草地早熟禾(Poa pratensis L.)抗旱耐盐基因遗传转化
独创性声明 | 第1页 |
关于论文使用授权的说明 | 第2-3页 |
摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
缩写词 | 第11-13页 |
第一章 综述 | 第13-32页 |
·草地早熟禾再生体系研究进展 | 第13-18页 |
·外植体选择 | 第13-15页 |
·培养条件 | 第15页 |
·不同基因型对再生率的影响 | 第15-16页 |
·常见植物生长调节剂对再生体系的影响 | 第16-18页 |
·生长素类 | 第16-17页 |
·细胞分裂素类 | 第17-18页 |
·脱落酸 | 第18页 |
·草坪草遗传转化研究进展 | 第18-24页 |
·常见的遗传转化方法 | 第21-22页 |
·农杆菌转化法 | 第21页 |
·基因枪转化法 | 第21-22页 |
·电击法 | 第22页 |
·PEG 介导转化法 | 第22页 |
·草地早熟禾遗传转化概述 | 第22-24页 |
·植物常见抗旱、耐盐基因概述 | 第24-27页 |
·干旱、盐碱等逆境与植物的生理调控 | 第24-25页 |
·逆境对植株生理代谢过程影响 | 第24-25页 |
·植物响应逆境的生理机制 | 第25页 |
·部分已分离和鉴定的抗逆基因作用机理 | 第25-27页 |
·渗透调节因子合成酶基因及其应用 | 第26-27页 |
·功能蛋白基因及其应用 | 第27页 |
·本研究使用的抗旱、耐盐基因 | 第27-30页 |
·DRE81A 转录因子 | 第27-28页 |
·甜菜碱合成酶基因 | 第28-30页 |
·本研究的意义、内容与技术路线 | 第30-32页 |
·研究背景、目的、意义 | 第30页 |
·研究内容 | 第30页 |
·研究的技术路线 | 第30-32页 |
第二章 草地早熟禾再生体系建立 | 第32-47页 |
·材料与方法 | 第32-34页 |
·植物材料 | 第32页 |
·外植体的获得 | 第32页 |
·培养基 | 第32页 |
·培养方法 | 第32页 |
·再生植株的移栽 | 第32页 |
·数据统计及分析方法 | 第32-33页 |
·试验设计 | 第33-34页 |
·不同因素对草地早熟禾愈伤组织诱导的影响 | 第33页 |
·不同激素在草地早熟禾再生体系建立中的作用研究 | 第33-34页 |
·结果与分析 | 第34-45页 |
·不同因素对草地早熟禾愈伤组织诱导的影响 | 第35-37页 |
·不同外植体诱导愈伤的影响 | 第35页 |
·外植体消毒方式对诱导愈伤影响 | 第35-36页 |
·光照与黑暗培养对愈伤组织诱导的影响 | 第36页 |
·碳源对草地早熟禾愈伤组织诱导的影响 | 第36-37页 |
·基因型对愈伤组织诱导的影响 | 第37-38页 |
·不同激素对草地早熟禾再生体系影响 | 第38-44页 |
·正交设计在愈伤组织诱导中的应用 | 第38-39页 |
·正交设计结果验证 | 第39-40页 |
·正交设计应用于M 品种 | 第40-42页 |
·M 品种愈伤组织分化培养 | 第42-44页 |
·单因素试验设计对B、Md 品种分化试验结果 | 第44页 |
·最终确定的培养基 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
·愈伤组织诱导条件 | 第45-46页 |
·外植体的选择 | 第45页 |
·基因型选择 | 第45页 |
·最适愈伤组织诱导条件 | 第45-46页 |
·正交设计在草地早熟禾再生体系中应用 | 第46-47页 |
第三章 草地早熟禾遗传转化 | 第47-56页 |
·材料与方法 | 第47-51页 |
·受体材料 | 第47页 |
·表达载体 | 第47-48页 |
·转化方法 | 第48-49页 |
·金粉 DNA 复合体的制备 | 第48-49页 |
·受体材料的处理 | 第49页 |
·受体材料的轰击 | 第49页 |
·转化过程中的培养基 | 第49页 |
·基因枪转化因素的确定 | 第49-50页 |
·Gus 基因表达检测溶液的配制 | 第50页 |
·染色方法 | 第50页 |
·Gus 染色取样方法 | 第50页 |
·转化植株的筛选再生 | 第50-51页 |
·对转化植株进行田间管理 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-54页 |
·Gus 基因的表达检测 | 第51页 |
·金粉包裹物质对基因枪转化的影响 | 第51页 |
·金粉直径对基因枪转化的影响 | 第51-52页 |
·轰击高度、次数、渗透处理对转化的影响 | 第52页 |
·抗生素筛选压的确定 | 第52-53页 |
·抗性植株的获得 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
·基因枪轰击参数的选择 | 第54页 |
·不同基因型建立基因枪转化体系的差异 | 第54-55页 |
·转化植株分化过程中的形态变化 | 第55-56页 |
第四章 转化植株的分子检测 | 第56-69页 |
·材料与方法 | 第56-62页 |
·植物材料 | 第56页 |
·组织化学染色 | 第56页 |
·抗性植株的分子检测 | 第56-62页 |
·植物DNA 的提取 | 第56-58页 |
·转化植株的PCR 扩增检测 | 第58-59页 |
·转化植株的Southern 杂交检测 | 第59-62页 |
·结果与分析 | 第62-67页 |
·Gus 组织显色结果 | 第62页 |
·抗性植株的分子检测 | 第62-65页 |
·植物DNA 提取 | 第62-63页 |
·转化植株的 PCR 扩增检测 | 第63-64页 |
·转化植株的 Southern 杂交检测 | 第64-65页 |
·总体检测结果 | 第65-67页 |
·讨论 | 第67-69页 |
·植物基因组DNA 的提取方法 | 第67-68页 |
·PCR 扩增中常出现的问题 | 第68页 |
·Southern 杂交需要注意的问题 | 第68-69页 |
第五章 转基因植株生理检测 | 第69-81页 |
·材料与方法 | 第69-71页 |
·植物材料 | 第69页 |
·测试指标与测试方法 | 第69-71页 |
·细胞膜透性的测定 | 第69页 |
·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第69-70页 |
·过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第70页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第70-71页 |
·结果与分析 | 第71-79页 |
·转基因植株形态上的变化差异 | 第71页 |
·植株抗旱性指标测定 | 第71-77页 |
·细胞膜透性 | 第71-73页 |
·丙二醛含量 | 第73-74页 |
·POD 活性 | 第74-76页 |
·SOD 活性 | 第76-77页 |
·植株耐盐性指标测定 | 第77-79页 |
·讨论 | 第79-81页 |
·植株生理指标的测定 | 第79-80页 |
·外源基因在植株中的表达 | 第80页 |
·提高植株抗旱、耐盐性的途径 | 第80-81页 |
第六章 结论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-91页 |
附图 I | 第91-92页 |
附图Ⅱ | 第92-93页 |
附图Ⅲ | 第93-94页 |
附图Ⅳ | 第94-95页 |
附图Ⅴ | 第95-96页 |
个人简介 | 第96-97页 |
导师简介 | 第97-98页 |
获得成果目录清单 | 第98-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
博硕士学位论文同意发表声明 | 第100页 |