中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-13页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
论文正文 | 第14-44页 |
第一章 前言 | 第14-16页 |
第二章 材料与方法 | 第16-24页 |
·主要仪器与设备 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16-17页 |
·实验对象 | 第17-18页 |
·实验分组 | 第18页 |
·实验流程 | 第18-19页 |
·实验方法 | 第19-23页 |
·MSCs的分离、培养与鉴定 | 第19-20页 |
·MSCs的分离、培养 | 第19页 |
·MSCs的鉴定 | 第19-20页 |
·MSCs定向分化为神经元样细胞及鉴定 | 第20页 |
·绘制细胞生存曲线 | 第20页 |
·Tunel荧光染色测定凋亡细胞数 | 第20-21页 |
·RT-PCR检测细胞内A20、fl-SMN、△7-SMN与Caspase-3mRNA的表达水平 | 第21-23页 |
·细胞总RNA的提取 | 第21-22页 |
·引物设计合成 | 第22页 |
·mRNA逆转录成cDNA | 第22-23页 |
·PCR扩增 | 第23页 |
·产物电泳检测 | 第23页 |
·不同浓度VPA干预SMA细胞模型后A20、Caspase-3、fl-SMN与△7-SMNmRNA的表达 | 第23页 |
·共聚焦显微镜共定位A20蛋白、Caspase-3蛋白、fl-SMN蛋白 | 第23页 |
·统计学方法 | 第23-24页 |
第三章 结果 | 第24-40页 |
·MSCs形态及鉴定 | 第24-25页 |
·MSCs预诱导和诱导后形态观察 | 第25页 |
·诱导后神经元样细胞表面特征抗原鉴定 | 第25-26页 |
·细胞生长曲线及细胞增殖变化 | 第26-28页 |
·细胞凋亡率的比较 | 第28-30页 |
·总RNA样品质量检测 | 第30页 |
·A20,fl-SMN,Caspase-3,△7-SMN mRNA的表达及比较 | 第30-34页 |
·不同浓度VPA干预SMA细胞模型组后的各指标变化 | 第34-37页 |
·A20,fl-SMN和Caspase3蛋白的共定位 | 第37-40页 |
第四章 讨论 | 第40-43页 |
·MSCs的生长、分化 | 第40页 |
·NLCs的自发性凋亡 | 第40-41页 |
·A20、SMN、Caspase3mRNA的表达与SMA细胞模型凋亡的关系 | 第41页 |
·丙戊酸与细胞凋亡的关系 | 第41-42页 |
·A20、SMN及Caspase3蛋白三者间的相互作用 | 第42-43页 |
第五章 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
综述 | 第47-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第63-64页 |
附录 | 第64页 |