| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 文献综述 | 第14-22页 |
| 1 病原学研究 | 第14-19页 |
| ·病原形态 | 第14页 |
| ·分类地位 | 第14-15页 |
| ·病毒增殖 | 第15-16页 |
| ·病毒纯化 | 第16页 |
| ·DHV-Ⅰ基因组基本结构 | 第16-19页 |
| ·DHV-Ⅰ基因组非编码区 | 第17-18页 |
| ·DHV-Ⅰ的基因组编码区 | 第18-19页 |
| 2 DHV病原检测 | 第19-20页 |
| ·中和试验 | 第19页 |
| ·琼脂扩散试验 | 第19页 |
| ·免疫电镜 | 第19页 |
| ·间接血凝抑制试验 | 第19-20页 |
| ·荧光抗体技术 | 第20页 |
| ·酶联免疫吸附试验与单克隆抗体技术 | 第20页 |
| 3 防治 | 第20-21页 |
| 4 展望 | 第21-22页 |
| 1 引言 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-34页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·试验毒株 | 第23页 |
| ·病料来源 | 第23页 |
| ·工程菌与载体 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·ZJ-V株基因组全长cDNA分子克隆 | 第23-30页 |
| ·引物设计与合成 | 第23-24页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第24页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第24-25页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第25-27页 |
| ·片段A的PCR扩增 | 第25页 |
| ·片段B的PCR扩增 | 第25页 |
| ·片段C的PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·片段D的PCR扩增 | 第26页 |
| ·片段E的PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的纯化与回收 | 第27页 |
| ·PCR产物的连接 | 第27-28页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第28页 |
| ·重组质粒的提取 | 第28-30页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第30页 |
| ·核苷酸序列测定 | 第30页 |
| ·ZJ-V株全基因组序列解析 | 第30-31页 |
| ·ZJ-V株全基因组核苷酸序列及编码的氨基酸序列分析 | 第30页 |
| ·VP1的核苷酸及所编码的氨基酸序列结果与分析 | 第30-31页 |
| ·分离株VP1的核苷酸序列系统进化关系分析 | 第31页 |
| ·DVH-Ⅰ结构蛋白二级结构和B细胞抗原表位预测 | 第31页 |
| ·Ⅰ型鸭病毒性肝炎RT-PCR检测方法的建立及初步应用 | 第31-34页 |
| ·引物合成 | 第31页 |
| ·病料处理 | 第31-32页 |
| ·病毒总RNA抽提 | 第32页 |
| ·对照菌/毒株的DNA或RNA抽提 | 第32页 |
| ·基因组cDNA的合成 | 第32页 |
| ·PCR扩增条件的优化 | 第32页 |
| ·RT-PCR特异性试验 | 第32页 |
| ·RT-PCR敏感性试验 | 第32页 |
| ·应用RT-PCR对病料和分离毒株进行检测 | 第32页 |
| ·鸡胚接种试验 | 第32页 |
| ·DHV-Ⅰ增殖试验 | 第32-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-50页 |
| ·PCR扩增结果 | 第34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·ZJ-V株全基因组核苷酸序列测定结果 | 第35-36页 |
| ·ZJ-V株全基因组序列解析 | 第36-46页 |
| ·P1区核苷酸序列比较及其推导的氨基酸序列分析 | 第36-37页 |
| ·DHV-Ⅰ VP1编码区氨基酸差异分析 | 第37页 |
| ·VP1系统进化树分析 | 第37-38页 |
| ·P2区核苷酸序列比较及其推导的氨基酸序列分析 | 第38-39页 |
| ·P3区核苷酸序列比较及其推导的氨基酸序列分析 | 第39-40页 |
| ·5′端非编码区一级、二级结构分析 | 第40-41页 |
| ·3′端非编码区(3′NCR)一级、二级结构分析 | 第41-42页 |
| ·VP1蛋白预测的二级结构与B细胞表位预测 | 第42-44页 |
| ·VP3蛋白预测的二级结构与B细胞表位预测 | 第44-45页 |
| ·VP0蛋白预测的二级结构与B细胞表位预测 | 第45-46页 |
| ·Ⅰ型鸭病毒性肝炎RT-PCR检测方法的建立 | 第46-50页 |
| ·RT-PCR条件的优化 | 第46-47页 |
| ·PCR特异性试验 | 第47页 |
| ·RT-PCR检测DHV-Ⅰ型的敏感性 | 第47-48页 |
| ·RT-PCR检测临床病料和阳性分离株检测结果 | 第48页 |
| ·鸡胚接种试验结果 | 第48页 |
| ·DHV病毒细胞培养结果 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-55页 |
| ·P1结构蛋白编码区 | 第50页 |
| ·P2非结构蛋白编码区 | 第50页 |
| ·P3非结构蛋白编码区 | 第50-51页 |
| ·3′端非编码区 | 第51页 |
| ·5′端非编码区 | 第51页 |
| ·VP1基因序列分析 | 第51-53页 |
| ·DHV-Ⅰ结构蛋白预测二级结构 | 第53页 |
| ·B细胞抗原表位预测结果 | 第53-54页 |
| ·RT-PCR诊断方法的快速特异性 | 第54页 |
| ·增殖病毒细胞模型选择 | 第54页 |
| ·不同血清型的鉴定 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |