中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
符号表(缩略语) | 第8-10页 |
目录 | 第10-15页 |
第1章 前言 | 第15-17页 |
第2章 产ESBLs肺炎克雷伯菌整合子分析 | 第17-47页 |
1.材料 | 第17-19页 |
·临床菌株 | 第17页 |
·实验仪器及试剂 | 第17-19页 |
·实验仪器 | 第17-18页 |
·试剂 | 第18页 |
·引物合成 | 第18-19页 |
2.实验方法 | 第19-23页 |
·试剂制备 | 第19-21页 |
·LB肉汤的制备 | 第19页 |
·MH平板的制备 | 第19页 |
·TBE电泳缓冲液的配制 | 第19页 |
·TE缓冲液的配制 | 第19-20页 |
·6×上样缓冲液的配制 | 第20页 |
·IPTG母液的配制 | 第20-21页 |
·溴化乙锭贮存液的配制 | 第21页 |
·X-gal的配制 | 第21页 |
·细菌复苏培养 | 第21页 |
·E试验 | 第21页 |
·DNA提取 | 第21页 |
·PCR扩增 | 第21页 |
·琼脂糖凝胶电泳及限制性酶切 | 第21-22页 |
·感受态细胞的制备 | 第22页 |
·PCR产物纯化 | 第22页 |
·PCR产物与T载体的连接 | 第22-23页 |
·转化 | 第23页 |
·阳性株筛选及测序 | 第23页 |
·测序结果分析 | 第23页 |
3.结果 | 第23-42页 |
·药敏试验 | 第23-24页 |
·IntI1,IntI2和IntI3基因引物扩增结果 | 第24页 |
·RB317和RB320引物扩增和限制性酶切结果 | 第24页 |
·测序和氨基酸序列比对结果 | 第24-38页 |
·不同耐药谱菌株整合子携带基因盒情况 | 第38-42页 |
4.讨论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
第三章 耐亚胺培南铜绿假单胞菌流行病学分析 | 第47-60页 |
1.材料 | 第47-48页 |
·临床菌株 | 第47页 |
·实验仪器及试剂 | 第47-48页 |
·实验仪器 | 第47页 |
·试剂 | 第47-48页 |
·引物合成 | 第48页 |
2.方法 | 第48-50页 |
·药敏实验 | 第48页 |
·金属酶表型检测 | 第48-49页 |
·DNA提取 | 第49页 |
·PCR扩增 | 第49页 |
·测序 | 第49-50页 |
3.结果 | 第50-54页 |
·耐亚胺培南铜绿假单胞菌药敏试验结果 | 第50-51页 |
·金属酶表型检测结果 | 第51页 |
·PCR扩增结果 | 第51-54页 |
·金属酶引物扩增结果 | 第51页 |
·外膜蛋白扩增结果 | 第51页 |
·PSE引物扩增结果 | 第51-52页 |
·测序结果 | 第52-54页 |
4.讨论 | 第54-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
第四章 AmpC酶介导的铜绿假单胞菌耐药性分析 | 第60-70页 |
1.材料 | 第60页 |
·临床菌株 | 第60页 |
·实验仪器及试剂 | 第60页 |
·实验仪器 | 第60页 |
·试剂 | 第60页 |
2.方法 | 第60-63页 |
·试剂配制 | 第61页 |
·细菌复苏和培养 | 第61页 |
·细菌DNA提取 | 第61页 |
·细菌随机扩增多态性DNA分型 | 第61-62页 |
·琼脂糖电泳 | 第62页 |
·药敏试验 | 第62页 |
·酶提取 | 第62-63页 |
·头孢西丁三相试验 | 第63页 |
·头孢西丁诱导实验 | 第63页 |
3.结果 | 第63-66页 |
·RAPD分型结果 | 第63-64页 |
·药敏试验结果 | 第64页 |
·头孢西丁三相试验 | 第64页 |
·头孢西丁诱导实验 | 第64-66页 |
4.讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
第五章 一株产金属酶荧光假单胞菌的耐药性分析 | 第70-81页 |
1.材料 | 第70-71页 |
·临床菌株 | 第70页 |
·实验仪器及试剂 | 第70-71页 |
·仪器 | 第70页 |
·试剂 | 第70-71页 |
·引物合成 | 第71页 |
2.实验方法 | 第71-73页 |
·细菌复苏和培养 | 第71页 |
·MIC测定 | 第71页 |
·金属酶表型检测 | 第71页 |
·DNA提取 | 第71页 |
·质粒DNA提取 | 第71-72页 |
·PCR扩增 | 第72页 |
·克隆、测序及序列分析 | 第72页 |
·酶粗提液的提取 | 第72页 |
·确定各底物的最佳测定波长 | 第72-73页 |
·酶稳定性测定 | 第73页 |
3.结果 | 第73-78页 |
·临床资料 | 第73页 |
·药敏试验结果 | 第73-74页 |
·金属酶表型检测 | 第74页 |
·质粒提取 | 第74-75页 |
·PCR扩增结果 | 第75页 |
·测序结果 | 第75-77页 |
·6种β-内酰胺类抗生素的酶稳定性结果 | 第77-78页 |
4.讨论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-81页 |
结论 | 第81-83页 |
综述一 | 第83-87页 |
综述二 | 第87-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第97页 |