中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-13页 |
符号说明 | 第13-14页 |
一 引言 | 第14-16页 |
二 细胞凋亡文献综述 | 第16-23页 |
1 细胞凋亡的一般概念 | 第16页 |
2 细胞凋亡的形态学变化 | 第16-17页 |
3 细胞凋亡的生化特点 | 第17页 |
·DNA的片段化 | 第17页 |
·生物大分子的合成 | 第17页 |
·细胞内Ca~(2+)浓度的增加 | 第17页 |
4 细胞凋亡的信号转导途径 | 第17-18页 |
·细胞凋亡的死亡受体途径 | 第17-18页 |
·细胞凋亡的线粒体途径 | 第18页 |
5 一些凋亡相关的重要蛋白 | 第18-23页 |
·Caspases家族 | 第18-20页 |
·Bcl-2家族 | 第20页 |
·死亡受体 | 第20-23页 |
三 NG-18体外抗肿瘤药效学评价 | 第23-33页 |
1 材料与方法 | 第24-28页 |
·药品和试剂 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·细胞株及细胞培养 | 第24-26页 |
·本实验所用细胞株的组织类型和来源 | 第24-25页 |
·本实验细胞株所用培养液配方 | 第25-26页 |
·细胞增殖抑制实验 | 第26-28页 |
·四氮唑盐还原法(MTT) | 第26-27页 |
·磺酰罗丹明B蛋白染色法(SRB) | 第27-28页 |
2 实验结果 | 第28-32页 |
3 讨论 | 第32-33页 |
四 NG-18诱导细胞凋亡及其机制 | 第33-57页 |
1 材料和方法 | 第34-39页 |
·药品和试剂 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34-35页 |
·凋亡形态学观察 | 第35页 |
·Annexin V-FITC/PI双染实验检测细胞早期凋亡 | 第35页 |
·DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 | 第35-36页 |
·PI染色,流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期变化 | 第36页 |
·单细胞凝胶电泳 | 第36-37页 |
·Caspases抑制剂抑制Caspases激活 | 第37页 |
·胞浆蛋白的提取 | 第37页 |
·Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白的变化 | 第37-39页 |
2 实验结果 | 第39-50页 |
·NG-18强烈诱导HL-60细胞凋亡发生 | 第39-42页 |
·倒置显微镜下观测细胞凋亡 | 第39页 |
·Annexin V-FITC/PI双染实验检测NG-18诱导的HL-60细胞早期凋亡 | 第39-40页 |
·DNA琼脂糖凝胶电泳检测NG-18诱导HL-60细胞晚期凋亡 | 第40-41页 |
·PI染色检测NG-18诱导的HL-60细胞凋亡 | 第41-42页 |
·NG-18对HL-60细胞周期无影响 | 第42-43页 |
·NG-18并非通过损伤HL-60细胞核DNA而诱导细胞凋亡 | 第43-44页 |
·NG-18激活Caspase-2,-3,-8,-9并诱导PARP的剪切 | 第44-46页 |
·NG-18对Bcl-2蛋白家族表达的影响以及诱导细胞色素c的释放 | 第46页 |
·NG-18诱导HL-60细胞凋亡依赖于Caspases途径,Caspase-8在凋亡过程中起着重要的作用 | 第46-50页 |
·NG-18诱导HL-60细胞凋亡依赖于Caspases途径 | 第46-47页 |
·Caspase-8在NG-18诱导HL-60凋亡过程中起着重要的作用 | 第47-50页 |
3 讨论 | 第50-57页 |
·NG-18能够诱导HL-60细胞凋亡 | 第50-51页 |
·NG-18并非通过损伤HL-60细胞核DNA而诱导细胞凋亡 | 第51页 |
·NG-18诱导HL-60细胞凋亡是依赖于Caspases的激活 | 第51-52页 |
·NG-18在诱导HL-60细胞凋亡过程中,能激活胞内和胞外两条凋亡途径 | 第52-53页 |
·细胞凋亡的死亡受体途径 | 第52页 |
·细胞凋亡的线粒体途径 | 第52-53页 |
·Caspase-8在NG-18诱导HL-60细胞凋亡的过程中起着关键性的作用 | 第53-54页 |
·NG-18对Bcl-2蛋白家族表达的影响 | 第54-57页 |
五 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第66-67页 |