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皱纹盘鲍热休克蛋白70基因的克隆、表达及应用

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
第一章 文献综述第12-59页
 第一节 热休克蛋白的研究进展及应用第12-37页
  1. 热休克蛋白的研究历史第12-13页
  2. 热休克蛋白的分类第13页
  3. 热休克蛋白的分布第13-15页
  4. 热休克蛋白的分子结构特征第15-20页
   ·HSP90 家族的分子结构第15-17页
   ·HSP70 家族的分子结构第17-19页
   ·HSP60 家族的分子结构第19页
   ·小分子HSPS 家族的分子结构第19-20页
  5. HSPS 的辅助蛋白第20-21页
   ·HSP90 家族的辅助蛋白第20页
   ·HSP70 家族的辅助蛋白第20-21页
   ·HSP60 家族的辅助蛋白第21页
  6. 热休克蛋白基因及其调控第21-25页
   ·热休克基因的转录调控第21-24页
   ·转录后水平(翻译水平)的调控第24页
   ·热休克基因的特异表达调控第24-25页
   ·热休克基因不寻常的剪切第25页
  7 热激信号的传导第25-27页
   ·HSPS 诱导因子第25-26页
   ·热激信号传导途径第26-27页
  8. 热休克蛋白的生物学功能第27-32页
   ·充当分子伴侣第27-28页
   ·使生物获得耐热性第28-29页
   ·调控细胞骨架动力学第29页
   ·抗氧化作用第29-30页
   ·参与免疫应答第30-31页
   ·调节细胞凋亡第31-32页
  9 HSPS 的研究意义第32-37页
   ·HSPS 与衰老的研究第32-33页
   ·HSPS 与生物进化的研究第33-34页
   ·HSPS 与生物标记(BIOMARKER)第34-35页
   ·HSPS 与肿瘤的治疗第35-37页
 第二节 水生生物HSPS 研究进展第37-58页
  1. 贝类HSP 的研究进展第38-40页
  2. 其他水生生物HSP 的研究进展第40-42页
  3. 分离贝类免疫相关基因的方法第42-47页
   ·图位克隆技术第42-43页
   ·简并PCR 技术第43页
   ·差异表达基因分离技术第43-45页
   ·转座子标签技术第45页
   ·序列表达标签法第45-46页
   ·RACE-PCR 技术第46-47页
  4. 基因表达常规分析方法第47-58页
   ·NORTHERN 印迹第48-49页
   ·核糖核酸酶保护实验第49页
   ·半定量RT-PCR 法第49-50页
   ·实时荧光定量PCR(REAL-TIME FLUORESCENT QUANTITATIVE PCR)第50-56页
   ·基因表达序列分析(SERIAL ANALYSIS OF GENE EXPRESSION, SAGE)第56-57页
   ·微阵列法第57-58页
 第三节 本论文的研究目的及意义第58-59页
第二章 编码皱纹盘鲍一种HSP70 的CDNA 克隆及其序列分析第59-86页
 1. 前言第59-60页
 2. 材料与方法第60-72页
   ·材料第60-61页
   ·试验方法第61-72页
 3. 结果第72-83页
   ·RNA 提取第72页
   ·皱纹盘鲍热休克蛋白70 基因中间片段扩增第72-73页
   ·HSP70 全长CDNA 的克隆第73页
   ·皱纹盘鲍HSP70 基因的氨基酸序列分析第73-76页
   ·HSP70 基因的二级结构分析第76-77页
   ·HSP70 基因的空间结构预测第77-78页
   ·HSP70 基因的同源性分析第78-81页
   ·表达载体的构建第81-83页
 4. 讨论第83-86页
第三章 皱纹盘鲍HSP70MRNA 表达水平的研究第86-97页
 1. 前言第86-87页
 2. 材料与方法第87-90页
   ·材料第87-88页
   ·方法第88-90页
 3. 结果第90-94页
   ·皱纹盘鲍HSP70 基因的组织特异性表达第90-91页
   ·用RT-PCR 检测热诱导下HSP70 基因表达第91-92页
   ·用RT-PCR 检测鳗弧菌(VIBRIO ANGUILLARUM)感染后HSP70 基因表达第92-94页
 4. 讨论第94-97页
第四章 四个人工选育皱纹盘鲍群体HSP70 的表达分析第97-106页
 1. 前言第97-98页
 2. 材料与方法第98-99页
   ·实验材料第98页
   ·实验方法第98-99页
 3. 结果第99-103页
   ·生长速率第99-100页
   ·HSP70 片段序列分析第100-102页
   ·不同群体皱纹盘鲍HSP70 转录表达变化第102-103页
   ·生长速率与HSP70 表达量的相关性第103页
 4. 讨论第103-106页
第五章 荧光定量PCR 检测皱纹盘鲍HSP70 的表达第106-123页
 1. 前言第106-107页
 2. 材料与方法第107-110页
   ·材料第107-108页
   ·方法第108-110页
 3. 结果第110-118页
   ·标准曲线的制作第110-112页
   ·用REAL-TIME PCR 检测热诱导下皱纹盘鲍肌肉组织中HSP70 基因表达第112-114页
   ·不同壳色越冬后皱纹盘鲍在温度胁迫下的HSP70 REAL-TIME PCR 分析第114-118页
 4. 讨论第118-123页
   ·标准曲线的建立第118-119页
   ·体系的确立第119页
   ·产物特异性,引物二聚体和检测灵敏度第119-120页
   ·HSPS 实时定量检测第120-121页
   ·RT-PCR 半定量检测和REAL-TIME PCR 的结果比较第121页
   ·皱纹盘鲍南方越冬后HSP70 的表达量分析第121-123页
结论第123-124页
参考文献第124-143页
致谢第143页

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