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肺炎克雷伯菌和假单胞菌耐药机制研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-8页
符号表(缩略语)第8-10页
目录第10-15页
第1章 前言第15-17页
第2章 产ESBLs肺炎克雷伯菌整合子分析第17-47页
 1.材料第17-19页
   ·临床菌株第17页
   ·实验仪器及试剂第17-19页
     ·实验仪器第17-18页
     ·试剂第18页
     ·引物合成第18-19页
 2.实验方法第19-23页
   ·试剂制备第19-21页
     ·LB肉汤的制备第19页
     ·MH平板的制备第19页
     ·TBE电泳缓冲液的配制第19页
     ·TE缓冲液的配制第19-20页
     ·6×上样缓冲液的配制第20页
     ·IPTG母液的配制第20-21页
     ·溴化乙锭贮存液的配制第21页
     ·X-gal的配制第21页
   ·细菌复苏培养第21页
   ·E试验第21页
   ·DNA提取第21页
   ·PCR扩增第21页
   ·琼脂糖凝胶电泳及限制性酶切第21-22页
   ·感受态细胞的制备第22页
   ·PCR产物纯化第22页
   ·PCR产物与T载体的连接第22-23页
   ·转化第23页
   ·阳性株筛选及测序第23页
   ·测序结果分析第23页
 3.结果第23-42页
   ·药敏试验第23-24页
   ·IntI1,IntI2和IntI3基因引物扩增结果第24页
   ·RB317和RB320引物扩增和限制性酶切结果第24页
   ·测序和氨基酸序列比对结果第24-38页
   ·不同耐药谱菌株整合子携带基因盒情况第38-42页
 4.讨论第42-43页
 参考文献第43-47页
第三章 耐亚胺培南铜绿假单胞菌流行病学分析第47-60页
 1.材料第47-48页
   ·临床菌株第47页
   ·实验仪器及试剂第47-48页
     ·实验仪器第47页
     ·试剂第47-48页
     ·引物合成第48页
 2.方法第48-50页
   ·药敏实验第48页
   ·金属酶表型检测第48-49页
   ·DNA提取第49页
   ·PCR扩增第49页
   ·测序第49-50页
 3.结果第50-54页
   ·耐亚胺培南铜绿假单胞菌药敏试验结果第50-51页
   ·金属酶表型检测结果第51页
   ·PCR扩增结果第51-54页
     ·金属酶引物扩增结果第51页
     ·外膜蛋白扩增结果第51页
     ·PSE引物扩增结果第51-52页
     ·测序结果第52-54页
 4.讨论第54-57页
 参考文献第57-60页
第四章 AmpC酶介导的铜绿假单胞菌耐药性分析第60-70页
 1.材料第60页
   ·临床菌株第60页
   ·实验仪器及试剂第60页
     ·实验仪器第60页
     ·试剂第60页
 2.方法第60-63页
   ·试剂配制第61页
   ·细菌复苏和培养第61页
   ·细菌DNA提取第61页
   ·细菌随机扩增多态性DNA分型第61-62页
   ·琼脂糖电泳第62页
   ·药敏试验第62页
   ·酶提取第62-63页
   ·头孢西丁三相试验第63页
   ·头孢西丁诱导实验第63页
 3.结果第63-66页
   ·RAPD分型结果第63-64页
   ·药敏试验结果第64页
   ·头孢西丁三相试验第64页
   ·头孢西丁诱导实验第64-66页
 4.讨论第66-68页
 参考文献第68-70页
第五章 一株产金属酶荧光假单胞菌的耐药性分析第70-81页
 1.材料第70-71页
   ·临床菌株第70页
   ·实验仪器及试剂第70-71页
     ·仪器第70页
     ·试剂第70-71页
     ·引物合成第71页
 2.实验方法第71-73页
   ·细菌复苏和培养第71页
   ·MIC测定第71页
   ·金属酶表型检测第71页
   ·DNA提取第71页
   ·质粒DNA提取第71-72页
   ·PCR扩增第72页
   ·克隆、测序及序列分析第72页
   ·酶粗提液的提取第72页
   ·确定各底物的最佳测定波长第72-73页
   ·酶稳定性测定第73页
 3.结果第73-78页
   ·临床资料第73页
   ·药敏试验结果第73-74页
   ·金属酶表型检测第74页
   ·质粒提取第74-75页
   ·PCR扩增结果第75页
   ·测序结果第75-77页
   ·6种β-内酰胺类抗生素的酶稳定性结果第77-78页
 4.讨论第78-79页
 参考文献第79-81页
结论第81-83页
综述一第83-87页
综述二第87-96页
致谢第96-97页
攻读博士学位期间发表的论文第97页

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