缩写名词表 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
1 文献综述 | 第15-47页 |
·植物功能基因组学 | 第15-16页 |
·植物功能基因组学研究的主要方法和技术 | 第16-30页 |
·基因表达谱分析技术 | 第16-18页 |
·以转座子或T-DNA介导的基因标签(gene tagging)技术 | 第18-24页 |
·激活标签(activation tagging) | 第20-21页 |
·启动子或增强子诱捕技术(gene trapping) | 第21-24页 |
·基因功能丧失技术 | 第24-28页 |
·基因打靶技术 | 第24-25页 |
·基因沉默—反义RNA,核酶与RNA干涉技术(RNAi) | 第25-27页 |
·显性负突变策略(dominant-negative approach) | 第27-28页 |
·基因功能增强技术 | 第28-30页 |
·双因子反式激活体系介导的基因异位表达 | 第30-42页 |
·双因子反式激活系统的作用机理 | 第30-32页 |
·双因子反式激活系统在动物功能基因组研究中的应用 | 第32-37页 |
·目标基因异位表达导致功能获得性新表型的出现 | 第32-33页 |
·目标基因异位表达导致功能丧失表型 | 第33-34页 |
·GAL4/UAS系统在大规模功能获得性突变体筛选中的应用 | 第34-36页 |
·GAL4/UAS异位表达系统在基因功能解析中的应用 | 第36-37页 |
·双因子反式激活系统在植物功能基因组研究中的应用 | 第37-42页 |
·LHG4/pOp系统在植物功能基因组中的应用 | 第37-39页 |
·GAL4/UAS系统在植物功能基因组中的应用 | 第39-42页 |
·驱动系和目标系的建立 | 第42-46页 |
·驱动系的构建 | 第42-43页 |
·目标基因 | 第43-46页 |
·转录因子 | 第43-45页 |
·转录因子作为目标基因的优越性 | 第45-46页 |
·本研究的目的及创新之处 | 第46-47页 |
2 材料与方法 | 第47-60页 |
·载体构建 | 第47-54页 |
·模式系和目标系载体的构建 | 第47-50页 |
·其它载体的构建 | 第50-54页 |
·pGOC17-shp7目标载体 | 第50-51页 |
·酵母单杂交融合载体构建 | 第51-53页 |
·原位杂交载体及亚细胞定位载体的构建 | 第53页 |
·SFL抑制载体 | 第53-54页 |
·目标系的产生和鉴定 | 第54-55页 |
·模式系的筛选 | 第55页 |
·农杆菌介导的瞬时表达 | 第55-56页 |
·遗传杂交和表型鉴定 | 第56页 |
·杂交F_1代植株报告基因表达的检测 | 第56-57页 |
·目标基因的Northern杂交分析 | 第57页 |
·RT-PCR和Real-time PCR分析 | 第57-58页 |
·Yeast one-hybrid分析 | 第58-59页 |
·SEM和组织解剖分析 | 第59页 |
·组织原位杂交和亚细胞定位 | 第59-60页 |
3 结果与分析 | 第60-95页 |
·模式系和目标系载体 | 第60-62页 |
·异位表达系统的瞬时表达验证 | 第62-64页 |
·模式系和目标系的产生 | 第64-67页 |
·模式系的产生 | 第64-65页 |
·目标系及其拷贝数的鉴定 | 第65-67页 |
·遗传杂交及杂种中的GFP报告基因检测 | 第67-70页 |
·GFP和目标基因共表达 | 第70-72页 |
·部分转录因子异位表达导致表型变化 | 第72-75页 |
·T10目标基因的异位表达和功能分析 | 第75-95页 |
·SFL突变体的鉴定 | 第75-78页 |
·SFL突变体的形态发生 | 第78-82页 |
·多心皮器官的功能 | 第82-83页 |
·C类和D类基因的增强表达 | 第83-88页 |
·SFL的体内表达 | 第88-89页 |
·SFL直接激活DL和OsMADS3,而非OsMADS13 | 第89-91页 |
·SFL的亚细胞定位及其它表型 | 第91-94页 |
·SFLknock-down表型 | 第94-95页 |
4 讨论 | 第95-123页 |
·GAL4/UAS双因子异位表达平台的建立 | 第95-97页 |
·双因子异位表达系统的优化 | 第97-104页 |
·时空双重控制 | 第97-99页 |
·模式系载体及目标载体的优化 | 第99-104页 |
·如何大规模建立目标系 | 第104-105页 |
·利用异位表达系统鉴定基因的功能 | 第105-106页 |
·组织特异性基因沉默 | 第106-110页 |
·OsMADS15功能验证 | 第110-111页 |
·SFL与水稻花器官发育 | 第111-123页 |
·水稻的花器官发育相关基因 | 第111-116页 |
·ABC模型及其更新 | 第111-114页 |
·水稻花器官特征基因 | 第114-116页 |
·SFL调控心皮发育 | 第116-117页 |
·SFL调控细胞增殖 | 第117-119页 |
·SFL的细胞非自主性与其它花器官的同源转换 | 第119-120页 |
·雌雄嵌合体及不完全转换 | 第120页 |
·SFL雌雄器官不育 | 第120-121页 |
·水稻花发育的ABC三类基因 | 第121-123页 |
5 总结和展望 | 第123-125页 |
PROTOCOLS | 第125-140页 |
参考文献 | 第140-161页 |
附录 | 第161-162页 |
致谢 | 第162页 |