| 原创性声明 | 第1页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第3-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-25页 |
| 第一节 植物蛋白激酶的研究进展 | 第9-15页 |
| 1 蛋白激酶的进化与分类 | 第9-11页 |
| 2 蛋白激酶在植物体中的生理功能 | 第11-15页 |
| 第二节 蛋白质的亚细胞定位研究 | 第15-20页 |
| 1 亚细胞定位信号 | 第15-17页 |
| 2 亚细胞定位的功能 | 第17-19页 |
| 3.亚细胞器标记蛋白 | 第19-20页 |
| 第三节 绿色荧光蛋白的应用 | 第20-24页 |
| 1.GFP及其特性 | 第20页 |
| 2.GFP的改进 | 第20-21页 |
| 3 GFP的应用及前景 | 第21-24页 |
| 第四节 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-36页 |
| 1 试验材料和试剂 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌种与质粒 | 第25页 |
| ·酶以及试剂 | 第25-26页 |
| 2 生物信息学分析 | 第26页 |
| 3 试验方法 | 第26-36页 |
| ·质粒的提取 | 第26-27页 |
| ·重组载体的构建 | 第27-30页 |
| ·转化根癌农杆菌 | 第30-31页 |
| ·根瘤农杆菌介导转化拟南芥 | 第31-32页 |
| ·鉴定转基因植株 | 第32-33页 |
| ·原生质体分离纯化 | 第33-34页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-54页 |
| 1.植物表达载体的构建与鉴定 | 第36-39页 |
| ·游离GFP载体的构建 | 第36页 |
| ·融合基因表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·植物表达载体的多重酶切鉴定 | 第37-39页 |
| 2 农杆菌转化及转基因拟南芥的获得 | 第39-41页 |
| ·抗性筛选 | 第39页 |
| ·转基因拟南芥的PCR检测 | 第39-41页 |
| ·转化效率的比较 | 第41页 |
| 3 荧光显微检测 | 第41-45页 |
| ·高表达株系的筛选 | 第41-42页 |
| ·各转基因植株在各器官内荧光分布情况 | 第42-44页 |
| ·荧光表达株系后代的分离比率 | 第44-45页 |
| 4 亚细胞定位 | 第45-54页 |
| ·ZmPti1的亚细胞定位 | 第45-49页 |
| ·ZmSPK1的亚细胞定位 | 第49-50页 |
| ·ZmASK1的亚细胞定位 | 第50-51页 |
| ·ZmSIMK1的亚细胞定位 | 第51-54页 |
| 第四章 讨论 | 第54-57页 |
| 1.表达系统的选择 | 第54页 |
| 2.ZmPti1是非胞质型蛋白激酶 | 第54-55页 |
| 3.N—豆蔻酰化位点并不引导ZmSPK1定位于膜内 | 第55页 |
| 4.造成ZmASK1与ZmSIMK1荧光表达弱的可能原因 | 第55-57页 |
| 全文结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 附录 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67页 |