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马传染性贫血病毒分离株WH17全基因组克隆、序列分析及LTR启动子活性研究

目录第1-5页
摘要第5-6页
Abstract第6-7页
文献综述第7-25页
   ·马传染性贫血病毒概述第7-12页
     ·EIAV的历史及分类地位第7-8页
     ·EIAV的形态和理化特性第8-9页
     ·国内外EIAV毒株及特性第9-10页
     ·EIAV的血凝性第10-11页
     ·EIAV的细胞嗜性第11页
     ·EIAV的致病性第11-12页
   ·马传染性贫血病毒的分子生物学第12-21页
     ·EIAV基因组结构第13-14页
     ·gag基因及其编码蛋白第14-15页
     ·pol基因及其编码蛋白第15-16页
     ·env基因及其编码产物第16-18页
     ·EIAV的其它小开放阅读框架及其编码产物第18-19页
     ·EIAV的非编码区-LTR第19-21页
   ·慢病毒与糖基化第21页
   ·EIAV的复制、蛋白质合成和形态发生第21-23页
   ·EIAV分子致病机制第23-24页
   ·EIAV感染的免疫控制第24-25页
第二章 马传染性贫血病毒分离株的全基因组克隆和序列分析第25-42页
   ·研究目的和意义第25页
   ·材料和方法第25-28页
     ·毒株第25页
     ·实验动物第25页
     ·酶和主要试剂第25-26页
     ·引物设计第26页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备(氯化钙法)第26-27页
     ·质粒的转化第27页
     ·质粒的少量制备(碱裂解法)第27页
     ·前病毒全基因的PCR扩增第27页
     ·基因的克隆与鉴定第27页
     ·序列测定和分析第27-28页
   ·结果第28-42页
     ·PCR扩增和重组质粒的鉴定第28页
     ·前病毒全基因组序列第28-35页
     ·分离株WH17与国内L株、DA、DLA株核苷酸和氨基酸比较第35-36页
     ·分离株WH17与国外毒株核苷酸和氨基酸序列比较第36-37页
     ·gag、pol和其编码的蛋白的比较结果第37页
     ·gp90序列分析第37-39页
     ·LTR序列分析第39-40页
     ·TAT的比较结果第40页
     ·S2蛋白的比较第40-41页
     ·REV蛋白的比较第41-42页
第三章 马传染性贫血病毒分离株WH17LTR(长末端重复序列)启动子活性研究第42-51页
   ·研究目的与意义第42页
   ·材料和方法第42-46页
     ·载体和细胞第42页
     ·毒株第42页
     ·试剂和引物第42-43页
     ·PCR的扩增第43页
     ·E-box的点突变(N-191C-T)第43-44页
     ·重组质粒pLTR的构建第44页
     ·质粒的纯化第44-45页
     ·重组EIAV Tat瞬时表达与间接免疫荧光检测第45页
     ·PCDNA3.1-Tat转染FDD和健康驴白细胞第45页
     ·间接免疫荧光检测Tat的表达第45-46页
     ·重组质粒pLTR转染EIAV阴性健康驴白细胞和FDD细胞第46页
     ·CAT活性的检测第46页
   ·结果第46-49页
     ·重组质粒的鉴定第47页
     ·重组质粒的酶切鉴定第47页
     ·突变分子克隆的获得第47页
     ·PCDNA3.1-Tat的间接免疫荧光检测第47-48页
     ·CAT ELISA检测结果第48-49页
   ·讨论第49-51页
讨论第51-54页
结论第54-55页
参考文献第55-62页
致谢第62-63页
附录第63页

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