菊花高效再生体系的建立及GAI基因转化菊花的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-23页 |
| ·菊花的种质资源 | 第9-10页 |
| ·菊花的品种资源 | 第9-10页 |
| ·菊花的育种研究 | 第10-17页 |
| ·杂交育种 | 第11-12页 |
| ·芽变选种 | 第12页 |
| ·辐射育种 | 第12-13页 |
| ·组织培养育种 | 第13-14页 |
| ·菊花基因工程育种 | 第14-17页 |
| ·GAI基因的研究进展 | 第17-21页 |
| ·GAI研究进展 | 第17-18页 |
| ·GAI的基本特征 | 第18页 |
| ·GAI在分子生物学研究中的应用 | 第18-21页 |
| ·农杆菌的研究进展 | 第21-22页 |
| ·农杆菌转化植物的步骤 | 第22页 |
| ·转化方法 | 第22页 |
| ·本论文研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·菊花再生体系的建立 | 第23-25页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·培养基基本培养基为MS培养基 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-25页 |
| ·外植体采集 | 第24-25页 |
| ·外植体的灭菌 | 第25页 |
| ·不定芽的诱导 | 第25页 |
| ·不定芽的增殖 | 第25页 |
| ·生根培养 | 第25页 |
| ·农杆菌法遗传转化菊花 | 第25-35页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·质粒及农杆菌菌株 | 第25-26页 |
| ·受体材料 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·重要试剂、酶和试剂盒 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-29页 |
| ·外植体的卡那霉素梯度筛选 | 第27页 |
| ·头孢霉素对再生的影响 | 第27-28页 |
| ·卡那霉素对生根的影响 | 第28页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第28页 |
| ·叶片的预培养对转化的影响 | 第28-29页 |
| ·感染时间对转化的影响 | 第29页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第29页 |
| ·乙酰丁香酮对转化的影响 | 第29页 |
| ·延迟筛选对转化的影响 | 第29页 |
| ·转化植株的检测 | 第29-35页 |
| ·CTAB法提取植物的总DNA | 第29-30页 |
| ·PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·转基因菊花的Southern Blot检测 | 第31-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-44页 |
| ·再生体系的建立 | 第35-37页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第35-36页 |
| ·芽的诱导 | 第36页 |
| ·芽的增殖 | 第36-37页 |
| ·生根 | 第37页 |
| ·移栽 | 第37页 |
| ·农植菌法遗传转化菊花 | 第37-44页 |
| ·外植体的卡那霉素梯度筛选 | 第37-38页 |
| ·头孢霉素对叶盘存活率的影响 | 第38页 |
| ·卡那霉素对生根的影响 | 第38-39页 |
| ·叶片的预培养对转化的影响 | 第39-40页 |
| ·感染时间对转化的影响 | 第40页 |
| ·共培养对转化的影响 | 第40-41页 |
| ·乙酰丁香酮对转化的影响 | 第41-42页 |
| ·适时的抗性筛选对转化的影响 | 第42页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-49页 |
| ·影响菊花高效再生的因素 | 第45页 |
| ·愈伤组织诱导 | 第45页 |
| ·芽的诱导 | 第45页 |
| ·芽的增殖 | 第45页 |
| ·生根和向温室移栽 | 第45页 |
| ·影响菊花遗传转化的因素 | 第45-49页 |
| ·转化体的筛选 | 第45-46页 |
| ·预培养与转化率的关系 | 第46-47页 |
| ·共培养与转化率的关系 | 第47页 |
| ·感染时间对转化的影响 | 第47页 |
| ·延迟筛选对转化的影响 | 第47-48页 |
| ·酚类化合物的添加 | 第48页 |
| ·转基因植株的检测 | 第48-49页 |
| ·关于后期工作 | 第49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| ·建立了菊花高效再生体系 | 第49页 |
| ·优化了遗传转化体系 | 第49页 |
| ·GAI基因已经成功整合到菊花 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录图版 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
