| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-25页 |
| 1 国内外研究进展 | 第8-21页 |
| ·土壤微生物在农业生态系统中的作用 | 第8-10页 |
| ·土壤环境因素对土壤微生物多样性的影响 | 第10-12页 |
| ·微生物多样性的研究方法 | 第12-21页 |
| 2 研究目的与意义 | 第21-23页 |
| 3 实验方案 | 第23-25页 |
| ·研究内容 | 第23-24页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| 第一章 适于多熟制土壤的高效DNA提取方法的筛选 | 第25-38页 |
| 1 实验材料 | 第25-27页 |
| ·研究材料 | 第25-26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·仪器 | 第26-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-31页 |
| ·土壤中总DNA的不同提取方法 | 第27-28页 |
| ·不同方法所得粗提DNA质量与纯度的检测 | 第28-29页 |
| ·粗提DNA的纯化 | 第29页 |
| ·不同提取方法对后期实验适用性分析 | 第29-31页 |
| 3 结果 | 第31-35页 |
| ·三种方法提取的DNA溶液在不同波长下的吸光值 | 第31-32页 |
| ·三种方法所获得基因组DNA的电泳检测 | 第32-33页 |
| ·纯化后DNA的电泳检测 | 第33-34页 |
| ·不同方法提取的DNA扩增效果检测 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| 第二章 GC夹引物PCR扩增方法的优化 | 第38-43页 |
| 1 实验材料 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-39页 |
| ·不同扩增策略的比较 | 第38-39页 |
| ·产物的琼脂糖电泳检测 | 第39页 |
| 3 结果 | 第39-41页 |
| ·常规PCR的扩增结果 | 第40页 |
| ·降落式PCR(Touchdown PCR)的扩增结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 小麦不同生育期细菌群落多样性的DGGE电泳分析 | 第43-50页 |
| 1 实验材料 | 第43-44页 |
| 2 实验方法 | 第44-46页 |
| ·小麦时期V3区的PCR扩增 | 第44页 |
| ·DGGE分离胶的制备 | 第44-45页 |
| ·V3区的DGGE分离 | 第45-46页 |
| ·染色 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-49页 |
| ·小麦时期PCR产物的琼脂糖电泳检测 | 第46-47页 |
| ·小麦时期V3区的DGGE分析 | 第47-48页 |
| ·小麦时期不同样品间的聚类分析 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 玉米不同生育期细菌群落多样性的DGGE电泳分析 | 第50-54页 |
| 1 实验材料 | 第50页 |
| 2 实验方法 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-53页 |
| ·玉米时期PCR产物的琼脂糖电泳检测 | 第50-51页 |
| ·玉米时期V3区的DGGE分析 | 第51-52页 |
| ·玉米时期不同样品间的聚类分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 全文结论 | 第54-56页 |
| ·筛选出一种适用于多熟制土壤的高效DNA提取方法 | 第54页 |
| ·优化了含有“GC夹板”结构引物的PCR扩增方法 | 第54页 |
| ·小麦不同生育期及不同土层深度细菌的变化规律 | 第54-55页 |
| ·玉米不同生育期及不同土层深度细菌的变化规律 | 第55页 |
| ·冬小麦-春玉米整个农作过程中细菌的变化规律 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 在读期间发表的论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
