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酵母双杂交技术筛选与p53蛋白相互作用的蛋白质研究

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
英文缩写词表第7-9页
文献综述第9-13页
1 引言第13-14页
2 材料与方法第14-29页
   ·实验材料第14-16页
     ·菌株和质粒第14页
     ·试剂第14-15页
     ·酵母培养基第15页
     ·氨基酸第15页
     ·分子生物学工具酶第15页
     ·分子生物学试剂盒第15-16页
     ·抗体第16页
     ·仪器第16页
   ·试验方法第16-29页
     ·pGBKT7/p53 载体构建第16-20页
     ·诱饵蛋白质在酵母中的表达第20-21页
     ·文库的扩增第21-22页
     ·自身转录激活活性的检测第22-23页
     ·酵母双杂交筛选与p53 相互作用蛋白第23页
     ·阳性克隆的鉴定第23-24页
     ·质粒的提取第24-25页
     ·重复鉴定及测序比对第25页
     ·PIA53 基因的钓取和克隆的构建第25-27页
     ·PIA53 与GST 融合蛋白质在大肠杆菌中的表达第27-29页
3 结果与分析第29-40页
   ·诱饵表达载体的构建和表达第29-30页
   ·诱饵蛋白质在酵母细胞中的表达鉴定第30页
   ·文库的扩增第30-31页
   ·自身转录激活活性的检测第31页
   ·初步筛选结果第31-32页
   ·重复鉴定结果第32-34页
   ·测序比对结果第34-38页
   ·筛选到的基因cDNA 序列的钓取及克隆表达第38-40页
     ·PIA53 基因的钓取第38页
     ·PIA53 基因原核表达载体的构建第38-39页
     ·原核蛋白的表达第39-40页
4 讨论第40-42页
5 结论第42-43页
参考文献第43-49页
附录第49-52页
致谢第52-53页
作者简介第53-54页
攻读硕士学位期间发表文章第54页

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