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p27~(kip1)在小鼠卵巢发育中的控制作用

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-16页
第一章 哺乳动物卵巢发育的研究背景第16-37页
 一、哺乳动物的卵巢第16-18页
  1.卵巢的发育过程第16页
  2.卵母细胞和滤泡的分类第16-18页
 二、滤泡的活化和早期发育第18-21页
  1.原始滤泡的形成第18页
  2.原始滤泡的活化第18-20页
  3.滤泡的闭锁退化第20页
  4.不同发育阶段滤泡的形成规律第20-21页
 三、卵母细胞和粒层细胞之间的双向交流第21-23页
 四、卵母细胞内在的信号途径第23-29页
  1.磷酯酰肌醇—3激酶第23-24页
  2.磷酯酰肌醇—3激酶的活化方式第24页
  3.Ia型磷酯酰肌醇—3激酶途径第24-27页
  4.卵母细胞Ia型磷酯酰肌醇—3激酶信号途径的激活方式第27-28页
  5.卵母细胞内在的信号途径第28-29页
 五、基因修饰小鼠在研究中的应用第29-33页
  1.Sl位点自发突变小鼠模型第30-31页
  2.受体蛋白酪氨酸激酶中酪氨酸突变小鼠模型第31-32页
  3.Foxo3a基因的影响第32-33页
 六、本课题的研究目标第33-37页
第二章 实验材料和方法第37-60页
 第一节 小鼠的株型第37-38页
  一、小鼠的饲养条件第37页
  二、C57BL/6J小鼠第37页
  三、p27缺失(p27-/-)小鼠第37页
  四、p27和Cdk2共同缺失(p27-/-Cdk2-/-)小鼠第37-38页
 第二节 小鼠基因型的确定第38-42页
  一、基因组DNA的提取第38-39页
  二、基因扩增第39-41页
  三、琼脂糖凝胶电泳第41-42页
  四、基因型确定第42页
 第三节 确定卵母细胞和滤泡的数量第42-46页
  一、取材和固定第42-43页
  二、包埋第43页
  三、切片第43页
  四、染色计数第43-46页
 第四节 蛋白质表达水平的测定第46-51页
  一、试剂和溶液第46-48页
  二、蛋白质表达水平的测定第48-51页
 第五节 卵母细胞的分离和培养第51-57页
  一、试剂和溶液第51-52页
  二、卵母细胞的分离第52-54页
  三、干细胞因子(SCF)体外培养卵母细胞第54-55页
  四、体外培养卵母细胞的饥饿实验第55-56页
  五、免疫共沉淀实验第56-57页
 第六节 卵巢中相关激酶活性的测定第57-60页
  一、试剂和溶液第57-58页
  二、相关激酶活性的测定第58-60页
第三章 结果和讨论第60-81页
 一、p27对小鼠卵巢中原始滤泡形成的影响第61-65页
  1.p27缺失对小鼠卵巢中原始滤泡形成的影响第61-62页
  2.p27缺失小鼠中Cdk2对卵巢中原始滤泡形成的影响第62-63页
  3.结论和展望第63-65页
 二、p27对小鼠卵巢中原始滤泡活性的影响第65-68页
  1.p27缺失对小鼠卵巢中原始滤泡活性的影响第65-66页
  2.p27缺失对小鼠卵巢中卵母细胞磷酯酰肌醇-3激酶途径的影响第66-67页
  3.结论和展望第67-68页
 三、p27对小鼠卵巢中性成熟前原始滤泡死亡的影响第68-81页
  1.p27缺失对小鼠卵巢中性成熟前原始滤泡闭锁退化的影响第68-69页
  2.p27缺失小鼠卵巢中原始滤泡死亡的影响因素第69-70页
  3.结论和展望第70-81页
参考文献第81-88页
致谢第88-90页
攻读学位期间发表的学术论文目录第90-91页
学位论文评阅及答辩情况表第91页

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