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草地早熟禾(Poa pratensis L.)抗旱耐盐基因遗传转化

独创性声明第1页
关于论文使用授权的说明第2-3页
摘要第3-5页
Abstract第5-11页
缩写词第11-13页
第一章 综述第13-32页
   ·草地早熟禾再生体系研究进展第13-18页
     ·外植体选择第13-15页
     ·培养条件第15页
     ·不同基因型对再生率的影响第15-16页
     ·常见植物生长调节剂对再生体系的影响第16-18页
       ·生长素类第16-17页
       ·细胞分裂素类第17-18页
       ·脱落酸第18页
   ·草坪草遗传转化研究进展第18-24页
     ·常见的遗传转化方法第21-22页
       ·农杆菌转化法第21页
       ·基因枪转化法第21-22页
       ·电击法第22页
       ·PEG 介导转化法第22页
     ·草地早熟禾遗传转化概述第22-24页
   ·植物常见抗旱、耐盐基因概述第24-27页
     ·干旱、盐碱等逆境与植物的生理调控第24-25页
       ·逆境对植株生理代谢过程影响第24-25页
       ·植物响应逆境的生理机制第25页
     ·部分已分离和鉴定的抗逆基因作用机理第25-27页
       ·渗透调节因子合成酶基因及其应用第26-27页
       ·功能蛋白基因及其应用第27页
   ·本研究使用的抗旱、耐盐基因第27-30页
     ·DRE81A 转录因子第27-28页
     ·甜菜碱合成酶基因第28-30页
   ·本研究的意义、内容与技术路线第30-32页
     ·研究背景、目的、意义第30页
     ·研究内容第30页
     ·研究的技术路线第30-32页
第二章 草地早熟禾再生体系建立第32-47页
   ·材料与方法第32-34页
     ·植物材料第32页
     ·外植体的获得第32页
     ·培养基第32页
     ·培养方法第32页
     ·再生植株的移栽第32页
     ·数据统计及分析方法第32-33页
     ·试验设计第33-34页
       ·不同因素对草地早熟禾愈伤组织诱导的影响第33页
       ·不同激素在草地早熟禾再生体系建立中的作用研究第33-34页
   ·结果与分析第34-45页
     ·不同因素对草地早熟禾愈伤组织诱导的影响第35-37页
       ·不同外植体诱导愈伤的影响第35页
       ·外植体消毒方式对诱导愈伤影响第35-36页
       ·光照与黑暗培养对愈伤组织诱导的影响第36页
       ·碳源对草地早熟禾愈伤组织诱导的影响第36-37页
     ·基因型对愈伤组织诱导的影响第37-38页
     ·不同激素对草地早熟禾再生体系影响第38-44页
       ·正交设计在愈伤组织诱导中的应用第38-39页
       ·正交设计结果验证第39-40页
       ·正交设计应用于M 品种第40-42页
       ·M 品种愈伤组织分化培养第42-44页
       ·单因素试验设计对B、Md 品种分化试验结果第44页
     ·最终确定的培养基第44-45页
   ·讨论第45-47页
     ·愈伤组织诱导条件第45-46页
       ·外植体的选择第45页
       ·基因型选择第45页
       ·最适愈伤组织诱导条件第45-46页
     ·正交设计在草地早熟禾再生体系中应用第46-47页
第三章 草地早熟禾遗传转化第47-56页
   ·材料与方法第47-51页
     ·受体材料第47页
     ·表达载体第47-48页
     ·转化方法第48-49页
       ·金粉 DNA 复合体的制备第48-49页
       ·受体材料的处理第49页
       ·受体材料的轰击第49页
       ·转化过程中的培养基第49页
     ·基因枪转化因素的确定第49-50页
       ·Gus 基因表达检测溶液的配制第50页
       ·染色方法第50页
       ·Gus 染色取样方法第50页
     ·转化植株的筛选再生第50-51页
     ·对转化植株进行田间管理第51页
   ·结果与分析第51-54页
     ·Gus 基因的表达检测第51页
     ·金粉包裹物质对基因枪转化的影响第51页
     ·金粉直径对基因枪转化的影响第51-52页
     ·轰击高度、次数、渗透处理对转化的影响第52页
     ·抗生素筛选压的确定第52-53页
     ·抗性植株的获得第53-54页
   ·讨论第54-56页
     ·基因枪轰击参数的选择第54页
     ·不同基因型建立基因枪转化体系的差异第54-55页
     ·转化植株分化过程中的形态变化第55-56页
第四章 转化植株的分子检测第56-69页
   ·材料与方法第56-62页
     ·植物材料第56页
     ·组织化学染色第56页
     ·抗性植株的分子检测第56-62页
       ·植物DNA 的提取第56-58页
       ·转化植株的PCR 扩增检测第58-59页
       ·转化植株的Southern 杂交检测第59-62页
   ·结果与分析第62-67页
     ·Gus 组织显色结果第62页
     ·抗性植株的分子检测第62-65页
       ·植物DNA 提取第62-63页
       ·转化植株的 PCR 扩增检测第63-64页
       ·转化植株的 Southern 杂交检测第64-65页
     ·总体检测结果第65-67页
   ·讨论第67-69页
     ·植物基因组DNA 的提取方法第67-68页
     ·PCR 扩增中常出现的问题第68页
     ·Southern 杂交需要注意的问题第68-69页
第五章 转基因植株生理检测第69-81页
   ·材料与方法第69-71页
     ·植物材料第69页
     ·测试指标与测试方法第69-71页
       ·细胞膜透性的测定第69页
       ·丙二醛(MDA)含量的测定第69-70页
       ·过氧化物酶(POD)活性的测定第70页
       ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定第70-71页
   ·结果与分析第71-79页
     ·转基因植株形态上的变化差异第71页
     ·植株抗旱性指标测定第71-77页
       ·细胞膜透性第71-73页
       ·丙二醛含量第73-74页
       ·POD 活性第74-76页
       ·SOD 活性第76-77页
     ·植株耐盐性指标测定第77-79页
   ·讨论第79-81页
     ·植株生理指标的测定第79-80页
     ·外源基因在植株中的表达第80页
     ·提高植株抗旱、耐盐性的途径第80-81页
第六章 结论第81-83页
参考文献第83-91页
附图 I第91-92页
附图Ⅱ第92-93页
附图Ⅲ第93-94页
附图Ⅳ第94-95页
附图Ⅴ第95-96页
个人简介第96-97页
导师简介第97-98页
获得成果目录清单第98-99页
致谢第99-100页
博硕士学位论文同意发表声明第100页

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