中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
1.文献综述 | 第14-30页 |
·牛的基因组计划和主要的三种基因图 | 第14-15页 |
·表达序列标签(EST)在基因克隆中的应用 | 第15-16页 |
·牛QTL定位研究现状 | 第16-18页 |
·候选基因分析法克隆基因 | 第18页 |
·牛的与肉质、采食和生长性状相关的候选基因 | 第18-20页 |
·基因定位技术用于牛的研究现状 | 第20页 |
·辐射杂种板(RH)用于牛染色体定位的研究现状 | 第20-22页 |
·待分离基因的研究现状 | 第22-30页 |
·胆囊收缩素促胰酶素(Cholcystokinin CCK) | 第22-23页 |
·谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase GAD) | 第23-25页 |
·肠抑胃肽(Gastric inhibitory polypeptide GIP) | 第25-26页 |
·甘丙肽(Galanin GAL) | 第26-27页 |
·果糖二磷酸酶(Fructose-1,6-bisphosphatase FBP1) | 第27页 |
·磷酸酯酶(Phosphatase PSPH) | 第27页 |
·羧基肽酶(Carboxypeptidase CPB1) | 第27-28页 |
·PSMC1、PSMC2、PSMC4和PSMD1基因的研究及相关研究进展 | 第28-30页 |
2.本研究的目的意义 | 第30-31页 |
3.材料与方法 | 第31-46页 |
·材料 | 第31-35页 |
·DNA样品 | 第31-32页 |
·组织样品 | 第32页 |
·培养基、酶及试剂盒 | 第32-33页 |
·菌株 | 第33页 |
·主要试剂及配制 | 第33-35页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·其它试剂的配制 | 第34-35页 |
·主要仪器设备 | 第35页 |
·主要分子生物学数据库及软件 | 第35页 |
·方法 | 第35-46页 |
·用于基因分离的引物的设计方法及引物序列 | 第35-39页 |
·PCR扩增条件 | 第39页 |
·产物的纯化、克隆,鉴定和测序 | 第39-40页 |
·DNA序列同源性检索鉴定 | 第40页 |
·候选基因cDNA全长序列的克隆方法 | 第40-41页 |
·总RNA提取 | 第41页 |
·RNA的甲醛凝胶电泳 | 第41-42页 |
·RACE技术 | 第42-43页 |
·RACE、RT-PCR产物的纯化、克隆,鉴定和测序 | 第43页 |
·DNA序列同源性检索鉴定 | 第43页 |
·基因的组织表达研究 | 第43-44页 |
·分离基因物理定位的RH法 | 第44-45页 |
·引物设计 | 第44页 |
·PCR扩增分型方法 | 第44-45页 |
·数据分析方法 | 第45页 |
·基因的多态性检测方法 | 第45页 |
·标记-性状关联分析 | 第45-46页 |
·试验牛群 | 第45-46页 |
·统计模型和软件 | 第46页 |
4.结果 | 第46-74页 |
·利用辐射杂种板(RH)进行精细定位结果 | 第46-48页 |
·牛FBP1、CCK、CPB1和GIP基因的分离、鉴定及相关研究 | 第48-56页 |
·总RNA的提取与检测结果 | 第48-49页 |
·FBP1基因的RACE结果、cDNA序列分析和蛋白质的系统发生树 | 第49-51页 |
·CCK基因的RACE结果及cDNA序列分析 | 第51-52页 |
·CPB1基因的RACE结果及cDNA序列分析 | 第52-55页 |
·GIP基因的RACE结果及cDNA序列分析 | 第55-56页 |
·新分离的基因多态性检测结果 | 第56-64页 |
·GAD1基因的多态性检测 | 第56-58页 |
·GAD2基因的多态性检测 | 第58-59页 |
·GIP基因的多态性检测 | 第59-60页 |
·GAL基因的多态性检测 | 第60-62页 |
·FBP1基因的多态性检测 | 第62-63页 |
·PSMC1基因的多态性检测 | 第63-64页 |
·不同基因多态性与性状的关联分析结果 | 第64-70页 |
·GAD1基因SNP与部分性状的关联分析 | 第65-66页 |
·GAL基因102位点SNP与部分性状的关联分析 | 第66-67页 |
·GAL基因837位点SNP与部分性状的关联分析 | 第67页 |
·GAD2基因Hae Ⅲ酶切多态与部分性状的关联分析 | 第67-68页 |
·GIP基因SNP与部分性状的关联分析 | 第68-69页 |
·FBP1基因SNP与部分性状的关联分析 | 第69页 |
·PSMC1基因SNP与部分性状的关联分析 | 第69-70页 |
·Real-time定量PCR | 第70-74页 |
·FBP1基因表达特征 | 第70-72页 |
·PSPH基因的表达特征 | 第72-73页 |
·PSMC1基因的表达特征 | 第73-74页 |
5.讨论 | 第74-83页 |
·关于基因的分离 | 第74-75页 |
·关于基因的定位 | 第75页 |
·关于SNP检测 | 第75-77页 |
·关于总RNA质量和RACE方法 | 第77页 |
·关于cDNA的分离和推导分析 | 第77-78页 |
·关于基因多态性与性状的关联分析 | 第78-81页 |
·GAD1和GAD2基因与性状的关联分析 | 第79-80页 |
·基因与采食量、日增重等生产性状的关联分析 | 第80页 |
·基因与背膘厚、眼肌面积等胴体性状的关联分析 | 第80页 |
·基因与料肉比、净肉率、屠宰率等性状的关联分析 | 第80-81页 |
·基因与胴体长、胴体胸深等胴体性状的关系 | 第81页 |
·基因与胃、肠等消化器官发育有关性状的关联分析 | 第81页 |
·关于荧光定量和RT-PCR分析基因在组织中的表达情况 | 第81-83页 |
6.小结 | 第83-86页 |
参考文献 | 第86-105页 |
附录1 FBP1、CCK、GIP和CPB1基因的cDNA全长序列以及推导的氨基酸序列 | 第105-109页 |
附录2 缩略词表 | 第109-110页 |
附录3 主要性状的中英文对照和缩写 | 第110-111页 |
在读期间已发表(待发表)论文和出版的著作 | 第111-112页 |
致谢 | 第112-113页 |