| 1 引言 | 第1-19页 |
| ·抗虫基因的种类及抗虫原理 | 第11-13页 |
| ·苏云金芽孢杆菌 | 第11-12页 |
| ·蛋白酶抑制剂基因 | 第12页 |
| ·外源凝集素基因 | 第12-13页 |
| ·淀粉酶抑制剂基因 | 第13页 |
| ·动物来源的抗虫基因 | 第13页 |
| ·植物抗虫基因工程的研究 | 第13-15页 |
| ·Bt毒蛋白基因在植物上的应用 | 第13-14页 |
| ·蛋白酶抑制剂在植物上的应用 | 第14-15页 |
| ·植物抗虫基因工程存在的问题及其对策 | 第15-16页 |
| ·RT-PCR技术 | 第16-19页 |
| ·RT-PCR技术原理 | 第16页 |
| ·RT-PCR检测技术种类 | 第16-17页 |
| ·RT-PCR的影响因素 | 第17-18页 |
| ·RT-PCR的发展方向 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-27页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·试验材料 | 第19页 |
| ·主要试剂、酶、试剂盒 | 第19页 |
| ·所用引物 | 第19-20页 |
| ·主要仪器与设备 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-26页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第20-21页 |
| ·苹果组培苗RNA的提取及鉴定 | 第21-24页 |
| ·RT-PCR体系的建立 | 第24-26页 |
| ·外源CpTI在苹果组培苗中表达的检测 | 第26页 |
| ·主要试剂的配制方法 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-43页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第27-29页 |
| ·适于苹果组培苗基因组DNA提取方法的研究 | 第27-28页 |
| ·苹果组培苗基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·苹果组培苗基因组DNA扩增CpTI基因 | 第29页 |
| ·苹果组培苗总RNA的提取 | 第29-35页 |
| ·不同方法提取苹果组培苗总RNA的比较 | 第29-31页 |
| ·改良CTAB法提取RNA体系的优化 | 第31-33页 |
| ·提取不同时期组培苗RNA的产率和纯度 | 第33页 |
| ·离体RNA在不同条件下的保存结果 | 第33-34页 |
| ·RNA的纯化结果 | 第34-35页 |
| ·RT-PCR体系的建立 | 第35-41页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第35页 |
| ·cDNA第一链合成引物的筛选 | 第35-36页 |
| ·cDNA第一链合成引物浓度对产物的影响 | 第36页 |
| ·cDNA第一链合成中RNA模板的浓度对合成产物的影响 | 第36-37页 |
| ·PCR反应中引物的选择 | 第37-38页 |
| ·PCR反应引物浓度的优化 | 第38页 |
| ·Mg~(2+)浓度对扩增产物的影响 | 第38页 |
| ·dNTPs浓度对扩增产物的影响 | 第38-39页 |
| ·Taq酶用量对扩增产物的影响 | 第39-40页 |
| ·退火温度对扩增产物的影响 | 第40-41页 |
| ·RT-PCR体系的优化结果 | 第41页 |
| ·RT-PCR检测外源基因在苹果组培苗中的表达 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-48页 |
| ·苹果组培苗总RNA的提取 | 第43页 |
| ·防止RNA的降解 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR体系的建立 | 第44-45页 |
| ·PCR条件的选择 | 第44-45页 |
| ·PCR产物的电泳检测 | 第45页 |
| ·PCR技术检测的可靠性和灵敏度 | 第45页 |
| ·引物设计 | 第45-46页 |
| ·转基因沉默的分子机理 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |