中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-59页 |
第一节 热休克蛋白的研究进展及应用 | 第12-37页 |
1. 热休克蛋白的研究历史 | 第12-13页 |
2. 热休克蛋白的分类 | 第13页 |
3. 热休克蛋白的分布 | 第13-15页 |
4. 热休克蛋白的分子结构特征 | 第15-20页 |
·HSP90 家族的分子结构 | 第15-17页 |
·HSP70 家族的分子结构 | 第17-19页 |
·HSP60 家族的分子结构 | 第19页 |
·小分子HSPS 家族的分子结构 | 第19-20页 |
5. HSPS 的辅助蛋白 | 第20-21页 |
·HSP90 家族的辅助蛋白 | 第20页 |
·HSP70 家族的辅助蛋白 | 第20-21页 |
·HSP60 家族的辅助蛋白 | 第21页 |
6. 热休克蛋白基因及其调控 | 第21-25页 |
·热休克基因的转录调控 | 第21-24页 |
·转录后水平(翻译水平)的调控 | 第24页 |
·热休克基因的特异表达调控 | 第24-25页 |
·热休克基因不寻常的剪切 | 第25页 |
7 热激信号的传导 | 第25-27页 |
·HSPS 诱导因子 | 第25-26页 |
·热激信号传导途径 | 第26-27页 |
8. 热休克蛋白的生物学功能 | 第27-32页 |
·充当分子伴侣 | 第27-28页 |
·使生物获得耐热性 | 第28-29页 |
·调控细胞骨架动力学 | 第29页 |
·抗氧化作用 | 第29-30页 |
·参与免疫应答 | 第30-31页 |
·调节细胞凋亡 | 第31-32页 |
9 HSPS 的研究意义 | 第32-37页 |
·HSPS 与衰老的研究 | 第32-33页 |
·HSPS 与生物进化的研究 | 第33-34页 |
·HSPS 与生物标记(BIOMARKER) | 第34-35页 |
·HSPS 与肿瘤的治疗 | 第35-37页 |
第二节 水生生物HSPS 研究进展 | 第37-58页 |
1. 贝类HSP 的研究进展 | 第38-40页 |
2. 其他水生生物HSP 的研究进展 | 第40-42页 |
3. 分离贝类免疫相关基因的方法 | 第42-47页 |
·图位克隆技术 | 第42-43页 |
·简并PCR 技术 | 第43页 |
·差异表达基因分离技术 | 第43-45页 |
·转座子标签技术 | 第45页 |
·序列表达标签法 | 第45-46页 |
·RACE-PCR 技术 | 第46-47页 |
4. 基因表达常规分析方法 | 第47-58页 |
·NORTHERN 印迹 | 第48-49页 |
·核糖核酸酶保护实验 | 第49页 |
·半定量RT-PCR 法 | 第49-50页 |
·实时荧光定量PCR(REAL-TIME FLUORESCENT QUANTITATIVE PCR) | 第50-56页 |
·基因表达序列分析(SERIAL ANALYSIS OF GENE EXPRESSION, SAGE) | 第56-57页 |
·微阵列法 | 第57-58页 |
第三节 本论文的研究目的及意义 | 第58-59页 |
第二章 编码皱纹盘鲍一种HSP70 的CDNA 克隆及其序列分析 | 第59-86页 |
1. 前言 | 第59-60页 |
2. 材料与方法 | 第60-72页 |
·材料 | 第60-61页 |
·试验方法 | 第61-72页 |
3. 结果 | 第72-83页 |
·RNA 提取 | 第72页 |
·皱纹盘鲍热休克蛋白70 基因中间片段扩增 | 第72-73页 |
·HSP70 全长CDNA 的克隆 | 第73页 |
·皱纹盘鲍HSP70 基因的氨基酸序列分析 | 第73-76页 |
·HSP70 基因的二级结构分析 | 第76-77页 |
·HSP70 基因的空间结构预测 | 第77-78页 |
·HSP70 基因的同源性分析 | 第78-81页 |
·表达载体的构建 | 第81-83页 |
4. 讨论 | 第83-86页 |
第三章 皱纹盘鲍HSP70MRNA 表达水平的研究 | 第86-97页 |
1. 前言 | 第86-87页 |
2. 材料与方法 | 第87-90页 |
·材料 | 第87-88页 |
·方法 | 第88-90页 |
3. 结果 | 第90-94页 |
·皱纹盘鲍HSP70 基因的组织特异性表达 | 第90-91页 |
·用RT-PCR 检测热诱导下HSP70 基因表达 | 第91-92页 |
·用RT-PCR 检测鳗弧菌(VIBRIO ANGUILLARUM)感染后HSP70 基因表达 | 第92-94页 |
4. 讨论 | 第94-97页 |
第四章 四个人工选育皱纹盘鲍群体HSP70 的表达分析 | 第97-106页 |
1. 前言 | 第97-98页 |
2. 材料与方法 | 第98-99页 |
·实验材料 | 第98页 |
·实验方法 | 第98-99页 |
3. 结果 | 第99-103页 |
·生长速率 | 第99-100页 |
·HSP70 片段序列分析 | 第100-102页 |
·不同群体皱纹盘鲍HSP70 转录表达变化 | 第102-103页 |
·生长速率与HSP70 表达量的相关性 | 第103页 |
4. 讨论 | 第103-106页 |
第五章 荧光定量PCR 检测皱纹盘鲍HSP70 的表达 | 第106-123页 |
1. 前言 | 第106-107页 |
2. 材料与方法 | 第107-110页 |
·材料 | 第107-108页 |
·方法 | 第108-110页 |
3. 结果 | 第110-118页 |
·标准曲线的制作 | 第110-112页 |
·用REAL-TIME PCR 检测热诱导下皱纹盘鲍肌肉组织中HSP70 基因表达 | 第112-114页 |
·不同壳色越冬后皱纹盘鲍在温度胁迫下的HSP70 REAL-TIME PCR 分析 | 第114-118页 |
4. 讨论 | 第118-123页 |
·标准曲线的建立 | 第118-119页 |
·体系的确立 | 第119页 |
·产物特异性,引物二聚体和检测灵敏度 | 第119-120页 |
·HSPS 实时定量检测 | 第120-121页 |
·RT-PCR 半定量检测和REAL-TIME PCR 的结果比较 | 第121页 |
·皱纹盘鲍南方越冬后HSP70 的表达量分析 | 第121-123页 |
结论 | 第123-124页 |
参考文献 | 第124-143页 |
致谢 | 第143页 |