、不同发育阶段虫体Pv-ace mRNA的相对表达第56-60页
第五章 讨论第60-64页
   ·关于RNA的提取第60页
   ·PCR反应条件的选择和RACE技术第60-61页
   ·生物信息学技术的应用第61-62页
   ·Pv-ace在拟黑多刺蚁不同品级和不同发育阶段之间的定量表达分析第62-64页
第六章 总结第64-66页
参考文献第66-76页
致谢第76-77页
攻读硕士学位期间的研究成果第77页

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